吴淑华
- 作品数：44 被引量：105H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 基因工程β型干扰素的分离纯化被引量：1
- 1996年
- 人β型干扰素工程菌经发酵培养、裂解后，用硫酸铵分级分离及有机溶剂抽提－酸沉淀两种方法对粗制品进行部分纯化，然后用疏水层析、凝胶过滤和旋转等电聚焦电泳对部分纯化品再纯化，结果显示：部分纯化的基因工程人β型干扰素经疏水层析、凝胶过滤后，有较高的回收率（胶者为９３．３６％，后者为８０．６％）；经旋转等电聚焦电泳，一步纯化３１．７５倍，回收率为５６．２５％，比活性达１．０２×１０＾７Ｕ／ｍｇ蛋白。
- 白东亭许丽锋郑秋君陈滨蒋盘宏赵睿刘国诠吴淑华
- 关键词：基因工程疏水层析
- 基因工程人β干扰素的旋转等电聚焦电泳分离
- 1994年
- 采用旋转等电聚焦电泳对基因工程人β型干扰素（ｒｈＩＦＮ－β）部分纯化品进行分离，经４小时聚焦后，活性回收达５６．２５％，纯化倍数为３１．７５。与其它分离方法相比，具有快速、简便的特点。
- 白东亭刘国诠赵睿蒋盘宏吴淑华
- 关键词：基因工程电泳分离
- 采用大肠杆菌增强子样序列构建高效表达载体及其用途
- 采用大肠杆菌增强子检测载体，从大肠杆菌染色体DNA中克隆了一个具有增强子样功能的894bp片段(称M片段)，同时又证明PL启动子上游调控区约300bp的片段(称X片段)以及SV40HindIIIB片段，痘苗病毒HindI...
- 吴淑华侯云德
- 文献传递
- 中和性流行性感冒病毒基因工程抗体在昆虫细胞中的全基因表达、纯化及鉴定被引量：3
- 2001年
- 将中和性流行性感冒 (流感 )病毒基因工程抗体IV 2、IV 6的轻链和重链Fd段基因 ,分别克隆入全抗体表达载体 pAC L Fc ,构建成杆状病毒表达载体pAC L Fc Ⅳ 2和 pAC L Fc Ⅳ 6 ,转染昆虫Sf9细胞 ,利用杆状病毒 /昆虫细胞系统实现抗体的分泌型表达 ,表达产物进行亲和层析分离纯化。SDS PAGE电泳和Westernblot法证实有完整免疫球蛋白的表达 ,免疫印迹法证实它们能与流感病毒血凝素蛋白特异性结合。经间接竞争性抑制ELISA法测定 ,抗体与流感病毒抗原结合的解离常数KD 值分别为 2 5× 10 -9M和 3 0× 10 -9M。流感病毒基因工程全抗体经在昆虫细胞中的表达、纯化和抗体特性鉴定 ,获得了两株纯化的全抗体 ,可用于以后的动物模型呼吸道粘膜被动免疫抗感染的研究。
- 杨贵宾吴淑华梁米芳赵小东王艳侯云德
- 关键词：昆虫细胞基因工程抗体分泌性表达纯化
- 大肠杆菌原核增强子样M片段的进一步研究被引量：1
- 1996年
- 阐明基因转录调控机理一直是分子生物学的研究热点。增强子是广泛存在于真核、病毒及原核生物中的重要的调控元件之一,它通过与各种调控蛋白因子相互作用而发挥其转录增强调节功能。 原核转录增强子的发现是近几年的事,有关研究报道远少于真核和病毒增强子。1989年,潘卫。
- 宫庆红苏志国吴淑华侯云德
- 关键词：基因转录M片段大肠杆菌
- 应用痘苗病毒载体在动物细胞中高效表达人α-瘤坏死因子cDNA及其特性的研究被引量：3
- 1993年
- 构建了含不同长度的人α-肿瘤坏死因子(hTNF-a)cDNA的两种重组痘苗病毒。hTNF-α cDNA插入痘苗病毒(天坛株)的tk区,在11k启动子的控制下,表达量可达1.6×10~7U/L,如果缩短hTNF-α cDNA起始密码子ATG与启动子之间距离并去除3′端非编码区,可使hTNF-α的表达量提高3倍。表达产物的细胞毒活性可被抗hTNF-α单克隆抗体所中和,免疫沉淀产物的SDS-PAGE有一特异性17kD的蛋白条带;同时,在细胞毒活性相同的前提下,哺乳动物细胞表达的hTNF-α的抗病毒活性高于大肠杆菌表达的hTNF-α。
- 万晓余吴淑华黄利文张求旺张丽兰侯云德
- 关键词：痘苗病毒肿瘤坏死因子
- 采用大肠杆菌增强子样序列构建高效表达载体及其用途
- 采用大肠杆菌增强子检测载体，从大肠杆菌染色体DNA中克隆了一个具有增强子样功能的894bp片段(称M片段)，同时又证明PL启动子上游调控区约300bp的片段(称X片段)以及SV40HindIIIB片段，痘苗病毒HindI...
- 吴淑华侯云德
- 文献传递
- 中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达被引量：9
- 1996年
- 利用PCR技术,以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组,克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸,不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即pSV2-dhfr/F1,pSV2/N2,pSV2-dhfr/F3,pSV2-dhfr/P4,pSV2-dhfr/G1和pSV2-dhfr/G3。将它们分别转染导入COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。
- 韩峰吴淑华薛水星黄利文马学军
- 关键词：促红细胞生成素CDNA基因工程
- 关于肿瘤坏死因子及γ干扰素体外协同抑制鼻窦癌裸鼠移植瘤的初步研究被引量：1
- 1992年
- 用肿瘤细胞集落测定法分析了基因工程肿瘤坏死因子(TNF)和γ干扰素(IFN-γ)对两株人鼻窦癌裸鼠移植瘤的抑制作用。TNF的抑癌效应呈剂量依赖性,肿瘤间的敏感性不同。TNF和IFN-γ具有协同抑癌效应。本实验为晚期头颈癌生物治疗进行了有益探索。
- 李五一张宝泉徐春晓王直中蔡有余吴淑华
- 关键词：肿瘤坏死因子干扰素鼻窦肿瘤裸鼠
- 大肠杆菌M增强子样序列结构和功能的研究被引量：11
- 1997年
- 构建了以β-半乳精苷酶基因为报告基因,适用于原核增强序列研究的pAC载体.应用该载体进行的转录增强实验证明,一段已克隆的具有增强基因表达功能的大肠杆菌染色体M序列,对被调控基因的增强作用是发生在转录水平,其能使β-半乳糖苦酶基因特异性的mRNA转录增加6.5倍,与应用该载体测得的表达增强活性一致.通过构建一系列正、反向M序列缺失突变体并对其进行的研究表明,在靠近M序列5’端的340bp区域内存在3个相互作用、与增强活性密切相关的部位,分别位于M序列3’端上游770,610和470bp处.应用PCR技术对大肠杆菌染色体对应于M序列5’端上游207bp进行了克隆,研究显示M序列具有功能上的完整性.
- 谢明吴淑华栾向红徐云鹤万晓余潘卫侯云德
- 关键词：大肠杆菌染色体
