房志家
- 作品数：17 被引量：33H指数：4
- 供职机构：中国科学院西北高原生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程医药卫生农业科学更多>>
- 一种简单高效的酵母单菌落PCR方法被引量：7
- 2013年
- 目的:为快速简便地挑选出酿酒酵母重组克隆,探索建立一种经济、直接、高效的酵母单菌落PCR方法。方法:以Leu2MX6基因同源重组或重组质粒转化得到的酵母突变菌为材料,分别采用传统的提取基因组或质粒的方法、煮沸法及化学试剂处理法等制备PCR模板进行重组克隆鉴定,并对6种PCR模板制备方法的效果进行比较与分析;对加热提取法进行优化并进行重组子的提取和验证。结果与结论:直接以1 mm2单克隆菌株95℃处理5 min后的酵母菌落水悬浮液为模板进行单菌落PCR,是一种简单高效的酵母重组克隆鉴定方法。该方法能弥补传统方法的不足,且简便快速、结果稳定,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段。同时,这种单菌落PCR法也可应用于重组毕赤酵母的阳性克隆筛选。
- 陈忠翔房志家陈婷赵敏黄志伟
- 关键词：酵母菌落PCR重组克隆
- 一种检测活体酵母细胞UPR水平的双荧光素酶监测质粒及其构建和应用
- 本发明涉及一种检测活体酵母细胞UPR水平的双荧光素酶监测质粒及其构建和应用，质粒为pUST-08质粒，利用基因克隆技术，依次将Gal10p、Rluc-Hac1p、Hac1i、Fluc克隆到质粒YCplac33中，组成Ga...
- 黄志伟房志家匡鑫杜秀秀刘伟伟肖君华
- 文献传递
- 一种酿酒酵母等位基因高效整合质粒系统及其应用
- 本发明涉及一种酿酒酵母等位基因高效整合质粒系统及其应用，所述系统包括4种酿酒酵母等位基因整合质粒分别为pDH735、pDH818、pDH824和pDH825。所述系统应用于酿酒酵母的等位基因高效整合，整合方法包括：构建4...
- 黄志伟房志家沈裕虎孟晓卿魏红岩
- 文献传递
- 细胞TAG代谢调控及相关降脂化合物黄连素的作用机制研究
- 肥胖问题一直是困扰人们的世界性健康问题,由肥胖引起的高血脂、高血压、糖尿病、脂肪肝等疾病,对人体危害巨大,已成为威胁人类健康的第二大因素。肥胖问题同时还是一个社会经济问题,每年因肥胖问题造成的社会经济损失巨大,远超过吸烟...
- 房志家
- 关键词：三酰甘油黄连素降脂
- 文献传递
- 人脂素基因LIPIN1在酵母中的异源表达及细胞功能分析被引量：1
- 2014年
- 脂类代谢调控是维持生物体能量平衡的重要环节,脂类代谢调控的紊乱与肥胖症、糖尿病和高血压等疾病密切相关。脂素基因LIPIN1是诱导脂肪细胞分化、调控脂类合成的关键基因,其编码的磷脂磷酸酶(phosphatidate phosphatase,PAP)在人体三酰甘油合成中起关键作用,是维持人体脂类平衡的重要保障。此外,该基因还作为重要的转录辅激活因子参与多种生长及营养代谢调控。多种生物中均有类似功能的基因被发现,暗示了其功能的多样性及物种间的保守性。该文利用酿酒酵母在脂类代谢研究中性状易于表征、同源基因PAH1功能明确的优势,通过同源重组技术构建脂素缺陷型酵母,探索脂素基因在维持酵母正常生长及脂类合成中的重要作用,并通过功能互补及生物信息学技术对比分析了人源LIPIN1基因与酵母PAH1基因编码蛋白在结构和功能上的保守性,为脂素基因LIPIN1的细胞功能研究提供基础数据。
- 房志家杜秀秀黄志伟王松史萍
- 关键词：酵母
- 黄连素对鸡球虫的防治效果研究被引量：3
- 2015年
- [目的]探讨黄连素对鸡球虫的防治效果。[方法]将2周龄的雏鸡分为攻虫对照组、空白对照组、加药A组、加药B组,分别给予0、0、300和1 500μg/g体重剂量的黄连素,探讨黄连素的安全性和及其对鸡球虫的治疗效果。[结果]加药A组、加药B组和攻虫对照组雏鸡的相对增重率分别为55.56%、10.71%、26.43%。空白对照组、加药A组、加药B组和攻虫对照组的抗球虫指数依次为200、141.26、59.99、29.29。[结论]黄连素对鸡球虫具有明显的治疗效果,剂量以300μg/g体重为宜。
- 刘伟伟房志家宋洋乔彧朱倩刘红梅黄志伟
- 关键词：球虫病黄连素
- 酿酒酵母转化方法的新探索被引量：7
- 2012年
- 在现有电转化和聚乙二醇/醋酸锂(PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响。结果表明:处于对数生长早期(OD600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳;电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果;联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105cfu/μg,远高于文献报道的水平。同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率。
- 房志家陈婷郝贺龙张兴群黄志伟
- 关键词：酿酒酵母电转化DTT
- 一种TAG代谢障碍型肥胖酵母模型的构建方法
- 本发明涉及一种TAG代谢障碍型肥胖酵母模型的构建方法，包括：以酿酒酵母BY4742α单倍体为出发菌株，针对三酰甘油代谢中起主要作用的水解酶编码基因TGL3、TGL4进行敲除，同时高表达PAH1基因，人为制造TAG代谢障碍...
- 黄志伟房志家陈婷张兴群
- 文献传递
- 四种药用植物提取物抑菌保鲜活性的研究被引量：6
- 2012年
- 应用滤纸片扩散法、微量稀释法等方法研究银杏叶、当归、党参(野生)、藏茵陈4种药用植物水和乙醇提取物抑菌效果以及在食品保鲜方面的应用。结果表明水提取物均无明显的抑菌活性;银杏叶、藏茵陈醇提取物对金黄色葡萄球菌有抑菌活性,对大肠杆菌、酿酒酵母无明显抑菌效果,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为450、160μg/mL。发现随着基质pH的改变,2种提取物的最低抑菌浓度随pH的增加而升高,但变化趋势较常用防腐剂山梨酸钾和苯甲酸弱,在pH5～8的范围,2种提取物的最低抑菌浓度均低于山梨酸钾。在模式食品中将提取物与山梨酸钾、苯甲酸进行联合添加具有协同增效抑菌活性,可降低化学防腐剂的用量,尤其是与苯甲酸联合添加,可在一周内完全抑制金黄色葡萄球菌的生长。
- 陈丽凤陈婷房志家赵敏黄志伟
- 关键词：天然防腐剂抑菌效果最低抑菌浓度山梨酸钾
- 磷脂酸磷酸酶与中性脂肪代谢调控被引量：4
- 2013年
- 中性脂肪主要指三酰甘油(triacylglycerol,TAG),是动植物细胞贮脂的主要形式。TAG约占人体脂类的95%,它的合成与动员是能量平衡调节的主要环节,而这一调节的失衡是诱发肥胖,产生高血压、心脏病及皮下脂肪丢失等疾病的主要原因。油脂代谢受到油脂基因所编码的脂肪相关调节酶的直接调控,中性脂肪代谢过程有高度的真核系统保守性。磷脂酸磷酸酶(phosphatidate phosphatase,PAP)也称脂素,相关基因PAH1(酿酒酵母)、LPIN1、LPIN2、LPIN3(哺乳动物)是研究人员近年确定的一类中性脂肪代谢调控的关键基因。相关的研究为进一步了解脂肪代谢有关疾病提供了一个重要线索,并且可能为研发控制脂肪代谢的新药提供新靶点。就近年PAP的相关研究主要成果进行概述。
- 房志家陈婷赵敏黄志伟
- 关键词：脂肪代谢分子调控
