方文刚
- 作品数：71 被引量：74H指数：5
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 致病性大肠杆菌ibeB基因编码产物具有介导细菌穿过血脑屏障和诱导神经细胞分化双重功能
- 大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)经血行播散入脑致病,但它如何穿过血脑屏障(blood-brain barrier),迄今尚不清楚。我们在以往的研究中曾克隆鉴定了一个新的E.coli侵袭脑微血管内...
- 陈誉华陈澄尚德淑赵伟东陈冬松方文刚
- 文献传递
- 内质网应激条件下血管内皮细胞生长因子在人脑微血管内皮细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 为观察内质网应激条件下血管内皮细胞生长因子的表达情况,用不同浓度的衣霉素处理体外培养的人脑微血管内皮细胞,建立内质网应激模型,采用RT-PCR、蛋白质免疫印迹以及免疫细胞化学的方法检测了细胞内血管内皮细胞生长因子的表达。结果发现血管内皮细胞生长因子在人脑微血管内皮细胞中存在一定的表达;内质网应激可诱导血管内皮细胞生长因子表达升高,随着衣霉素浓度的增高,血管内皮细胞生长因子的表达逐渐增加,与mRNA水平相比,血管内皮细胞生长因子蛋白量的增加更明显。实验结果提示人脑微血管内皮细胞中存在血管内皮细胞生长因子自分泌,血管内皮细胞生长因子可能是内质网应激的靶基因。
- 王大鹏李波方文刚陈誉华宋今丹
- 关键词：血管内皮细胞生长因子人脑微血管内皮细胞血脑屏障
- 大鼠海马内注射β淀粉样蛋白促进神经细胞增殖被引量：4
- 2008年
- 目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记细胞和doublecortin(DCX)阳性细胞。结果海马内注射Aβ_(1- 42)后引起海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)和侧脑室下层(subventricular zone,SVZ)Brdu标记细胞及DCX阳性细胞显著增加(P<0.01)。双免疫荧光分析表明许多Brdu标记细胞表达DCX。结论Aβ沉积可以促进脑内的神经细胞增殖,提示这种现象可能为阿尔茨海默病的一种代偿性应答。促进神经细胞增殖的措施对于治疗阿尔茨海默病具有重要的价值。
- 郭大文马怡然方文刚陈誉华
- 关键词：Β淀粉样蛋白神经细胞增殖阿尔茨海默病
- 毒力岛基因ibeT在大肠杆菌逃逸宿主细胞溶酶体中的作用
- 新生儿细菌性脑膜炎是儿科严重感染性疾病之一,临床上尽管可以选用相应的抗生素治疗,但是病死率仍然得不到显著的改善。大肠杆菌是导致新生儿脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌。我们在先前的研究中,从致新生儿脑膜炎大肠杆菌K1株RS2...
- 张可赵伟东李强方文刚朱莉陈誉华
- 关键词：宿主细胞溶酶体逃逸
- 文献传递
- 糖调节蛋白Grp78在幽门螺杆菌感染者胃黏膜中的表达及意义被引量：1
- 2004年
- 目的 :了解葡萄糖调节蛋白Grp78在幽门螺杆菌 (HP)感染人胃黏膜组织中的表达情况。方法 :应用半定量RT PCR及Westernblotting方法检测人胃黏膜组织中Grp78mRNA及蛋白的表达。 结果 :HP未感染组 2 8例 ,Grp78mRNA表达为 0 .80 3 8± 0 .0 50 0 ,感染组 3 2例 ,Grp78mRNA表达为 1.1586± 0 .0 83 9;未感染组Grp78蛋白表达为 0 .43 4 5± 0 .0 545,感染组Grp78蛋白表达为 0 .62 0 4± 0 .0 412。两组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :正常胃黏膜组织有Grp78mRNA的表达及蛋白的合成。HP感染胃黏膜增加Grp78mRNA的表达及蛋白的合成 。
- 王孟春方文刚陈澄李岩
- 关键词：幽门螺杆菌
- 老年痴呆症中骨髓源性细胞穿过血脑屏障的机制和意义
- 老年痴呆症(AD)是发病率较高的神经退行性疾病。近年来已从AD患者血浆中分离鉴定出20余种具有临床预测和诊断价值的蛋白成分。我们应用基因芯片技术分析了AD患者和同龄对照人群的血液T细胞及单核细胞中的基因表达差异,结合应用...
- 尚德淑曼淑梅李曼刘怿君蔺美娜赵伟东李波方文刚陈誉华
- 关键词：老年痴呆症免疫细胞骨髓干细胞血脑屏障细胞治疗
- P190调控Na+-K+-ATP酶定位于细胞膜的机制研究
- P190为我们前期研究中发现的定位于脑微血管内皮细胞(BMEC)血管腔侧的分子量为190KD的穿膜蛋白。为探讨BMEC表达P190的生理学意义,我们以P190胞内段结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术从小鼠胎脑cDNA文...
- 张淑红刘东鑫赵伟东张虎方文刚秦小雪陈誉华
- P190蛋白在E.coli K1侵袭人脑微血管内皮细胞中的作用
- 大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,E.coli K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。E.coli K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMECs)是其跨越血脑屏障播散入脑的关键步骤。E.co...
- 刘东鑫赵伟东方文刚朱莉陈誉华
- 关键词：大肠杆菌信号转导人脑微血管内皮细胞
- 文献传递
- PI3K和ROCK信号通路在MSC穿过人脑微血管内皮细胞单层中发挥作用
- 骨髓间充质干细胞(MSC)不仅能分化成中胚层来源的细胞,而且还能跨胚层分化为内胚层来源的肝细胞、肺泡上皮细胞和外胚层的神经细胞。MSC代表了一种非常有前景的细胞治疗手段。在糖尿病、肝损伤、心肌梗死等疾病动物模型中,以MS...
- 尚德淑蔺美娜孙伟李波许欣方文刚赵伟东陈誉华
- 关键词：MSCP13K人脑微血管内皮细胞
- 文献传递
- 头孢曲松钠治疗大肠杆菌所致疾病机制的研究
- 2009年
- 目的探讨头孢曲松钠对大肠杆菌(E.coliK1)的作用机制。方法采用对照实验,培养E.coliK1至最佳状态,实验组细菌加入头孢曲松钠100μg,对照组加入生理盐水,孵育1h。通过western-blot方法检测E.coliK1外膜蛋白A的表达变化,软件分析蛋白表达灰度值。结果实验组OmpA与对照组比较,表达量明显下降。结论头孢曲松钠可以诱导E.coliK1的外膜蛋白A表达下降,从而影响E.coliK1外膜的完整性。
- 方文刚兰宇
- 关键词：头孢曲松钠E.COLIK1外膜蛋白A
