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吴莲英: 作品数：20 被引量：43H指数：4; 供职机构：南开大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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肌球蛋白轻链激酶基因调控在肿瘤细胞转移中的作用: 叶丽虹张晓东王洪辉吴莲英刘新元尤嘉琮王长晔郭威蔡娜吴晶辉; 该研究在建立严重联合免疫缺陷鼠（SCID）的肿瘤转移动物模型后，筛选、获得并鉴定了一株乳腺癌高转移细胞系，命名为LM-MCF-7，与其亲本的MCF-7细胞形成了“转移-高转移”的配对关系。然后，以LM-MCF-7细胞系和...; 关键词：; 关键词：肿瘤转移肌球蛋白轻链激酶反义核酸

肌球蛋白轻链激酶在肿瘤转移中的作用及其分子机理研究: 叶丽虹张晓东吴莲英尤嘉琮秦宵然; 近年来发现肌球蛋白轻链激酶(MLCK)与肿瘤的转移和浸润有密切的关系，但其相关的分子机制及信号转导途径尚不清楚。在前期研究获得了高转移乳腺癌细胞株LM-MCF-7和相应动物模型基础上，该项目检测了MCF-7和LM-MCF...; 关键词：; 关键词：MLCK 肿瘤转移信号途径

ML-7对高转移乳腺癌LM-MCF-7细胞系的作用及其信号途径的研究: 目的:乳腺癌是女性最普遍的恶性肿瘤,乳腺癌转移是造成患者死亡的主要原因,迄今为止乳腺癌转移的发病机理尚不清楚。我们前期建立了具有高转移倾向的乳腺癌 LM—MCF-7细胞系。本文应用MLCK的特异性抑制剂 ML-7作用LM...; 叶丽虹刘毅吴莲英张晓东; 关键词：MLCK 乳腺癌信号传导途径; 文献传递

乙型肝炎病毒X抗原、X抗体检测的临床意义被引量：3: 2007年; 目的了解乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)、X抗体(HBxAb)在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中的表达情况,探讨HBxAg和HBxAb与上述疾病的相关性和临床意义。方法应用大肠埃希菌合成重组HBxAg,用该抗原免疫动物获得的HBxAb分别包被反应板以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者(171例乙型肝炎、70例肝硬化和38例肝癌)血清中HBxAg和HBxAb。结果在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中HBxAg和HBxAb阳性率分别为8.8%、18.6%、7.9%和10.5%、47.1%、34.2%,HBxAg在肝硬化患者中检出率较高(P<0.025);与乙型肝炎组比较,HBxAb阳性率在肝硬化和肝癌患者均有显著增高(P<0.005)。结论HBxAg在肝硬化患者检出率较高,而HBxAb则在乙型肝炎后的肝硬化和肝癌患者检出率较高,提示HBxAg和HBxAb可能参与肝组织的免疫病理性损伤过程。; 邵新华刘树业邵媛媛武珊珊吴莲英张行; 关键词：乙型肝炎病毒 X抗原乙型肝炎肝硬化肝癌

乙型肝炎病毒新标志物HBxAg/抗-HBx检测临床意义的探讨: 目的乙型肝炎病毒(HBV)是原发性肝癌(HCC)发生的重要原因,而 HBV 基因组最小开放阅读框架编码的 X 基因,被认为在 HBV 致癌过程中具有重要的生物学意义,X 基因编码含有154个氨基酸残基的 X 蛋白 (HB...; 邵新华刘树业武珊珊吴莲英张行; 关键词：HBXAG 乙型肝炎病毒 HBX 标志物; 文献传递

不同转移能力乳腺癌细胞株的差异表达蛋白研究被引量：3: 2006年; 背景与目的:肿瘤转移相关蛋白在肿瘤细胞转移过程中具有重要作用,本研究在建立高转移潜能乳腺癌细胞株LM-MCF-7的基础上,筛选乳腺癌细胞转移相关蛋白并探讨其功能。方法:应用蛋白质组学和免疫印迹等方法比较和筛选来源相同但具有不同转移能力的乳腺癌细胞株(MCF-7/LM-MCF-7)的蛋白质表达差异。将克隆有存活蛋白(survivin)的真核表达载体pcDNA3-Sur转染至MCF-7细胞,通过“伤口愈合”实验检测存活蛋白对乳腺癌细胞迁移的影响。结果:应用蛋白质组学技术获得8个有意义的蛋白质,分别有参与细胞骨架构成、物质代谢、细胞凋亡、蛋白折叠和蛋白质相互作用等功能。应用免疫印迹方法发现,在MCF-7细胞中nm23、p27表达水平较高,在LM-MCF-7中存活蛋白、肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)和Bcl-2表达水平较高。“伤口愈合”实验显示,存活蛋白过表达可明显增强MCF-7细胞的迁移能力。结论:不同转移能力的乳腺癌细胞株中存在与乳腺癌转移相关的蛋白质,存活蛋白与乳腺癌转移有密切的关系。; 叶丽虹尤嘉琮郭威徐少峰吴莲英齐众张晓东; 关键词：肿瘤转移蛋白质组学存活蛋白

花生四烯酸诱导肌球蛋白磷酸化被抑制的平滑肌细胞迁移的信号传导途径: 2006年; 在应用肌球蛋白轻链激酶特异抑制剂ML-7抑制了肌球蛋白轻链磷酸化后,花生四烯酸(arachidonicacid,AA)仍可诱导兔血管平滑肌细胞(SM3)发生迁移.为了进一步阐明其信号传导途径,应用多种信号抑制剂,采用免疫印迹、Boyden小室和提取细胞膜蛋白等实验方法,对上述迁移作用的信号传导途径进行了深入的研究.结果显示,PTX(Gi蛋白抑制剂)、U73122(PLC抑制剂)、staurosporine(PKC抑制剂)、PD98059(ERK1/2抑制剂)和SB203580(p38抑制剂)分别可拮抗上述AA诱导的SM3细胞迁移作用,而SP600125(JNK抑制剂)的作用较弱.免疫印迹结果显示,AA可提高SM3细胞中PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK信号的磷酸化水平,呈时间依赖性,PTX或U73122可抑制上述作用;staurosporine可抑制由AA引起的ERK1/2和JNK的磷酸化水平增强,但对p38的磷酸化水平无影响.还发现AA可促进PLCβ2的细胞膜移位,PTX可抑制其作用.上述结果表明,当肌球蛋白轻链的磷酸化被抑制后,AA可通过Gi蛋白的活化促进PLCβ2向细胞膜移位,进而通过激活PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK等信号转导途径而诱导SM3细胞发生迁移.; 吴晶辉叶婷婷王洪辉周晓雷米达吴莲英王长晔郭威张伟英张晓东叶丽虹; 关键词：花生四烯酸平滑肌细胞细胞迁移信号传导途径

乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)增强肝癌细胞NF-κB转录活性的实验研究被引量：11: 2007年; 前期研究结果表明,乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)具有促进细胞增殖的作用.为了进一步阐明其分子机制,观察了HBXIP对核因子κB(NF-κB)转录活性的影响.实验中通过基因共转染将NF-κB报告基因质粒pNF-κB-Luc和HBXIP真核表达载体pcDNA3-hbxip导入人肝癌H7402细胞系中,进行荧光素酶活性分析.结果显示:H7402细胞过表达HBXIP后NF-κB的转录活性明显增强;此外,基因转染后经免疫印迹检测显示,与NF-κB二聚体结合的抑制亚基IκBα的磷酸化水平明显增加;同时,提取H7402细胞的核蛋白,然后应用免疫印迹检测细胞核中p65/NF-κB的水平.结果显示,H7402细胞中HBXIP过表达后细胞核中p65/NF-κB的水平明显增加.当应用RNA干扰技术抑制了细胞内源性的HBXIP基因表达后,则出现与上述结果相反的效果.上述结果提示,HBXIP可增加核内p65/NF-κB蛋白水平,进而发挥NF-κB促转录调控的作用.因此,HBXIP可通过调控NF-κB信号途径而促进细胞增殖.; 王凤泽沙丽乔玲吴莲英张晓东叶丽虹; 关键词：IΚBΑ 肝癌细胞

肝癌转移相关基因的分离及其基因疫苗的研究: 叶丽虹张晓东吴莲英秦宵然刘新元王洪辉尤嘉琮吴晶辉王长晔徐少峰; 采用SCID（Severe Combined Immunodeficiency，SCID）小鼠，建立了人肝癌SCID小鼠转移模型，从转移的肺组织中经原代培养获得了新的人肝癌高转移倾向的细胞系（M-H7402），并进行了生...; 关键词：; 关键词：肝癌转移相关基因基因疫苗

乳腺癌MCF-7细胞系转移亚克隆的筛选及其生物学特性研究被引量：13: 2006年; 目的将乳腺癌MCF-7细胞接种SCID鼠，筛选具有高转移潜能的转移亚克隆，阐明其生物学特性。方法接种培养的乳腺癌MCF-7细胞，取接种的SCID鼠肺组织做原代细胞培养，将获得的细胞命名为LM-MCF-7对该细胞进行生物学鉴定，研究其形态学、生长、细胞周期、染色体和乳腺癌特异性标志物等特征，与其亲本MCF-7细胞进行比较，检测二者肿瘤转移相关蛋白表达的差异。将LM-MCF-7细胞回接SCID鼠，观察其成瘤和转移的能力。结果在接种MCF-7细胞第68天时处死SCID鼠，经肺组织原代细胞培养，成功获得了MCF-7细胞的转移亚克隆LM-MCF-7。在形态学上LM-MCF-7细胞为典型的上皮样多角形；应用流式细胞仪检测分析显示，G0／G1期细胞为53．40％，s期细胞为17．10％，G2＋M期细胞为23．20％；细胞群体平均倍增时间为20h±14h；染色体分析显示为人源性异倍体，其数量为16～123条；免疫细胞化学检测显示，乳腺癌特异性标志物CA15-3在LM-MCF-7细胞中呈阳性反应；Western印迹检测结果显示，与MCF-7细胞相比，LM-MCF-7细胞中肿瘤转移抑制基因nm23和细胞周期相关蛋白p27的表达水平明显下调，而与细胞运动有关的肌球蛋白轻链激酶（MLCK）及抗细胞凋亡蛋白bcl．2和survivin的表达水平明显上调。将该细胞株接种SCID小鼠，与亲本MCF-7细胞相比，成瘤时间由7．4d±1．3d缩短至5．0d±0．0d，在肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器有广泛转移。结论 LM-MCF-7细胞株是乳腺癌MCFG细胞的转移亚克隆，具有高转移潜能。; 叶丽虹吴莲英郭威马宏涛张晓东; 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移细胞系

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