于秉治 作品数:178 被引量:415 H指数:13 供职机构: 中国医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
Akt1和Akt2在小鼠卵母细胞中定位的差别 被引量:1 2015年 目的研究小鼠卵母细胞减数分裂恢复过程中Akt1和Akt2在从GV期向GVBD期转化期间亚细胞定位的特点。方法采用间接免疫分析技术观察Akt1和Akt2在小鼠卵母细胞GV期和GVBD期的定位;利用显微注射实验技术将Akt1和Akt2抗体分别注射入卵细胞,在不同时间点观察GVBD的发生的数量。结果 Akt1在小鼠卵母细胞GV期均匀的分布于细胞质,而在GVBD期则分布于细胞膜。Akt2在GV期和GVBD期分布于整个细胞,但是GV期以细胞质更为密集,而在GVBD期以细胞核附近更为密集。结论 Akt1可能参与小鼠卵母细胞减数分裂恢复的调控。 邓欣 李森 刘艳春 曹宇 李亘松 于秉治关键词:卵母细胞 减数分裂 蛋白激酶CK2-β在SACC-83及SACC-LM细胞中的活性变化 2003年 目的 :探讨蛋白激酶CK2 β在涎腺腺样囊性癌 (SACC)及肺转移涎腺腺样囊性癌 (SACC LM )中的活性变化。方法 :利用激酶活性测定方法进行活性测定分析。结果 :与未转移SACC(SACC 83)细胞相比 ,SACC LM细胞中蛋白激酶CK2 β具有较高的活性 ;在两种细胞中 ,细胞核中的活性都高于在细胞质中的活性。 结论 :蛋白激酶CK2 郭澍 王玉新 孙长伏 宗志宏 刘芙蓉 于秉治关键词:腺样囊性癌 肺转移 激酶活性 mTORC2调节细胞骨架的信号通路 2012年 近几年来,关于哺乳动物雷帕霉素靶(mammalian target of rapamycin,mTOR)在各种哺乳动物细胞中调节肌动蛋白微丝极化及肌球蛋白微丝网形成的研究一直在不断地取得新的进展。尽管到目前为止,包括mTORC2上游和下游在内的相关的调控路径还未明确,但是因为mTORC的生物学多样性,使其成为了当今生物学研究的焦点之一。基于长久以来特别是近五年对mTORC2的研究,在涉及细胞运动迁移、增殖分化、蛋白质合成、凋亡及自噬等生物学功能的研究中,一些重要的下游相关调控分子和蛋白相继被发现,比如P-Rex1/2、Rho家族GTPases、PKC、cAMP、p27Kip1等。该综述着重总结了mTORC2实现这些生物学功能所可能通过的四条路径。当然,仍然需要大量的实验数据和研究证据进一步地证实和完善这些已经发现的可能存在的路径。 陈银涛 于秉治 武迪迪关键词:细胞骨架 微丝 肌动蛋白 信号通路 关于受精卵发育的新观点——PKC及其内源性抑制剂在受精卵发育中的调控作用 本文对蛋白激酶C (PKC)及其内源性大分子抑制剂对受精卵发育的影响及PKC在受精卵内定位进行了研究。通过显微注射PKC及其抑制剂,观察到PKC大分子抑制剂对受精卵发育有明显的抑制作用,而PKC却有明显的促进作用,提示P... 杨彧 薛海晖 宗志宏 于秉治小鼠Cdc25B核输出序列 被引量:2 2007年 为探讨小鼠卵母细胞中Cdc25B(cell division cycle 25 homolog B)核输出序列在卵母细胞G2/M转换过程中的调控机制,应用显微注射方法将Cdc25B的野生型、N末端缺失1~51位氨基酸片段(Cdc25B-Δ51)、1~65位氨基酸片段(Cdc25B-Δ65)突变体的mRNA和pEGFP-Cdc25B-WT、pEGFP-Cdc25B-Δ51、pEGFP-Cdc25B-Δ65的融合质粒显微注射到含有完整生发泡的小鼠卵母细胞中,观察不同注射组小鼠卵母细胞发生生发泡破裂的情况及蛋白质亚细胞定位。结果显示Cdc25B-Δ51及Cdc25B-Δ65都丧失了诱导小鼠卵母细胞减数分裂的能力;同时亚细胞定位研究表明在G2期野生型Cdc25B主要分布在细胞浆中,Cdc25B-Δ51在核浆均有分布,Cdc25B-Δ65则主要分布于细胞核中。研究结果表明Cdc25B在52~65位氨基酸之间存在核输出序列(nuclear export sequence,NES),NES参与的核转运机制作为一种重要的调控机制控制着细胞的生理进程;N末端的氨基酸对减数分裂的重启动起促进作用。 赵鸿梅 崔城 徐小燕 于秉治关键词:CDC25B 减数分裂 PKC对小鼠受精卵发育的调控作用 被引量:11 2000年 为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 刘莹 张杰 武迪迪 宗志红 于秉治关键词:受精卵 早期发育 MPF PK TPA 端粒酶活性检测对早期膀胱肿瘤诊断的意义 2003年 目的 :研究端粒酶催化蛋白亚单位 (hTRT)mRNA在肿瘤脱落细胞的表达情况 ,建立一种恶性肿瘤的早期诊断的新方法。方法 :通过离心 ,使尿液中的肿瘤细胞沉淀 ,提取总RNA ,用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法进行检测。结果 :4 0例膀胱肿瘤患者中 36例阳性 ,9例非膀胱肿瘤中 1例阳性。结论 :RT PCR法检测hTRTmRNA是一种早期 ,敏感 ,简便 ,快速 。 郝凤进 刘莹 于爱鸣 李胜军 宗志宏 于秉治关键词:端粒酶 反转录-聚合酶链式反应 膀胱肿瘤 Wee1B蛋白S15位点突变抑制小鼠1-细胞期受精卵的发育 被引量:3 2014年 为研究小鼠Wee1B蛋白S15位点磷酸化状态对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,构建pcDNA3.1/V5-His-TOPO-Wee1B-S15A(Ser突变成Ala)/D(Ser突变成Asp)突变体,体外转录成mRNAs.对小鼠进行超排卵后当晚与雄鼠1∶1合笼,第2 d早取受精卵后培养至S期,显微注射Wee1B-WT(野生型)/KD(激酶失活型)-mRNAs和突变体Wee1B-S15A/D-mRNAs,观察其对受精卵发育、有丝分裂促进因子(MPF)活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响.结果表明,过表达Wee1B-WT和Wee1B-S15A/D可有效抑制受精卵有丝分裂进程,明显降低卵裂率.过表达模拟磷酸化的突变明显抑制MPF的活性,CDC2-pTyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致.因此,在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠Wee1B蛋白S15位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式. 刘超 肖建英 任丽莉 于秉治关键词:蛋白激酶A 小鼠受精卵 蛋白激酶C对Pgp介导的K562细胞耐药性的影响 被引量:3 2001年 目的 研究蛋白激酶C(PKC)在P 糖蛋白 (Pgp)介导的人类白血病K5 6 2细胞多药耐药中的作用。方法 用苔盼蓝拒染法检测药物敏感性 ,用免疫组织化学法检测Pgp的表达 ,用流式细胞仪检测细胞内柔红霉素 (DNR)积聚 ,用Takai法及Westernblot法分别检测PKC活性和PKCα含量。结果 耐药株K5 6 2 /D细胞对DNA及多种抗癌药物显示多药耐药性 ,并存在Pgp过度表达。K5 6 2 /D与敏感株K5 6 2 /S细胞相比 ,PKC总活性无明显差别 ,但PKCα含量显著增高。PKC激活剂TPA增加K5 6 2 /S和K5 6 2 /D细胞的PKC活性 ,使PKC和PKCα由胞质向胞膜转位 ,K5 6 2 /D细胞内DNA积聚减少。PKC抑制剂staurosporine减少K5 6 2 /S和K5 6 2 /D细胞的PKC活性及PKCα含量 ,增加K5 6 2 /D细胞内DNA积聚。结论 PKCα在K5 6 2 /D细胞中显著增高 ,上调PKC ,使K5 6 2 /D细胞内DNA积聚减少 ,下调PKC ,使K5 6 2 /D细胞内的DNA积聚增加 。 尚世丽 刘云鹏 罗颖 卢香兰 张敬东 车晓芳 于秉治 翟明关键词:P-糖蛋白 蛋白激酶C K562细胞 蛋白激酶C的分子异种研究 1990年 蛋白激酶C是一具有多种亚型的大蛋白族,这些亚型虽有相近似的结构,但在活化方式、动力学性质及催化特性上是不同的。DE-52的小峰也可被Ca^(+2)、甘油二酯及磷酯活化。等电点约为5.6,也是蛋白激酶C。 王选仁 于爱呜 候伟健 张宪 于秉治关键词:蛋白激酶C 等电点 活化