张换敬
- 作品数:7 被引量:9H指数:2
- 供职机构:厦门大学更多>>
- 发文基金:福建省科技计划项目福建省科技厅计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 熔解曲线分析技术用于基因型的研究
- 熔解曲线分析法(Melting curve analysis)是一种PCR后产物分析技术,具有操作简单、结果判断直观等特点,已经被广泛用于突变扫描、甲基化检测等研究。熔解曲线分析技术可分为探针熔解曲线(Probe mel...
- 张换敬
- 关键词:熔解曲线基因分型人乳头瘤病毒
- 新型环状引物荧光定量PCR检测乳腺癌组织HER2基因mRNA表达方法的建立
- 2012年
- 目的研究建立一种基于实时荧光定量PCR技术和新型环状引物的简捷、准确、廉价、易于标准化检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(HER2)基因mRNA表达水平的方法,为临床上肿瘤个性化分子靶向药物治疗提供用药指导。方法设计HER2和内参基因的新型特异性环状引物,通过Excel在乳腺癌组织标本中随机抽取5份标本检测候选内参基因的表达,同时用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件筛选和评估乳腺癌组织中稳定表达的内参基因,设置Mg“浓度和引物浓度梯度对PCR体系进行优化,建立乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的新型环状引物EvaGreen染料实时荧光定量逆转录(FQRT)一PCR检测方法(以下简称“自建FQRT。PCR”法),并对其灵敏度、特异性、稳定性进行评价;同时用自建FQRT—PCR法与免疫组织化学(IHC)法平行检测2008至2012年厦门大学附属中山医院普外科收集的55份乳腺癌组织和其中32份同一患者匹配的正常组织(距癌组织1〉5cm)中HER2基因的表达水平,并评价自建FQRT—PCR法对乳腺癌的诊断效能。结果自建FQRT—PCR法对HER2基因和核糖体蛋白L37a(RPL37A)基因的最低检测限均为10^6拷贝/μl,线性范围均为10。~10。拷贝/pJ(r=0.997);HER2和RPL37A基因的高、低浓度标准品(10^6拷贝/μl和10^1拷贝/μl)批内变异系数(CV)分别为(5.93±0.57)%和(5.11±0.59)%、(2.49±0.81)%和(2.984-0.97)%;批间CV为(5.76±0.58)%和(7.71±0.61)%、(3.75±0.76)%和(4.40±0.96)%。FQRT—PCR法与IHC法平行检测87份乳腺癌组织标本HER2基因表达水平,FQRT—PCR法的敏感度为96.36%(53/55),特异度为78.13%(25/32),阳性预测值为88.33%(53/60),阴性预测值为92.59%(25/27),与IHC检测结果总符合率为89.66%(78/87)。且与IHC法具有较高的�
- 李怡刘国彦张换敬郑立谋曾骥孟
- 关键词:基因ERBB-2聚合酶链反应
- 检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒
- 检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒,涉及一种PCR试剂盒。所述检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒包括HER2基因PCR反应液、ACTB基因PCR反应液、Taq酶系、对照品和包装物;采用的引...
- 曾骥孟郑立谋李怡张换敬
- 文献传递
- 检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒
- 检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒,涉及一种PCR试剂盒。所述检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒包括HER2基因PCR反应液、ACTB基因PCR反应液、Taq酶系、对照品和包装物;采用的引...
- 曾骥孟郑立谋李怡张换敬
- 文献传递
- 25-羟基维生素D_3人工完全抗原的合成与鉴定被引量:3
- 2011年
- 目的:合成25-羟基维生素D3人工完全抗原,并制备抗25-羟基维生素D3的特异性抗体。方法:将25-羟基维生素D3进行化学修饰加入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯。采用碳二亚胺法,将25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工完全抗原25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-BSA和25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-OVA。通过紫外吸收光谱,SDS-PAGE和MALDI-TOF进行偶联鉴定。用25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-BSA免疫小鼠,获得抗25-羟基维生素D3抗体免疫血清。结果:25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯与BSA的偶联比为(12±0.16)∶1,免疫小鼠后获得高效价(效价为6.25×10-4)的抗体,且标准品浓度在37.5~600 ng/mL范围具有显著的竞争性线性关系,检测的灵敏度为37.5 ng/mL。结论:成功合成了25-羟基维生素D3人工完全抗原,制备出25-羟基维生素D3的抗体且其线性关系显著,灵敏度较高,为进一步研制检测25-羟基维生素D3的试剂盒奠定了基础。
- 万巍巍张换敬叶辉铭万丽琴蔡良良郑立谋曾骥孟
- 生物样本信息资源库的国内外研究进展被引量:5
- 2012年
- 标准化的生物样本信息资源库是基因组、功能基因组等生命科学研究的关键源头,是将科研成果快速转化为医疗产品,应用到临床的重要保证,也是生物医药研发自主创新体系中至关重要的环节。英国、加拿大、挪威、瑞典、冰岛等国家早已建立了自己的生物样本信息资源库。
- 李怡张换敬刘国彦叶辉铭林青曾骥孟
- 关键词:信息资源库生物样本功能基因组医药研发
- 新型靶向治疗人表皮生长因子受体2过表达乳腺癌被引量:1
- 2013年
- 乳腺癌(breast cancer)是一种多基因参与、多步骤发生的高度异质性肿瘤,其病理和组织学分类相同的患者对同一治疗的疗效反应存在很大的差别。随着分子生物学的发展,乳腺癌诊断从传统的病理学和组织学分类,走向了以分子标志物为基础的预测方案。乳腺癌的分子特征更精确预测疾病复发风险,指导治疗用药选择。
- 张换敬李怡刘国彦曾骥孟
- 关键词:人表皮生长因子受体2靶向治疗乳腺癌过表达组织学分类分子标志物