刘琴
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 发文基金：转基因生物新品种培育专项陕西省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 秦川牛胎儿骨骼肌卫星细胞的分离培养被引量：5
- 2012年
- 【目的】探索胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及基因转染的方法。【方法】分别采用Ⅰ型胶原酶消化、Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化及链霉蛋白酶消化法对胎牛骨骼肌卫星细胞进行培养,比较了3种不同分离方法所得细胞数及其存活率的差异;利用差速贴壁法和Percoll密度梯度离心相结合的方法纯化骨骼肌卫星细胞,对纯化后的细胞进行myostatin基因RT-PCR以及结蛋白(Desmin)免疫细胞化学染色鉴定,最后通过电转染法对纯化的骨骼肌卫星细胞进行EGFP基因转染研究。【结果】3种消化培养方法中,以链霉蛋白酶消化法分离得到的胎牛骨骼肌卫星细胞数显著高于其它2种方法(P<0.05),但细胞存活率较低(P<0.05);而采用Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化法可以得到相对较高的细胞数及存活率。利用差速贴壁和Percoll密度梯度离心相结合的方法可以得到纯化的骨骼肌卫星细胞;电转染法适用于骨骼肌卫星细胞的基因转染。【结论】建立了胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、纯化、鉴定及基因转染的方法,为通过转基因方法改良秦川牛产肉性能研究奠定了基础。
- 何玉龙吴月红权富生刘琴张涌
- 关键词：骨骼肌卫星细胞EGFP基因
- 优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立
- 诱导多功能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）是指通过外源导入一些与维持胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）多能性相关的基因，使终末分化的成体细胞重...
- 刘琴
- 关键词：慢病毒载体IPSCS干细胞
- β-巯基乙醇和发情羊血清对牛颗粒细胞体外培养的影响被引量：3
- 2011年
- 为满足实验室卵母细胞体外成熟共培养和胚胎共培养的需要以及进行卵巢颗粒细胞生物学功能等研究的需要,进行牛卵巢颗粒细胞的体外培养研究。在基础培养液TCM199中分别添加12.5、25、50、100、200μmol/L的β-巯基乙醇(BME),观察颗粒细胞生长状况;在基础培养液中分别添加体积分数为10%的发情山羊第1天血清、体积分数为10%的发情山羊第11天血清和体积分数为10%的胎牛血清,观察颗粒细胞生长和增殖情况。体外培养颗粒细胞的活细胞率随着添加BME浓度的增大而增加,在25μmol/L时达到最高,此后随浓度的增大而降低;发情山羊第1天的血清组中,颗粒细胞生长和增殖情况最好。BME可以提高颗粒细胞体外培养的活率,最佳添加浓度为25μmol/L;发情山羊第1天的血清可有效促进颗粒细胞体外培养生长和增殖。
- 权富生刘琴王丽君马会明王勇胜张涌
- 关键词：体外培养
