王丽娟
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:蚌埠医学院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- BCG HSP_(65)-GP_2融合蛋白的原核表达及其鉴定
- 2002年
- 目的 :表达可能对多种表皮来源的肿瘤具有预防及治疗作用的卡介苗热休克蛋白 6 5 (BCGHSP65)与人Her 2 /neuCTL表位 (GP2 )构成的融合蛋白 (BCGHSP65 GP2 )。方法 :将已构建的经筛选确定为正向重组的原核表达质粒PET15b BCGHSP65 GP2 转化感受态宿主菌BL2 1(DE3 )PlysS ,加IPTG诱导后 ,提取全菌总蛋白进行SDS PAGE分析 ,并用Western blot验证有无特异性目的蛋白表达。结果 :SDS PAGE分析显示 ,带正向重组质粒的菌株经IPTG诱导后 ,表达了一相对分子量约为 6 2 .3kD的新蛋白 ,Western blot结果显示诱导组具有特异性阳性条带。结论 :BCGHSP65 GP2 融合蛋白得到正确表达 ,使简便获得大量BCGHSP65 GP2 融合蛋白成为可能 ,为肿瘤疫苗的研究奠定了基础。
- 王丽娟吴士彬于永利王丽颖
- 关键词:热休克蛋白质类原核表达WESTERN-BLOT
- BCG HSP65-人HER-2/neuT细胞表位融合蛋白基因的扩增及序列分析被引量:2
- 2002年
- 目的 :获得卡介苗热休克蛋白 6 5 (BCGHSP6 5 )与人HER 2 /neuT细胞表位 (GP2 )构成的融合蛋白 (BCGHSP6 5 GP2 )基因 ,并对其进行测序。方法 :从卡介苗结核杆菌中提取其基因组DNA ,设计一对寡核苷酸引物 ,采用聚合酶链反应 (PCR)获得BCGHSP6 5基因 ,再设计一对寡核苷酸引物 ,再次PCR ,获得BCGHSP6 5 GP2 基因 ,DNA序列分析BCGHSP6 5 GP2 基因。结果 :本实验采用两轮PCR方法获得的基因片段长度为 170 0bp ,DNA序列分析确证为编码BCGHSP6 5 GP2 融合蛋白的序列。结论 :采用PCR获得BCGHSP6 5 GP2 基因序列是正确的 。
- 王丽娟吴士彬于永利王丽颖
- 关键词:T细胞表位基因表达调节
- 败血症及发热待查患者血液中金黄色葡萄球菌抗体的测定被引量:4
- 1997年
- 因为败血症及原因不明发热疾病常为金黄色葡萄球菌感染。由于培养前常用过抗生素,常规培养不易生长,L型培养虽可提高阳性率,但返祖鉴定时间较长,加做金黄色葡萄球菌抗体试管定量测定可供参考。结果败血症或发热待查117例平均效价1∶261.60疑为钩体感染110例平均效价1∶157,大学生对照组42人平均效价1∶28.75,P<0.01三者差异非常显著。
- 唐素兰王丽娟宋秀宇刘从森闵宏林潘立民
- 关键词:败血症发热金黄色葡萄球菌抗体检测
- PET_(15b)-BCG HSP65-GP_2重组质粒的构建与鉴定被引量:1
- 2002年
- 目的 :构建表达卡介苗热休克蛋白 6 5 (BCGHSP6 5 )与人HER 2 /neu细胞毒T淋巴细胞 (CTL)表位 (GP2 )构成的融合蛋白 (BCGHSP6 5 GP2 )的重组质粒。方法 :将用PCR方法扩增并回收的BCGHSP6 5 GP2 基因片段与原核表达质粒PET15b重组 ,经过酶谱分析筛选出正向重组质粒 ,DNA序列分析正向重组质粒。结果 :筛选出 3个正向重组质粒。结论 :重组表达质粒PET15b BCGHSP6 5 GP2 的构建是成功的 。
- 王丽娟吴士彬于永利王丽颖
- 关键词:基因表达调节癌基因产物热休克蛋白类HER-2/NEU