吴强乐
- 作品数：3 被引量：20H指数：1
- 供职机构：杭州师范大学临床医学院附属医院更多>>
- 发文基金：浙江省医学会临床科研基金江苏省自然科学基金江苏省放射医学与防护重点实验室开放课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Egr-1启动子调控hNIS基因的重组质粒构建及转染细胞株的建立被引量：1
- 2012年
- 目的构建早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子调控人钠碘转运体(hNIS)基因的重组质粒并稳定转染人宫颈癌细胞株Hela,评价Egr-1启动子对hNIS蛋白功能的辐射诱导作用。方法以Egr-1/pMR18T为模板PCR扩增Egr-1启动子序列,亚克隆至真核表达载体FL*-hNIS/pcDNA3,构成重组质粒Egr-1-hNIS/pcDNA3,酶切电泳鉴定,通过FuGENE HD转染入Hela细胞,G418筛选抗性克隆,获取单克隆Hela-Egr-1-hNIS。分别采用流式细胞仪、RT-PCR检测Hela-Egr-1-hNIS细胞系中NIS基因和NIS蛋白的表达。动态摄取碘-125实验观察Hela-Egr-1-hNIS细胞和前期研究所得细胞株Hela-NIS(+)给予不同剂量的X线辐照前后的摄碘功能。未转染的Hela细胞作为阴性对照组。结果成功构建重组质粒Egr-1-hNIS/pcDNA3,转染Hela细胞后获得了稳定表达细胞系Hela-Egr-1-hNIS,流式细胞仪测得NIS表达效率为11.2%;RT-PCR检测到Hela-Egr-1-hNIS有NIS mRNA的转录,而对照组无NIS蛋白表达。动态摄碘实验提示Hela-Egr-1-hNIS细胞摄碘能力比阴性对照Hela细胞提高了13倍;辐照后摄碘能力增强,在0～6 Gy范围内与辐射剂量成正相关(r=0.960,P<0.05);而Hela-NIS(+)组辐照后摄碘功能下降,与辐射剂量无相关性(r=-0.770,P>0.05)。结论成功构建Egr-1启动子调控的稳定表达hNIS蛋白的Hela-Egr-1-hNIS细胞系,该细胞系具有较强的摄碘功能及辐射诱导作用,有望在体内治疗中获得更好的治疗效果。
- 吴强乐许袁琦黄宏石怡珍刘增礼
- 关键词：早期生长反应基因-1钠碘转运体宫颈肿瘤放射性核素
- 磁共振DWI联合ADC对子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的诊断价值被引量：19
- 2019年
- 目的探讨磁共振弥散加权成像(DWI)联合表观弥散系数(ADC)对子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的诊断价值。方法回顾性分析2017年12月至2018年12月该院收治的27例子宫肉瘤患者,62例变性子宫肌瘤患者的临床资料,所有患者均行磁共振DWI检查并获取ADC,比较子宫肉瘤与变性子宫肌瘤磁共振DWI影像特点及肿瘤内部、正常肌层的ADC,比较磁共振DWI、ADC及磁共振DWI联合ADC鉴别诊断子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的诊断效能。结果子宫肉瘤与变性子宫肌瘤磁共振DWI影像中边缘规整度、信号强度、内膜受累情况比较均差异有统计学意义(P<0.05);子宫肉瘤患者正常肌层ADC与变性子宫肌瘤患者比较差异无统计学意义(P>0.05);子宫肉瘤患者肿瘤内部ADC较变性子宫肌瘤患者显著降低(P<0.05);子宫肉瘤与变性子宫肌瘤内部ADC较正常肌层均显著降低(P<0.05);ADC鉴别诊断子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的诊断效能显著优于磁共振DWI(P<0.05);磁共振DWI联合ADC鉴别诊断子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的诊断效能明显优于单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论磁共振DWI联合ADC是鉴别诊断子宫肉瘤和变性子宫肌瘤的有效方法,能提高诊断准确性,可在临床广泛推广应用。
- 吴强乐林俊唐栋
- 关键词：磁共振弥散加权成像表观弥散系数子宫肉瘤
- 慢病毒介导的HER2-siRNA对人卵巢癌移植瘤的抑制及其显像监测
- 2013年
- 目的 研究慢病毒介导的干扰RNA沉默人表皮生长因子受体2(HER2)对卵巢癌SKOV-3细胞移植瘤生长的影响,并探讨放射免疫显像在RNA干扰肿瘤生物治疗中的应用价值.方法 利用HER2-短发夹状(sh) RNA慢病毒表达载体和随机序列慢病毒载体感染SKOV-3细胞株,建立稳定表达HER2-小干扰(si) RNA的SKOV-3细胞株及阴性对照(NC)细胞株.分别将细胞株接种于裸鼠,建立荷人卵巢癌裸鼠模型实验(KD1)组和NC组,并以未感染的SKOV-3细胞株裸鼠模型作为空白对照(CON)组,检测各组裸鼠(每组5只)的成瘤率、成瘤时间、瘤体大小、HER2蛋白表达.通过131Ⅰ-曲妥珠单克隆抗体(Herceptin)进行荷瘤小鼠放射免疫显像,观察肿瘤显影情况,比较各实验组T/B比值.采用SPSS 17.0对实验结果进行单因素方差分析和最小显著差异t检验.结果 裸鼠成瘤率为100％(15/15).CON组、NC组和KD1组的平均成瘤时间分别为(4.583±0.520)、(4.567±0.284)和(6.023±0.316) d(F=13.946,P＜0.01),KD1组移植瘤较另2组平均成瘤时间延长(t=4.557、4.608,均P＜0.01).至种植后28 d各组间移植瘤体积差异有统计学意义(F=26.343,P＜0.01);CON组、NC组和KD1组离体瘤质量分别为(0.614±0.135)、(0.558±0.190)和(0.120±0.489) g(F=225.026,P＜0.01);KD1组平均瘤体积(t=7.125、4.759)、瘤体质量(t=19.158、16.977)较另2组明显减小(均P＜0.01).免疫组织化学结果显示KD1组HER2蛋白表达明显减少(弱阳性).核素显像示各组荷瘤小鼠移植瘤均有不同程度显影,KD1组1、4、8、12、24、48、72和96 h T/B比值(0.208 ～4.427)均低于NC组(0.576～5.508)和CON组(0.640～5.695;F=9.197～ 39.375,均P＜0.05).结论 慢病毒介导的HER2-siRNA可以显著抑制人卵巢癌移植瘤的生长;131Ⅰ-Herceptin放射免疫显像能在一定程度上反映HER2蛋白的表达情况,有望用于针对HER2靶点的RNA干扰肿瘤生物治疗的疗效评估.
- 钱红吴强乐王小侠杨仪尤嘉熙朱本兴石怡珍
- 关键词：肿瘤移植
