- 芹黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞增生的影响被引量：1
- 2013年
- 背景青光眼滤过手术后人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）的增生是滤过手术失败的主要原因，寻找抑制术后HTFs增生的药物可提高滤过手术的成功率。目的观察芹黄素对HTFs体外生长的抑制效应并探讨其作用机制。方法斜视手术中获取的人眼Tenon囊组织剪成1mm×1mm×1mm的组织块，进行原代培养，免疫荧光法进行细胞波形蛋白检测以鉴定培养的HTFs。取第3～5代HTFs接种于96孑L板中，加入0、20、40、80、160μmol／L芹黄素后继续培养，于24、48、72h后分别取一块96孔板，在酶联免疫检测仪上检测560nm波长处各组细胞的吸光度（A。）值，磺基罗丹明B（SRB）法测定细胞的增生能力。分别在培养基中加入40、80、160μmol／L芹黄素，同时在不同浓度芹黄素组培养基中均加入10汕g／LBrdU，继续培养48h，在各组同一个视野下分别拍摄荧光显微镜和光学显微镜照片，计算BrdU的标记率，以未添加任何芹黄素（0μmol／L）组为对照组。用Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察培养细胞的形态学改变，采用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和细胞周期的变化。结果培养的细胞生长状态良好，免疫荧光法检测可见细胞对波形蛋白呈阳性反应，为细胞质中均匀的绿色荧光，确定培养的细胞为HTFs。SRB法检测结果显示，HTFs的增生值（A。）随着芹黄素浓度的增加而逐渐下降，同浓度芹黄素组HTFsA。值随着作用时间的延长逐渐下降，差异均有统计学意义（F㈣u：480．306，P=0．000；F目目=555．144，P=0．000）。0、40、80~mol／L芹黄素作用HTFs48h后BrdU的标记率分别为（87．860＋-0．632）％、（61．520＋-4．306）％、（23．480~4．472）％，各组之间的总体比较差异有统计学意义（F=299．347，P=0．000），其中40μmol／L、80μmol／L芹黄素组HTFsBrdU的标记率均明显低于0μmol／L芹黄素组，差异均有统计学意义（P〈
- 邹会会王继兵黄旭东刘姗姗满辉李寿庆马刚
- 关键词：芹黄素凋亡
- 氯化锂对人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:观察氯化锂(Lithium chloride)对人眼Tenon囊成纤维细胞(human Tenon's capsule fibroblasts,HTFs)体外生长的抑制效应,并探讨其作用机制。方法:磺基罗丹明(SRB)法和BrdU法检测细胞生长抑制率;采用流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期的变化;Hoechst33258染色后荧光显微镜观察细胞形态学的改变。结果:在40～160mmol/L范围内,氯化锂能够抑制HTFs的增殖,且呈剂量与时间依赖性。氯化锂使HTFs阻滞于G2/M期,且能诱导细胞凋亡,高浓度组尤为明显。结论:氯化锂能抑制HTFs增殖,机制为诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于G2/M期。
- 邹会会王继兵黄旭东刘姗姗满辉
- 关键词：氯化锂成纤维细胞
- 氯化锂对人Tenon囊成纤维细胞增生抑制作用的机制研究
- 2021年
- 目的探讨氯化锂对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)缝隙连接细胞间通讯(GJIC)的影响及其可能的作用机制。方法收集2019年4月于德州市人民医院眼科行斜视手术的1例患者的Tenon囊组织,剪成1 mmxl mmX1 mm的组织块,进行原代培养并传代,取第4代HTFs进行实验。将HTFs分为对照组和氯化锂处理组,对照组加入不含氯化锂的细胞培养基,氯化锂处理组加入含80 mmol/L氯化锂的细胞培养基,继续培养48 h。采用细胞划痕染料标记示踪法标记偶联指数,评估GJIC功能;采用细胞免疫荧光法检测HTFs中Cx43的表达和定位;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测HTFs中Cx43 mRNA及蛋白的表达水平。结果培养的细胞呈长梭形并呈单层放射状或涡旋状贴壁生长,细胞质vimentin染色呈阳性。细胞划痕染料示踪实验结果显示,氯化锂处理组细胞偶联指数为9.04±0,53,明显高于对照组的4.94±0,39,差异有统计学意义(t=-18.79,P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,对照组可见Cx43荧光呈点状分布于细胞相连处的细胞膜上,氯化锂处理组Cx43染色明显增强。实时荧光定量PCR结果显示,对照组Cx43 mRNA相对表达量设为1,氯化锂处理组Cx43 mRNA相对表达量明显升高,为1.97±0,23,差异有统计学意义(t=-14.426,P<0.01)。Western blot检测结果显示,氯化锂处理组Cx43蛋白相对表达量为0.871±0,057,明显高于对照组的0.446±0.028,差异有统计学意义(t=-11.682,P<0.01)o结论氯化锂可上调HTFs中Cx43 mRNA及蛋白表达并增强HTFs间GJIC功能,提示氯化锂增强GJIC的功能可能是其抑制HTFs增生的机制之一。
- 邹会会刘姗姗梁玲范晓军王继兵
- 关键词：氯化锂青光眼
