张文智
- 作品数:6 被引量:11H指数:1
- 供职机构:石河子大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 靶向FMDV受体整联蛋白β6亚基的SIRNA抑制病毒复制的研究学位申请人张文智
- 目的:整联蛋白是一种介导病毒侵入宿主细胞内的细胞受体,在病毒粘附过程中发挥重要作用。本研究利用RNA干扰技术,对口蹄疫病毒(FOOT-AND-MOUTHDISEASEVEIRUS,FMDV)受体整联蛋白β6亚基的胞浆域进...
- 张文智
- 关键词:FMDVRNAIG418BHK细胞
- 文献传递网络资源链接
- 靶向FMDV受体整联蛋白β6亚基的siRNA抑制病毒的复制
- 胡娜娜张文智王丽娜王远志陈创夫
- 靶向FMDV受体整联蛋白β6亚基的siRNA抑制病毒的复制
- <正>研究目的口蹄疫病(foot-and-month disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-month disease virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,易感动物主要以牛、...
- 胡娜娜张文智王丽娜王远志陈创夫
- 关键词:口蹄疫病毒整联蛋白SIRNA
- 文献传递
- 三种转染试剂对PEF细胞与BHK细胞转染效率的比较被引量:10
- 2013年
- 【目的】比较三种转染试剂对原代细胞和传代细胞的转染效率,选择合适的转染试剂。【方法】以EGFP为报告基因,分别用脂质体、磷酸钙、罗氏试剂转染PEF细胞和BHK细胞。通过改变转染试剂和质粒DNA的剂量,利用流式细胞仪分析转染效率,从而确定最佳的转染试剂。【结果】对于PEF细胞,脂质体和磷酸钙转染效果不理想,细胞死亡率高,绿色荧光表达量少。罗氏转染试剂相对较好,细胞死亡率低,并且保持原有细胞形态。对于传代细胞BHK细胞而言,各转染试剂均可达到理想转染效果。【结论】不同的细胞对转染试剂的选择也不同,传代细胞BHK用脂质体即可达到理想的效果。利用罗氏试剂可以提高转染效率,但不明显。而对于原代细胞PEF,脂质体与磷酸钙试剂的转染效率很低。相比较而言,罗氏转染试剂效果更好些,细胞毒性小,转染率在10%~12%。
- 张文智李亚王鹏雁陈创夫
- 关键词:转染
- 靶向FMDV受体整联蛋白β6亚基的siRNA抑制病毒复制的研究
- 目的:整联蛋白是一种介导病毒侵入宿主细胞内的细胞受体,在病毒粘附过程中发挥重要作用。本研究利用RNA干扰技术,对口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseaseveirus,FMDV)受体整联蛋白β6亚基的胞浆域进...
- 张文智
- 关键词:FMDVRNAIG418BHK细胞
- 文献传递
- 绵羊MSTN多克隆抗体的制备及细胞毒性分析被引量:1
- 2013年
- 目的:研究绵羊肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)多克隆抗体的安全性。方法:将绵羊MSTN成熟肽基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至BL21(DE3)中;利用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,West-ern blotting鉴定其免疫原性;ELISA检测抗体效价;通过检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的水平研究其细胞毒性。结果:成功获得了330 bp的绵羊MSTN成熟肽基因,表达蛋白分子量约为33 kDa,纯度达90%以上;Western blot检测表明MSTN蛋白具有免疫原活性;ELISA检测证实制备的抗体可与抗原蛋白特异性结合,抗体效价为l:25 600,细胞毒性试验表明高浓度的多克隆抗体(200μg/mL)对肌肉细胞无毒害作用。结论:制备的绵羊MSTN多克隆抗体具有生物学活性,对肌肉细胞无细胞毒性,为促生长效果验证提供了安全保障。
- 郭吉星张辉胡圣伟李天森张文智贺志瑞张豫孙志华陈创夫
- 关键词:肌肉生长抑制素原核表达多克隆抗体细胞毒性