杨梦华
- 作品数:18 被引量:16H指数:3
- 供职机构:浙江农林大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立被引量:4
- 2015年
- 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L^200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。
- 桂海娈金庆日张亚军王晓杜杨永春邵春艳程昌勇卫芳芳杨杨杨梦华宋厚辉
- 关键词:赭曲霉毒素A核酸适体荧光
- 基于非标记荧光染料和核酸适配体的检测生物分子的方法
- 本发明涉及生物工程领域,旨在提供一种基于非标记荧光染料和核酸适配体的检测生物分子的方法。该方法是将核酸适配体和待检测的生物分子混合后,加入与核酸适配体互补的寡核酸链;核酸适配体与待检测的生物分子发生特异性结合,未结合的多...
- 宋厚辉金庆日杨梦华邵春艳程昌勇王晓杜杨杨杨永春卫芳芳桂海娈张亚军方维焕
- 文献传递
- 展示猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的霍乱弧菌菌影构建及制备
- 本发明涉及一种展示猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的霍乱弧菌菌影的制备方法,制备方法包括如下步骤:构建tcpP‑E2融合蛋白表达载体pJSL13;制备霍乱弧菌Δ<I>tcpP</I>缺失株感受态细胞;将pJSL13及温控诱导裂...
- 杨梦华姬生乐韩美晴杜丽宏彭名正徐思艳
- 文献传递
- 兽用疫苗免疫佐剂及其制备与应用方法
- 本发明涉及兽用生物制品领域,旨在提供一种兽用疫苗免疫佐剂及其制备与应用方法。该佐剂是由水溶性碳酸钙、聚山梨酯80、2?苯氧基乙醇、壳寡糖、黄单胞菌多糖和去离子水混合而成;水溶性碳酸钙与去离子水的重量比为0.001%?0....
- 宋厚辉邵春艳程昌勇王晓杜姜胜杨梦华杨杨杨永春章先孙静卫芳芳
- 文献传递
- 抗猪蓝耳病和圆环病毒病二联口服卵黄抗体研制及应用
- 宋厚辉王晓杜邵春艳杨永春杨梦华金庆日方维焕
- 该成果集中研究猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒的二联卵黄抗体高效价抗体制备技术、IgY生物活性保护技术、二联口服卵黄抗体对不同阶段猪被动免疫保护性、卵黄抗体稳定性、卵黄抗体效力以及口服卵黄抗体的应用,并将获得产品在断奶...
- 关键词:
- 关键词:猪圆环病毒繁殖与呼吸综合征病毒
- 展示副溶血弧菌VP1667及VP2369蛋白的副溶血弧菌菌影疫苗制备
- 本发明涉及一种展示副溶血弧菌VP1667及VP2369蛋白的副溶血弧菌菌影疫苗制备,该菌影疫苗最终以冻干粉的形式保存,其制备过程如下:构建裂解质粒pJSL20;构建Ara和IPTG双控诱导外膜蛋白及裂解E蛋白表达质粒pJ...
- 杨梦华姬生乐许光治
- 文献传递
- 犬猫一次性使用宫颈细胞刷
- 本实用新型属于兽用医疗器械,旨在提供一种犬猫一次性使用宫颈细胞刷。本实用新型包括球形导引头、细胞刷头、取样杆和保护套管,所述螺旋排列的细胞刷头的刷毛垂直于取样杆,使细胞刷头整体呈圆柱状;所述细胞刷头一端插入球形导引头内,...
- 邵春艳王甲智杨梦华韩笑杨永春王晓杜宋厚辉
- 文献传递
- 犬猫一次性使用宫颈细胞刷
- 本发明属于兽用医疗器械,旨在提供一种犬猫一次性使用宫颈细胞刷。本发明包括球形导引头、细胞刷头、取样杆和保护套管,所述螺旋排列的细胞刷头的刷毛垂直于取样杆,使细胞刷头整体呈圆柱状;所述细胞刷头一端插入球形导引头内,其另一端...
- 邵春艳王甲智杨梦华韩笑杨永春王晓杜宋厚辉
- 文献传递
- 霍乱弧菌DsbA蛋白通过增强MSHA的表达促进生物被膜的形成
- 2016年
- 【目的】阐明霍乱弧菌DsbA蛋白(VcDsbA)在生物被膜形成过程中的作用。【方法】采用Overlapping PCR的方法构建VcdsbA基因敲除质粒p MH524;采用同源重组和基因克隆的方法对霍乱弧菌dsbA(vc0034)基因进行敲除和回补;通过结晶紫染色实验,比较野生株(WT)、dsbA突变株(ΔdsbA)和回补菌株(CΔdsbA)的生物被膜形成差异;用荧光素酶基因作为报告基因分析与生物被膜形成相关的甘露糖敏感血凝素纤毛合成蛋白(Mannose-sensitive hemagglutinin,pili biogenesis protein,MSHA)在霍乱弧菌WT、ΔdsbA和CΔdsbA中表达水平的区别。【结果】成功构建霍乱弧菌dsbA基因缺失突变株和回补株;与WT相比,ΔdsbA生物被膜形成能力显著下降,且msh操纵子的表达水平显著降低。【结论】VcDsbA可能通过影响其它调控因子直接或间接增强霍乱弧菌MSHA的生物合成,从而促进霍乱弧菌生物被膜的形成。本文为进一步研究DsbA在霍乱弧菌生物被膜形成中的调控机制奠定了基础。
- 薛媛媛吴春琴江秀军甘超宁宋厚辉杨梦华
- 关键词:霍乱弧菌生物被膜
- 一种利用竹笋壳制备青贮饲料的方法及青贮窖
- 本发明涉及青贮方法领域,旨在提供一种利用竹笋壳制备青贮饲料的方法及青贮窖。该种利用竹笋壳制备青贮饲料的方法包括步骤:收集新鲜笋壳并晾干,将笋壳与食盐、尿素、柠檬酸和糖蜜混合搅拌均匀后,填充进青贮窖内密封,直至青贮结束,青...
- 邵春艳杨永春王晓杜程昌勇杨杨卫芳芳金庆日杨梦华宋厚辉
- 文献传递