焦志勇
- 作品数：11 被引量：68H指数：5
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多组分重组减毒沙门疫苗菌对幽门螺杆菌感染的免疫保护作用被引量：7
- 2003年
- 目的 利用人类幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染的小鼠模型研究多组分重组减毒沙门疫苗菌对幽门螺杆菌感染的免疫保护作用。方法 将二级C5 7BL/ 6小鼠随机分成 6组 ,通过灌胃方法分别给予生理盐水 (A组 )、PBS(B组 )、减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1(C组 )、重组减毒鼠伤寒沙门菌pTrc99A -ureB +pGSTag -katA(D组 )、重组减毒鼠伤寒沙门菌pTrc99A -ureB +pTrc99A -HPaA(F组 )及重组减毒鼠伤寒沙门菌 pTrc99A -ureB +pGSTag -katA +pTrc99A -HPaA(F组 )。免疫后 4周 ,予Hp进行攻击 (A组不攻击 )。攻击菌量 10 7CFU/只 ,灌胃 2次 ,每日 1。再 4周后处死动物 ,取胃组织分别行尿素酶试验、改良Giemsa染色及定量细菌培养 ,观察Hp定植情况。行HE染色观察胃粘膜组织炎症情况。取脾组织行淋巴细胞增殖试验。结果 A组小鼠Hp定植密度为 0 ,B组为 9 4 9× 10 6CFU/ g胃组织 ,C组为 1 4 2× 10 6CFU/ g胃组织 ,D组、E组和F组小鼠分别为 2 92× 10 5CFU/g、5 5 1× 10 5CFU/g和 2 16× 10 5CFU/g胃组织 ,C组、D组、E组和F组与A组和B组相比定植密度均明显降低 (P <0 0 5 )。免疫组与对照组胃粘膜均无明显炎症反应。免疫组脾淋巴细胞增殖试验阳性。结论 口服多组分重组减毒沙门疫苗菌对小鼠Hp感染具有一定免?
- 李国庆陈旻湖焦志勇陈洁朱森林陈为胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌感染免疫保护作用
- 优化构建UreB/HpaA双价幽门螺杆菌减毒活菌疫苗的免疫保护作用被引量：18
- 2003年
- 目的 以减毒鼠伤寒沙门菌为载体 ,通过在UreB和HpaA间引入由 3个甘氨酸残基组成的三肽柔韧接头 ,构建成UreB/HpaA双价抗幽门螺杆菌 (Hp)活疫苗 ,并对照相应单价疫苗和空白载体研究其对C5 7BL/6小鼠的免疫保护效果。方法 用序列重叠延伸聚合酶链反应扩增带 3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因ureB/hpaA ,进一步以减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1为载体构建UreB/HpaA双价活疫苗 ,观察其在小鼠体内的稳定性。用双价活疫苗株免疫Ⅱ级C5 7BL/6小鼠 1次 ,对照单价活疫苗和空白载体观察其在体内诱导的特异抗体反应和对小鼠的免疫保护作用。结果 测序结果显示 ,3个甘氨酸残基的编码序列GGTGGAGGC已成功地插入UreB/HpaA融合基因中。双价疫苗灌喂小鼠后 ,至少能在脾脏和回肠末段存留 10d。双价疫苗在小鼠体内诱导血清特异性IgG1和IgG2a水平明显升高。UreB/HpaA双价疫苗的免疫保护率为77.3% (17/2 2 ) ,而UreB疫苗和HpaA疫苗的免疫保护率分别为5 0 .0 % (12 /2 4 )和 4 3.5 % (10 /2 3)。结论 引入柔韧接头 ,优化构建表达UreB和HpaA的双价抗Hp活疫苗。UreB/HpaA双价活疫苗对Ⅱ级C5 7BL/6小鼠有更好的免疫保护作用。
- 朱森林陈旻湖陈洁焦志勇李国庆陈为彭晓忠胡品津
- 关键词：UREBHPAA免疫保护作用
- 表达幽门螺杆菌NAP基因的减毒沙门菌疫苗株的建立被引量：2
- 2003年
- 目的 :建立表达幽门螺杆菌 (H .pylori)中性粒细胞活化蛋白(Hp NAP)的减毒沙门菌疫苗株。方法 :用PCR扩增Hp NAP基因 ,并克隆至原核表达质粒 pTrc99A中 ,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列 ,并与GenBank中相关序列的同源性进行比较。以重组质粒 pTrc99A NAP转化减毒伤寒沙门菌SL32 6 1,培养后筛选阳性菌落 ,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定。表达的Hp NAP蛋白用SDS PAGE进行鉴定 ,用薄层扫描分析蛋白含量。结果 :核苷酸序列测定及同源性分析证实 ,克隆的Hp NAP基因与GenBank中相关序列的同源性为98% (397/40 2 ) ,氨基酸序列的同源性为 98% (131/133)。以重组质粒pTrc99A NAP转化的减毒沙门菌 ,可表达Mr 约15 0 0 0的Hp NAP蛋白 ,表达量约占菌体蛋白量的 37.5 %。结论 :建立了可表达Hp NAP基因的减毒鼠伤寒沙门疫苗株 ,为进一步研制Hp口服疫苗奠定了基础。
- 焦志勇陈旻湖朱森林李国庆陈洁胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌减毒鼠伤寒沙门菌疫苗
- 肠易激综合征治疗学进展被引量：7
- 2002年
- 王伟岸胡品津焦志勇
- 关键词：临床分型肠易激综合征
- 表达幽门螺杆菌NAP蛋白的减毒沙门疫苗菌株预防幽门螺杆菌感染被引量：8
- 2006年
- 目的建立表达幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)中性粒细胞活化蛋白(Hp-NAP)的减毒沙门疫苗菌,并利用人类幽门螺杆菌感染的小鼠模型研究疫苗菌对Hp感染的免疫保护作用。方法利用分子克隆技术构建携带Hp-NAP基因的重组原核表达质粒pTrc99A-NAP,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列,并与美国国立医学图书馆基因文库中相关序列的同源性进行比较。重组质粒pTrc99A-NAP转化减毒伤寒沙门菌SL3261,培养后筛选阳性菌落,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定。表达的Hp-NAP蛋白用SDS-PAGE和West-blotting进行鉴定,用薄层扫描分析蛋白含量。C57BL/6小鼠随机分成4组,分别灌胃给予生理盐水(A组)、减毒鼠伤寒沙门菌SL3261(B组)、携带pTrc99A的SL326组(C组)、携带pTrc99A-NAP的SL326组重(D组)。免疫后4周,予Hp攻击,攻击菌量107CFU/只,灌胃2次,每日1次。攻击4周后处死动物,取胃组织分别行改良Giemsa染色及定量细菌培养,观察Hp定植情况。结果核苷酸序列测定及同源性分析证实,克隆的Hp-NAP基因与GenBank中相关序列的同源性为98%(397/402),氨基酸序列的同源性为98%(131/133)。pTrc99A-NAP转化的减毒沙门菌,可表达Mr约15000的Hp-NAP蛋白,表达量约占菌体蛋白量的37·5%;表达的新生蛋白能与小鼠抗Hp血清特异性反应,具有良好的免疫原性。同空白对照组、SL3261组和SL3261(pTrc99A)组相比,表达Hp-NAP的疫苗株组实验动物的胃组织Hp定植密度明显下降(P<0·05)。结论成功构建表达Hp-NAP的减毒沙门疫苗菌;重组疫苗菌对小鼠Hp感染具有一定免疫预防作用,可作为未来多组分重组减毒沙门疫苗菌的侯选菌株之一。
- 焦志勇陈旻湖朱森林陈洁李国庆陈为胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗免疫
- 携带幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位基因重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌的构建和鉴定
- 2003年
- 背景:幽门螺杆菌(H.pylori)是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌,以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建活疫苗已成为探索新型H.pylori疫苗的重要途径。目的:构建携带H.pylori热休克蛋白B亚单位(hspB)基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌。方法:应用基因工程技术将1640 bp的hspB基因克隆入原核表达质粒pTrc99A。对重组质粒进行序列测定,并将测序结果与基因文库中H.pylori-hspB的基因和蛋白序列进行BLAST分析,再将重组质粒导入活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)和双酶切,证实构建了携带hspB基因的重组原核表达质粒pTrc99A.hspB,后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。所构建的重组质粒pTrc99A-hspB中所含的H.pylori-spB与基因文库中H.pylori-hspB基因和蛋白的同源性均为97％。结论:成功构建并鉴定了携带H.pylori-hspB基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌,为研制H.pylori口服疫苗奠定了基础。
- 李国庆焦志勇陈旻湖朱森林陈洁胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌基因重组慢性活动性胃炎鼠伤寒沙门菌
- OMGE临床指南:便秘被引量：22
- 2002年
- 焦志勇
- 关键词：发病机制便秘
- 幽门螺杆菌感染免疫预防及其机理研究
- 陈旻湖朱森林胡品津廖文俊陈洁焦志勇李国庆曾志荣
- 1992年1月～2002年12月，由卫生部临床学科重点项目、教育部骨干教师基金、广东省自然科学基金重点项目、广东省高教厅“千百十工程”优秀人才基金等资助，进行了研究。幽门螺杆菌(H.pylori)感染是胃炎、消化性溃疡乃...
- 关键词：
- 关键词：幽门螺杆菌感染病理生理学免疫疫苗免疫预防
- 幽门螺杆菌疫苗免疫小鼠的Th免疫应答及作用被引量：5
- 2003年
- 目的 研究幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)疫苗诱导小鼠保护性免疫应答的机制。方法 以霍乱毒素 (CT)加Hp全菌超声粉碎抗原免疫小鼠 ,并设CT组和生理盐水 (NS)组为对照。免疫 4周后以Hp攻击 ;在攻击前后不同时间点分批处死小鼠 ,比较免疫组和对照组胃黏膜Hp定植及各项免疫指标的变化。结果 (1)攻击后 5、2 6周后免疫组和CT组、NS组相比胃黏膜Hp定植量明显降低。 (2 )各时间点免疫组IgG1、IgG2a、IgA均高于NS组、CT组。 (3)攻击前和攻击后 5周免疫组和CT组胃黏膜Th1型细胞因子表达较NS组明显升高。攻击后 2 6周免疫组和CT组除白细胞介素 (IL) 12外 ,干扰素 (IFN) γ和IL 2表达均明显降低 ,而NS组Th1型细胞因子表达明显升高。 (4)Th2型细胞因子在攻击前免疫组和CT组胃黏膜均有轻度表达 ;攻击后 5周免疫组和CT组IL 4和IL 10均无表达 ,IL 6表达低于NS组 ;攻击后 2 6周免疫组IL 4和IL 10再次表达 ,CT组仅表达IL 10 ,IL 6表达各组无明显差异。 (5 )各细胞因子在所有组脾脏攻击前后各时间点表达无差异。 (6 )与NS组相比 ,攻击后5周免疫组鼠胃黏膜出现明显的炎症反应 ,CT组也有轻度炎症反应 ;攻击后 2 6周NS组炎症加重而免疫组则有所减轻。结论 (1)以CT为佐剂的Hp疫苗可诱导Th1和Th2混合型初始免疫?
- 陈洁陈旻湖李国庆焦志勇梁伟强胡品津沈祖尧
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗免疫应答胃炎TH2反应
- 幽门螺杆菌疫苗的实验研究
- 陈旻湖朱森林胡品津廖文俊陈洁焦志勇李国庆曾志荣陈为彭晓忠
- 该项目在国际上首次证明通过免疫途径可以预防HP感染。在国际上首次证明无毒的霍乱毒素B亚单位可以作为免疫佐剂用于口服疫苗，预防HP感染。在国内首次报道单组分抗原尿素酶加CT组成的口服疫苗有较高的免疫保护力。以减毒鼠伤寒沙门...
- 关键词：
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗基因工程
