冯娟
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种提高植物耐盐性的棉花耐盐基因GarCIPK
- 本发明公开了一种棉花耐盐基因即棉属野生种旱地棉<I>CIPK</I>类蛋白磷酸激酶基因<I>GarCIPK</I>，具有序列表中SEQIDN0.1的序列。本发明利用电子克隆及RT-PCR技术分离了一个棉花耐逆性相关蛋白，...
- 沈新莲冯娟刘章伟徐鹏张香桂
- 文献传递
- 棉属野生种旱地棉苏氨酸醛缩酶基因GarTHA的克隆及功能验证被引量：2
- 2013年
- 盐胁迫是影响作物生长和发育的重要因素之一。一些棉属野生种具有较好的耐盐性,是开展棉花耐盐性机制研究以及改良陆地棉耐盐性的重要资源。本研究基于cDNA-AFLP技术分离获得的旱地棉(Gossypium aridum)盐胁迫下差异表达片段序列信息,经电子克隆技术和RT-PCR方法克隆了旱地棉苏氨酸醛缩酶基因cDNA全长,命名为GarTHA(GenBank登录号为KC167360)。该cDNA全长为1018 bp,包含一个822 bp的完整ORF,编码273个氨基酸残基,蛋白质分子量为82.57 kD,等电点为4.89。GarTHA基因与杨树PtTHA基因同源性最高,为84.6%。为进一步验证其功能,利用拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体,将GarTHA基因的完整ORF转入拟南芥中,获得转基因植株并进行了耐盐性鉴定。结果表明,在盐胁迫下转基因拟南芥种子的发芽率明显高于野生型,且转基因植株的根长显著高于野生型。说明GarTHA基因可能参与植物的盐胁迫反应,从而提高植物抗逆性。
- 范昕琦刘章伟冯娟徐鹏张香桂沈新莲
- 关键词：旱地棉耐盐性结构特征功能分析
- 盐胁迫下棉属野生种旱地棉(Gossypium aridum)差异表达基因的cDNA-AFLP分析(英文)被引量：6
- 2012年
- 以一个耐盐的二倍体野生种旱地棉和对盐敏感的陆地棉栽培种苏棉12号为材料，运用cDNA—AFLP技术，比较两个材料分别在盐胁迫前后的表达情况，获得了25个仅在旱地棉盐胁迫下特异表达的转录片段（TDF）。将这些片段进行电子克隆，延伸后的序列进行BLAST分析，结果显示23个转录片段推断的氨基酸序列与已知的蛋白同源，这些盐诱导表达的基因主要涉及离子转运、活性氧清除、细胞信号传导、细胞分裂、转录调节、膜保护、渗透调节等功能蛋白。从23个差异表达的转录片段中选择9个进行实时定量PCR（qRT—PCR）分析，结果表明这些基因在盐胁迫后表达显著增强，而且多数在12～24h达到高峰。这些cDNA克隆是开展棉花耐盐性分子基础研究的重要资源。
- 刘章伟冯娟范昕琦徐鹏张香桂沈新莲
- 关键词：棉属盐胁迫
- 棉属野生种旱地棉蛋白激酶基因GarCIPK8的克隆与功能分析被引量：5
- 2013年
- CIPK(calcineurin B-like calcium sensor interacting protein kinase)是植物钙感受器钙调磷酸酶B类似蛋白特定靶向的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在前期的研究中,我们将棉属野生种D亚组旱地棉(Gossypium aridum)盐胁迫前后RNA混合样品进行转录组测序,发现一CIPK相关基因存在较高的转录丰度。盐胁迫下荧光定量PCR分析表明该基因在根部表现诱导上调表达,推测该基因可能参与植物在高盐胁迫下的生理调控。利用电子克隆及RT-PCR方法从旱地棉中克隆了一个ORF全长为1350bp的蛋白激酶基因GarCIPK8。序列分析表明该基因编码的蛋白含有449个氨基酸,分子量为51.12kD,理论等电点为8.13,其N端催化结构域包含一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶域,C端具有植物CIPK蛋白家族特有的24个氨基酸组成的NAF保守结构域;与水稻OsCIPK8蛋白的相似度为73.95%。为进一步验证其功能,利用组成型高效强启动子CaMV35S和拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体并转化烟草,经PCR和RT-PCR分子检测,证明GarCIPK8基因已经整合到烟草基因组中,并正常表达。T1代转基因植株耐盐性鉴定结果表明GarCIPK8基因对提高转基因植株的耐盐性有较明显的作用,PEG干旱模拟试验也证明GarCIPK8基因可增强植株的抗旱性。
- 冯娟范昕琦徐鹏张香桂沈新莲
- 关键词：旱地棉耐盐性耐旱性
- 一种提高植物耐盐性的棉花耐盐基因GarCIPK
- 本发明公开了一种棉花耐盐基因即棉属野生种旱地棉<I>CIPK</I>类蛋白磷酸激酶基因<I>GarCIPK</I>，具有序列表中SEQIDN0.1的序列。本发明利用电子克隆及RT-PCR技术分离了一个棉花耐逆性相关蛋白，...
- 沈新莲冯娟刘章伟徐鹏张香桂
- 文献传递
