顾丽红 作品数:14 被引量:115 H指数:5 供职机构: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
无机焦磷酸化酶融合基因克隆分析及表达载体的构建 被引量:1 2007年 无机焦磷酸化酶(PPa)基因是植物糖代谢过程中的蔗糖合成调控基因,为将该基因运用于甘蔗转基因的研究,从面包酵母克隆了该基因,利用生物信息学方法对该基因进行组成成分和理化性质分析,预测分析其疏水性/亲水性,并将其核苷酸和编码氨基酸序列提交Genbank进行比对分析。利用从武运粳8号水稻中克隆得到Rub isco小亚基基因(rbcS)的5'上游调控区rbcS启动子,构建了由rbcS引导的无机焦磷酸化酶融合基因,并将其转入根癌农杆菌EHA105菌株中。 范海阔 黄东杰 刘巧泉 顾丽红 张树珍关键词:转基因甘蔗 PPA 生物信息学 运用龙血树组织培养生产血竭的方法 本发明公开了一种运用龙血树组织培养生产血竭的方法,它是以龙血树的幼枝顶端生长点作为外植体,在诱导愈伤组织的培养基上培养诱导产生愈伤组织,愈伤组织再诱导分化形成丛生芽,丛生芽经过继代增殖并在增殖培养基中加入诱导血竭产生的植... 杨本鹏 张树珍 昝丽梅 张学 顾丽红文献传递 海南龙血树的组织培养与快速繁殖 被引量:17 2005年 以海南龙血树的顶芽和侧芽作为外植体,把其接种于MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L+PVP100mg/L+蔗糖30g/L培养基上培养40 ̄50d可诱导其腋芽萌发,再把萌发后所形成的新芽切割下来接种于MS+BA2mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖30g/L的培养基上培养25 ̄30d可诱导形成丛生芽,丛生芽在继代培养过程中每25 ̄30d可增殖3 ̄5倍。把丛生芽分割成单株并接种于MS+BA3mg/L+GA31mg/L+蔗糖30g/L培养基上培养4周后使其壮苗后再接种于MS+NAA0.5 ̄1.0mg/L+蔗糖30g/L培养基上培养4周可诱导小芽形成完整的根系,小植株移栽成活率可达98%。该体系的建立为海南龙血树的工厂化育苗奠定了坚实的基础。 杨本鹏 张树珍 杨学 顾丽红 冯翠莲 昝丽梅 蔡文伟关键词:海南龙血树 快速繁殖 甘蔗花叶病的基因工程研究 被引量:6 2009年 甘蔗花叶病(Sugarcane mosaic disease)是世界上重要的病毒病害之一,严重的影响了世界甘蔗的产量。对甘蔗花叶病病原菌分类、病原系统侵染的过程、相关致病机理、病原菌检测手段以及抗甘蔗花叶病基因工程的研究现状与前景进行了综述。 王文治 马滋蔓 张树珍 杨本鹏 蔡文伟 顾丽红 李娇关键词:甘蔗 甘蔗花叶病 致病机理 病毒检测 基因工程 甘蔗健康种苗培育体系的建立 被引量:35 2006年 通过热处理、温热处理结合茎尖分生组织培养建立有效的甘蔗(Saccharum L.)健康种苗生产的技术体系。以经过热处理和温热处理的甘蔗带芽茎段萌生的腋芽为外植体,取其茎尖分生组织接种于MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+PVP200mg/L+蔗糖30g/L的培养基上培养10 ̄20d可诱导其产生完整的小芽,再把产生的新芽切割下来接种于MS+6BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖30g/L的培养基上培养20d后便可形成由3 ̄5个芽组成的丛生芽,丛生芽在继代培养过程中每15 ̄20d可增殖3 ̄5倍。把丛生芽分割成单株并接种于1/2MS+NAA1mg/L+蔗糖20g/L培养基上培养10 ̄20d可诱导小芽形成完整的根系,小植株移栽成活率可达98%。植株生长健壮、整齐、无变异,经分子检测证明小植株能脱去宿根矮化病和花叶病的病原。该体系的建立为甘蔗健康种苗的工厂化育苗奠定了坚实的基础。 杨本鹏 张树珍 杨学 王业桥 顾丽红 冯翠莲 蔡文伟 张显勇关键词:甘蔗 茎尖分生组织培养 快速繁殖 健康种苗 金钱树的组织培养 被引量:5 2006年 以金钱树[Zamioculcaszamiifolia(Loddiges)Engler]的幼嫩小叶为外植体,采用幼叶→愈伤组织→丛生芽→完整植株的途径进行繁殖。结果表明:叶片在MS+BA2mg/L+2,4-D1.0mg/L+PVP0.5mg/L+活性炭0.5mg/L+蔗糖30g/L培养基上暗培养30d,可诱导形成愈伤组织;愈伤组织在MS+BA4mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖30g/L培养基上光照培养25d,可诱导形成丛生芽(丛生芽在继代培养过程中每20~25d可增殖3~5倍);丛生芽接种于MS+BA3mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L培养基上壮苗培养4周后,再转入1/2MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L培养基上培养30d,可诱导形成完整的根系。 顾丽红 杨本鹏 张树珍 杨学关键词:金钱树 观赏植物 愈伤组织 丛生芽 运用龙血树组织培养生产血竭的方法 本发明公开了一种运用龙血树组织培养生产血竭的方法,它是以龙血树的幼枝顶端生长点作为外植体,在诱导愈伤组织的培养基上培养诱导产生愈伤组织,愈伤组织再诱导分化形成丛生芽,丛生芽经过继代增殖并在增殖培养基中加入诱导血竭产生的植... 杨本鹏 张树珍 昝丽梅 张学 顾丽红文献传递 转基因甘蔗抗黑穗病鉴定研究 被引量:5 2009年 用分离得到的甘蔗黑穗病病菌单孢子菌丝体对5个甘蔗转基因株系进行体外抑菌作用鉴定,结果显示,5个转基因株系对甘蔗黑穗病均有不同程度的抗性表现;通过人工接种方法对转基因植株(T1)进行了甘蔗黑穗病病菌的田间接种实验,利用病害流行指标LP、SDD、IPmax、Ymax、AUDPC对其后代(T2)进行抗病性鉴定,结果表明,SCG1和SCG2两个株系表现为抗病(R),而SCG3、SCG4和SCG5三个株系表现为中抗(I);并结合RT-PCR技术鉴定目的基因在转基因甘蔗无性系后代(T2)中的表达,结果显示两个目的基因在转基因甘蔗无性系T2中均有表达,此结果与其抗病表现一致。 李娇 王震 杨本鹏 张树珍 蔡文伟 顾丽红 杨志才 王文治关键词:甘蔗黑穗病 抗性鉴定 龙血树血竭生物合成相关基因分离与分析 被引量:4 2008年 龙血树是热带、亚热带地区所特有的珍稀植物,是著名民间药物"血竭"的重要原料。该药在我国中药材市场中占有重要的地位。目前血竭的生产是从多年生的龙血树上取其带脂茎杆提炼而成,该法需要大量的原材料,不断的砍伐已使其资源面临枯竭的威胁,现其已被列为国家三级保护的濒危植物。如何有效地开发和利用龙血树这一宝贵的资源,使其得到可持续和高效的利用是目前研究的一个重要方向。本研究以经诱导物诱导处理刚产生血竭和未经诱导物处理的海南龙血树(Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep)组培苗为材料,利用抑制消减杂交(supression subtractive hybridization,SSH)技术构建了龙血树血竭生物合成相关基因的差减cDNA文库,采用PCR方法筛选差减文库获得431个重组子。随机挑取200个克隆经Reverse Northern Blot筛选剔除假阳性后,共获得59个差异较明显的阳性克隆,测序后得51条差异片段,通过BLASTn和BLASTx进行比较分析,结果表明:分离到与信号转导相关的cDNA片段5个,转录翻译相关蛋白cDNA片段5个,物质能量代谢酶类cDNA片段12个,另外有23个克隆在GenBank中均未发现显著相关的同源序列,推测它们可能是功能未知的新基因或是靠近3'-末端的基因片段,因保守性较低,难以通过同源比较推测其功能。 蔡文伟 张树珍 杨本鹏 冯翠莲 杨学 顾丽红关键词:海南龙血树 血竭 抑制差减杂交 甘蔗锌指蛋白ShZP基因正义反义植物表达载体的构建及转化烟草 被引量:1 2009年 根据本实验室克隆的甘蔗锌指蛋白ShZP基因cDNA序列,在开放阅读框两侧设计特异引物,通过PCR扩增引入相应的酶切位点,把甘蔗ShZP基因的编码区(大小为725bp)cDNA片段,分别以正向和反向插入到中间载体pCRBI的Prd29A启动子和NOS终止子之间,构建了其正义植物表达载体pCRBIShZP和反义表达载体pCRBIantiShZP。采用冻融法分别将pCRBIShZP和pCRBIantiShZP导入根瘤农杆菌菌株EHA105中,通过农杆菌介导法对烟草进行转化,经过12mg/L的PPT连续抗性筛选,共获得23株抗性植株,对其中的5株转正义基因烟草植株和9株转反义基因烟草植株进行PCR检测,分别获得3株转正义基因的阳性植株和4株转反义基因的阳性植株。PCR检测结果初步证明外源甘蔗锌指蛋白ShZP基因已成功整合到烟草基因组中,这一研究为植物抗逆基因工程研究打下了一定的基础。 喻时周 张树珍 杨本鹏 蔡文伟 罗遵喜 顾丽红关键词:甘蔗 锌指蛋白 植物表达载体