张艳荣
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EphA2对神经胶质瘤细胞系U251的凋亡﹑增殖﹑迁移和侵袭的研究被引量：5
- 2009年
- 为了研究EphA2对神经胶质瘤细胞系U251在增殖、凋亡、迁移和侵袭方面所起的作用,用RT-PCR方法检测正常脑组织标本与两种恶性胶质瘤细胞系中EphA2 mRNA表达水平,然后用化学合成的针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA)下调该基因的表达,以检测其在U251中的生物学功能.证实了EphA2基因在正常脑组织标本中的表达水平远低于两种恶性胶质瘤细胞系.把体外化学合成针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA-EphA2)转染入U251细胞后,Western blot,实时定量RT-PCR检测到U251细胞中EphA2蛋白及mRNA表达水平都明显降低,并且细胞增殖受到显著抑制,同时出现了明显的细胞凋亡.伤口愈合实验(检测细胞迁移能力),Transwell小室实验(检测细胞侵袭能力)均表明,下调EphA2的表达后,细胞的迁移和侵袭能力较阴性对照组显著减弱.上述结果表明,在神经胶质瘤U251细胞中,EphA2与其恶性增殖及高度侵染性相关,可作为分子治疗的有效靶点.
- 柏燕燕史毅惠国桢张艳荣董万利胡锦金由辛
- 关键词：神经胶质瘤U251细胞小干扰RNAEPHA2
- EPH受体与ephrin配体在肿瘤中的研究进展被引量：3
- 2007年
- Eph受体是已知最大的酪氨酸激酶受体家族,与ephrin配体结合产生双向信号在胚胎成形、神经轴突导向、血管发育中起着关键作用。最近一些基因缺失及体外血管形成实验表明EphB和ephrinB在胚胎血管分化及成人病理性血管形成中发挥重要作用,并且Eph和ephrin基因在各种肿瘤中不同程度的表达与肿瘤的恶性进展有关,如:侵袭力增强,更易于发生转移,血管化程度更明显等,由此而导致患者预后差。本文简要回顾了近来Eph受体家族与其配体在肿瘤发生方面的最新进展。
- 张艳荣董万利胡锦
- 关键词：EPH受体血管发生肿瘤发生
- 靶向EphB4基因的shRNA真核表达载体的构建与鉴定
- 2008年
- 目的构建和鉴定靶向EphB4基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。方法体外合成一对互补并编码靶向EphB4基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经Bbs I酶切线性化的psiRNA人H1启动子质粒载体中,经酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确;采用脂质体转染的方法将构建的重组载体导入人恶性胶质瘤细胞系U251中,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞EphB4mRNA的表达变化。结果经酶切和测序证明,pH1-EphB4-shRNA序列正确;转染pH1-EphB4-shRNA载体后,U251细胞EphB4基因的电泳条带明显减弱,在磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)参比下较空载体组下降60%。结论靶向EphB4基因的shRNA真核表达载体构建成功,转染U251细胞之后获得稳定表达,并可特异性沉默EphB4基因的表达,为进一步研究EphB4基因在恶性胶质瘤的发生发展中的作用提供了实验基础。
- 张艳荣董万利胡锦惠国桢
- 关键词：EPHB4短发夹RNA恶性胶质瘤
- RNA干扰介导EphB4基因表达下调对胶质瘤细胞系U251生长的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨靶向EphB4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对胶质瘤细胞EphB4 mRNA表达及细胞生长的影响。方法:体外化学合成针对人EphB4基因的小干扰RNA并转染恶性胶质瘤U251细胞系后,RT-PCR法检测EphB4 mRNA表达的变化,CCK-8检测法观察RNA干扰对肿瘤细胞增殖活性的影响,FCM检测细胞周期变化,划痕实验观察细胞的迁移能力,采用Transwell小室穿膜细胞的数量来反应细胞的侵袭能力。结果:U251细胞转染siRNA-EphB4 100nmol/L后,EphB4 mRNA的表达水平下降了75.0%,细胞增殖抑制表现为剂量依赖性,FCM检测与阴性对照相比,细胞周期不同程度阻滞于亚G1期;并且细胞的迁移能力与对照组比较有所下降,Transwell小室穿膜细胞与对照组比较明显减少。结论:siRNA-EphB4能够明显靶向并抑制U251细胞中EphB4基因的表达,而EphB4基因表达下调可使U251细胞增殖受到影响,细胞周期出现凋亡峰。转染siRNA-EphB4后U251细胞的迁移和侵袭能力受到不同程度的抑制。提示抑制EphB4基因表达有可能成为胶质瘤治疗的新方法。
- 张艳荣董万利胡锦惠国桢金由辛史毅
- 关键词：EPHB4小分子干扰
