刘琴
- 作品数:48 被引量:102H指数:6
- 供职机构:中国人民解放军更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 一种车载急救包
- 本实用新型涉及一种车载急救包,其不同之处在于:其包括第一包体,第一包体包括上端开口的容纳部、及设于容纳部上端的第一盖部;设于容纳部第一侧的第二包体,第二包体的下端设置有第一卡扣结构;设于容纳部第一侧的第三包体,第三包体的...
- 杨丽君樊光辉张宜喻晶邓惠玲刘长清曾东汉陈芳刘琴王丽平
- 叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验被引量:2
- 2012年
- 目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物CD105、CD45、CD44、CD29的表达;免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶(NSE成熟神经元的特异性标志)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP胶质细胞的标记物)的表达;平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力;Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化;酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、Bax、Caspase-3的表达。结果分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD105、CD45,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明,叶酸与成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化,减轻脑组织的炎症反应,恢复受损神经细胞,增加脑组织内BDNF、NGF的含量,上调BCL-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达。结论叶酸联合成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能,对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。
- 刁波刘琴王丽萍张宜
- 关键词:叶酸成体神经干细胞创伤性脑损伤
- 一种实验兔膝关节滑膜组织提取新方法被引量:2
- 2016年
- 类风湿性关节炎(RA)典型病理表现之一为滑膜组织增生。成纤维样滑膜细胞(FLSs)在RA的发生、发展中发挥着重要作用。在原代FLSs体外培养过程中,滑膜组织提取成功与否是实验顺利进行的关键。以往兔膝关节滑膜组织提取大都是提起髌骨上下进行分离,在实验中我们发现将髌骨提起分离两侧及胫骨时需要将髌骨翻转,此时难以辨认关节囊内外层组织的解剖关系,致使分离困难,可能将纤维层混杂导致培养细胞纯度不高。
- 王俊伟陈利锋王华松陈芳王丽平刘琴
- 关键词:膝关节滑膜滑膜组织滑膜细胞纤维样组织增生
- 一种单人重伤急救包
- 本实用新型涉及一种单人重伤急救包,其不同之处在于:其包括第一包体,第一包体包括一底部及两侧部,第一包体的侧部设于第一包体的第一侧和第二侧,第一包体的侧部边缘设置有第一拉链部,第一包体的内侧设置有用于放置急救物品的第一容纳...
- 樊光辉张宜杨丽君喻晶邓惠玲刘长清曾东汉陈芳刘琴王丽平
- 脂肪干细胞分离纯化方法研究进展被引量:2
- 2015年
- 脂肪干细胞作为种子细胞广泛应用于组织工程中,而获得足够量的、活性高的、高纯度的脂肪干细胞是其在组织工程中应用的前提。本文综述近几年来脂肪干细胞分离纯化方法的研究进展,比较各方法的优缺点,为分离纯化出理想的脂肪干细胞提供理论依据。
- 刘琴王丽平陈芳张宜
- 关键词:脂肪干细胞纯化酶消化法密度梯度离心法
- 脂氧素A4对Aβ_(25-35)所致N2a细胞损伤的保护作用初探被引量:1
- 2017年
- 目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ_(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染色来评价细胞模型是否构建成功。细胞分为对照组、模型组(20μmol/L Aβ_(25-35))和LXA4保护组(50、100、200 nmol/L)。采用CCK-8法检测N2a细胞的活性;荧光酶标仪检测N2a细胞内活性氧(ROS)水平;ELISA法检测细胞培养上清中白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:20μmol/L Aβ_(25-35)处理N2a细胞24 h可建立细胞损伤模型。LXA4保护组的细胞存活率均较模型组显著升高。与模型组相比,200 nmol/L LXA4保护组细胞内ROS水平显著降低(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组IL-10水平显著高于模型组(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组的TNF-α水平显著低于模型组(P<0.01)。结论:LXA4对Aβ_(25-35)损伤N2a细胞具有保护作用,其机制可能是抑制ROS水平以及调节炎症因子的表达。
- 武强吴乐濮捷崔敏徐志鹏刘琴陈芳
- 关键词:脂氧素A4N2A细胞Β-淀粉样蛋白25-35阿尔茨海默病
- 兔脂肪干细胞的多向诱导分化被引量:6
- 2012年
- 背景:研究表明脂肪干细胞体外特定诱导条件下实现了向骨、软骨、脂肪、肌肉、心肌细胞、神经细胞、上皮细胞以及肝细胞方向分化。目的:进一步验证脂肪干细胞的分离培养方法及其基本生物学特性,并对细胞表型进行鉴定。方法:从成年日本大耳白兔的颈背部分离脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞并培养,待细胞生长至约80%融合时传代,用倒置显微镜逐日观察细胞生长情况和形态特征,描绘其生长曲线;流式细胞技术检测细胞表面标记物;将脂肪干细胞行成骨和成脂诱导,分别通过碱性磷酸酶、茜素红、VonKossa(钙结节)染色和油红O染色检测脂肪干细胞成骨分化潜能和成脂分化潜能,以未诱导细胞作为对照组。结果与结论:体外培养的脂肪干细胞呈梭形纤维样细胞形态,增殖活跃,多次传代后细胞仍保持较强增殖能力,生长曲线呈"S"型。流式细胞仪检测第3,6代脂肪干细胞均高表达CD29、CD44,阳性率超过90%;低表达CD34、CD45阳性率不超过5%,且CD29、CD44随着传代表达逐渐增高,CD34、CD45随细胞培养时间延长表达逐渐降低。成骨诱导实验组碱性磷酸酶、茜素红、vonKossa染色阳性,成脂诱导实验组油红O染色阳性,对照组均为阴性。结果证实,兔脂肪干细胞在体外易于分离培养,保持稳定增殖,并表达间充质干细胞相关的表型,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞。
- 王清富陈庄洪蔡贤华谢永辉刁波刘琴
- 关键词:脂肪干细胞干细胞成骨诱导CD29CD44CD34CD45
- 介绍一种新型中药弹性止血绷带
- 2016年
- 目的设计一种用于四肢外伤急救的中药弹性止血绷带。方法通过止血纱布口袋和中药止血粉的共同作用,利用扁平敷料口袋对伤口进行按压,并根据外伤部位,调节弹性绷带的长度进行固定止血。结果新型中药弹性止血绷带快速止血效果明显,既可作为军队常配急救器材,又可作为民用产品。结论通过查阅文献并结合目前实验观察结果,新型中药弹性止血绷带初步达到预期效果。
- 陈芳刘琴王丽平张宜樊光辉
- 悬浮组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞被引量:3
- 2016年
- 目的:建立兔成纤维样滑膜细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常兔膝关节滑膜组织,用悬浮组织块法分离培养兔成纤维样滑膜细胞,观察细胞生长状况及形态特征,取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线,免疫荧光法检测波形蛋白的表达情况,并与组织块贴壁法进行比较。结果:两种方法体外培养得到的兔成纤维样滑膜细胞形态为长梭形纤维样,细胞生长力较旺盛,生长曲线为典型的"S"形,免疫荧光检测显示第3代细胞强表达波形蛋白。结论:悬浮组织块法可以分离培养出兔成纤样维滑膜细胞,方法简便,效率高,为体外分离培养兔成纤维样滑膜细胞提供了一种新的方法。
- 刘琴王丽平陈芳陈利锋张宜
- 佐剂性关节炎模型兔成纤维样滑膜细胞的培养被引量:2
- 2017年
- 背景:目前研究者多采用酶消化法从类风湿性患者和佐剂性关节炎大鼠的滑膜组织中分离培养成纤维样滑膜细胞,采用组织块贴壁法体外培养佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞较少见。目的:建立佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞的培养方法并观察细胞的生物学特性。方法:采用多点多次注射佐剂的方法制备佐剂性关节炎兔动物模型,取膝关节滑膜组织,用组织块贴壁法分离培养成纤维样滑膜细胞,观察细胞形态特征。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,并用免疫荧光法检测波形蛋白的表达。结果与结论:倒置显微镜观察原代培养的关节炎兔滑膜细胞形态均为长梭状纤维样,符合成纤维样滑膜细胞的生长特征,且表达波形蛋白的细胞达98%。说明采用组织块贴壁法成功分离培养了佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞。
- 王丽平刘琴陈芳陈利锋张宜
- 关键词:佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞