张继栋
- 作品数：13 被引量：52H指数：5
- 供职机构：仲恺农业工程学院园艺园林学院更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目广东省科技厅农业攻关项目更多>>
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- 香石竹木栓化相关基因苯丙氨酸解氨酶的克隆与表达分析
- 香石竹(Dianthus caryophyllus L．)属于石竹科(Caryophyllaceae)石竹属(Dianthus)，又名麝香石竹、康乃馨，为多年生草本植物。由于香石竹花期长、色彩丰富、水养期长，适用于室内插...
- 张继栋
- 关键词：香石竹基因克隆基因表达苯丙氨酸解氨酶
- 文献传递
- 香石竹DcPAL1基因的克隆及其原核表达被引量：4
- 2012年
- 苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物苯丙烷类代谢途径的关键酶。利用RT-PCR及RACE技术从香石竹茎中克隆到苯丙氨酸解氨酶基因的全长cDNA,命名为DcPAL1(GenBank登录号为FJ864719)。DcPAL1全长2 397bp,预测其开放阅读框长2 121bp,编码一个含有706个氨基酸的蛋白质,其分子量为76.8kD,等电点5.84,且含有PAL的特征序列和活性位点。构建pET-DcPAL1原核表达载体,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)中表达,获得1个与预测大小一致的外源蛋白,主要以包涵体形式存在。用Ni2+-NTA螯合琼脂糖层析柱亲和层析得到了纯化的表达蛋白。
- 张继栋曹锦萍乔爱民李红梅孙敏何生根
- 关键词：香石竹苯丙氨酸解氨酶基因克隆原核表达
- 西蓝薹RAPD-PCR反应体系的建立与优化被引量：1
- 2010年
- 以新型蔬菜西蓝薹为研究对象,采用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了Taq酶、引物、DNA模板、Mg2+、dNTPs的浓度或用量,建立了西蓝薹RAPD-PCR的最佳反应体系:25μL反应体系中含0.8 UTaq酶、0.40μmol/L引物、30 ng DNA模板、1.6 mmol/LMg2+、0.25 mmol/L dNTPs、2.5μL 10×PCR buffer.利用优化的反应体系,对5个西蓝薹品种进行体系稳定性检测,结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好.
- 尹彩霞张继栋李向阳刘自珠张华张金艳乔爱民
- 关键词：RAPD
- 不同基因型对木薯胚状体诱导的影响被引量：1
- 2009年
- 以3个有代表性的木薯品种TMS60444、SC124和GR911为材料,研究不同基因型对木薯胚状体诱导的影响。结果表明,不同基因型对木薯胚状体诱导的影响较大,在同样的胚状体诱导培养基MS+CuSO40.5mg/L+2,4-D8.0mg/L上,TMS60444的诱导率高达58.90%,而SC124和GR911的诱导率分别为5.56%和3.33%。
- 尹彩霞乔爱民张鹏张继栋
- 关键词：基因型木薯胚状体
- 人趋化因子MIP-lα的克隆及其基因工程菌的构建
- 2009年
- 通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆并构建了去掉信号肽的人趋化因子巨噬细胞炎性蛋白(Mac-rophage inflammatory protein-1α,MIP-lα)基因的工程菌,并对该基因的结构进行了分析.结果表明,MIP-lα属于4Cys CC趋化因子,具有4个半胱氨酸,含有…CC……C……C……结构,该蛋白的4个保守半胱氨酸形成了两对功能必需的二硫键.
- 王伟权曹锦萍张继栋刘季平吕培涛
- 关键词：趋化因子艾滋病病毒
- 非洲菊f3h基因的克隆及反义表达载体的构建被引量：4
- 2010年
- 黄烷酮3-羟化酶(F3H)是植物花青素合成代谢中早期重要关键酶之一,对花色起着重要的调控作用.根据其它物种的f3h基因设计简并引物,通过RT-PCR技术,从非洲菊中克隆到500bp的片段,经BlastN比对,证实该片段为非洲菊f3h基因保守片段.将其反向插入到高效表达载体pCAMBIA1304+CaMV35S启动子下游,通过PCR鉴定和双酶切鉴定表明成功构建高效反义表达载体pCAMBIA1304+-antif3h,并转化到根癌农杆菌LBA4404形成工程菌株,作为今后研究非洲菊花色调控机制以及培育新品种的有力工具.
- 彭江李鹏宋锋饶灿李想韵张继栋孙敏
- 关键词：非洲菊基因克隆反义表达载体
- 西兰薹与芥兰遗传多样性的RAPD分析
- 2012年
- 利用RAPD分子标记技术对10个西兰薹与芥兰品种进行遗传多样性分析。结果表明,RAPD技术是准确评估西兰薹与芥兰遗传多样性的有效方法。100条随机引物中筛选出18条多态性引物,共检测出73条条带,其中多态性条带39条,多态率为53.4%。供试材料间遗传相似系数(GS)变幅在0.3611～0.9000之间,平均相似系数为0.6306,表明西兰薹与芥兰遗传变异较丰富。聚类分析结果表明,在相似系数0.53水平上可将10个品种分为3大类群。
- 尹彩霞张继栋李向阳刘自珠张华乔爱民
- 关键词：芥兰
- 西兰薹与芥兰遗传多样性的RAPD分析
- 西兰薹是从国外新引进的芥兰与青花菜杂交而成的新型蔬菜。西兰薹和芥兰材料(含组合)共10份,均由广州市农业科学研究院提供。种子先用40℃温水浸泡20 min,然后点播在垫有两层湿润滤纸的培养皿中,放入28℃培养箱中暗培养至...
- 尹彩霞张继栋李向阳刘自珠张华张金艳乔爱民
- 关键词：芥兰RAPD
- 文献传递
- 空间诱变处理后菜心变异株系的RAPD分析被引量：6
- 2010年
- 为了从分子水平上研究空间诱变处理后菜心变异株系的遗传变异,对太空诱变处理后的2个菜心品种的种子返回地面进行种植,并对定向选育5～6代后的6个变异株系及原种进行RAPD检测分析。结果表明:从100条随机引物中筛选出16条能扩增出特异性条带的引物。油绿50天的3个变异株系与原种相比均有一定的遗传变异,其中以株系50-2的变异最大,3个变异株系之间有一定差异;油绿80天的3个变异株系与原种相比也有一定的遗传变异,其中以株系80-2的变异最大,3个变异株系之间也有一定差异。此外,航天诱变处理后的油绿80天菜心品种内在分子水平上的变异大于油绿50天。突变后代在DNA水平上与对照存在差异,说明突变体基因发生了点突变或染色体互换、缺失,空间诱变为菜心优良品种的选育提供了新的途径。
- 张金艳张继栋黄红弟张华尹彩霞乔爱民郑岩松
- 关键词：空间诱变菜心RAPD分析
- 木本曼陀罗毛状根植株再生体系的建立被引量：19
- 2008年
- 建立了木本曼陀罗(Datura arborea L.)毛状根的植株再生体系并对再生植株进行了初步检测。采用"一步法"诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA2.0mgL-1+NAA0.2mgL-1;采用"两步法"诱导不定芽时,先在MS+6-BA4.0mgL-1+KT0.5mgL-1+2,4-D0.5mgL-1上诱导愈伤组织,然后在MS+6-BA4.0mgL-1+NAA0.2mgL-1上诱导愈伤组织分化不定芽。诱导不定芽的最适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1mgL-1。用PCR技术从再生植株叶片中得到了rolB、rolC目的基因片段。HPLC检测结果表明毛状根再生植株中莨菪烷类生物碱(Tropane alkaloids,TA)的含量较野生植株有明显的提高。
- 张继栋杨雪清乔爱民孙敏何生根雷桅尹彩霞
- 关键词：木本曼陀罗毛状根莨菪碱
