米东
- 作品数：8 被引量：27H指数：3
- 供职机构：上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 南农87C-38大豆优质11S球蛋白Gy7基因克隆及序列分析被引量：2
- 2007年
- 大豆种子不仅富含蛋白质,而且赖氨酸含量较高,利用大豆高赖氨酸基因能够弥补谷类作物种子赖氨酸含量的不足。运用现代分子生物学技术,从高蛋白大豆南农87C-38中克隆11S球蛋白Gy7全基因及cDNA序列。经生物公司测序后,利用vectorNTI软件将所克隆的Gy7全基因及cDNA序列与Genbank(AF319776和AF319777)报道的序列进行比对分析,同源性分别为99%和99.6%。序列比对结果显示,Gy7基因cDNA与Genbank报道的序列之间所有的核苷酸差异都位于第3外显子。由此推测,第1、第2和第4外显子编码的氨基酸对于G7多肽形成特定高级结构可能具有非常重要的作用,它们在进化过程中受到的选择压力可能比第3外显子更强。根据遗传密码表推测,克隆的Gy7与Genbank报道的cDNA序列所编码的多肽,两者存在2个氨基酸组成的差异。大豆球蛋白Gy7优质基因的获得为今后利用转基因技术改良水稻、小麦等谷类作物的营养品质奠定了基础。
- 顾婷玉李建粤米东肖刚
- 关键词：大豆克隆
- 大豆球蛋白研究以及在改良稻米营养品质中的应用被引量：4
- 2005年
- 11S大豆球蛋白是大豆贮藏蛋白的重要成分,目前已发现6种有功能的大豆球蛋白,G1、G2、G3、G4、G5和G7,编码这些大豆球蛋白的基因家族分别是Gy1、Gy2、Gy3、Gy4、Gy5和Gy7.本文在简要介绍大豆球蛋白组分、结构及基因家族后,采用生物信息学方法分析比较了不同种类大豆球蛋白基因之间的序列同源性,并对不同大豆球蛋白基因的遗传距离作了分析;重点比较分析不同大豆球蛋白的氨基酸序列和组成,以及不同酸性肽和碱性肽中重要氨基酸的含量,提出了利用大豆球蛋白基因进行水稻营养品质改良研究的新思路和新策略.
- 李建粤米东张伟闫其涛
- 关键词：大豆球蛋白基因家族同源性
- 总蛋白含量不同的水稻品种谷蛋白含量分析及Gt1启动子序列比较被引量：3
- 2005年
- 选取3种总蛋白含量差异较大的水稻为材料,在分析其谷蛋白含量的基础上,克隆它们的Gt1启动子,并采用vectorNTI软件对这3个Gt1启动子序列进行比较.结果显示,在不同总蛋白和谷蛋白含量的水稻品种中,Gt1谷蛋白基因启动子是有差异的.
- 米东李海权李建粤陈立琼
- 关键词：水稻克隆
- 大豆11S球蛋白基因Gy1启动子克隆及序列分析
- 2009年
- 以高蛋白大豆品种南农87C-38总DNA为模板,采用PCR法扩增获得约1100bp大小的DNA片段,回收该片段并克隆到pUCm-T载体上,选取阳性克隆进行PCR和酶切检测,再进行测序分析.序列分析显示该片段含1174个核苷酸,采用Vector NTI软件将试验中克隆的序列与GenBank E07850报道的Gy1启动子和GenBank X15121报道的Gy1启动子及信号肽对应序列分别进行比对,同源性分别为99.6%和99.3%,确定该片断为南农87C-38大豆11S球蛋白基因Gy1启动子及信号肽.该启动子的成功克隆,可为今后利用基因工程技术改良大豆种子营养品质研究奠定基础.
- 米东逯慧严琛李建粤
- 关键词：大豆启动子克隆
- 利用安全性转基因技术导入反义蜡质基因降低稻米直链淀粉含量被引量：15
- 2004年
- 利用安全性转基因技术中的共转化法, 将分别含有 p13W4 双元载体(含有潮霉素抗性基因、gus报告基因以及反义蜡质基因片段)和 p13W8双元载体(无潮霉素抗性基因和 gus 报告基因, 只含有反义蜡质基因片段)的根癌农杆菌以 1︰9 的比例混合导入超 2-10 高产水稻新品系中, 获得 34 棵转基因植株.PCR 分析转基因 T0 代植株, 结果显示, 有 15 株是共转化植株, 共转化率为 44.1%. 利用 p13W4 双元载体上的 gus 报告基因从 T1代种子中淘汰具有报告基因及抗性标记基因的转基因后代, 再利用 PCR 检测从 T1代植株中获得只有反义蜡质基因的植株. Southern blot杂交分析证实, p13W8双元载体 T-DNA已整合进入无抗性标记及报告基因的转基因后代基因组中. T2代成熟种子直链淀粉含量分析显示, 转基因植株糙米直链淀粉含量比对照有不同程度的下降, 幅度最大的比对照降低 28.61%. 由于获得的转基因后代只有目的基因而无抗性选择标记基因和报告基因, 而且水稻中的稻米直链淀粉含量已降低, 它们既可被用于筛选软米材料, 也可视为是能够用于其他水稻稻米食味品质改良的水稻新资源.
- 李建粤毛万霞杨丽君周根余刘佳闫其涛米东
- 关键词：反义蜡质基因直链淀粉含量转基因后代潮霉素报告基因
- 水稻Gt1启动子引导大豆球蛋白Gy7基因表达载体构建
- ＜正＞水稻是世界上近一半人口的主粮,它的营养品质一直是人们最关注的问题之一。目前常规水稻栽培品种稻米总蛋白质含量都较低,而且往往缺乏一些重要氨基酸。据报道,赖氨酸是水稻等各种禾谷类作物的第一限制性氨基酸。大豆球蛋白是大豆...
- 顾婷玉米东李海权张伟逯慧石少华李建粤
- 关键词：表达载体构建
- 文献传递
- 水稻26kDa球蛋白基因启动子克隆及序列分析被引量：1
- 2005年
- 以水稻品种日本晴基因组总DNA为模板,采用PCR扩增获得约900bp大小的DNA片段,回收该片段并与pUCm-T载体连接,转化感受态大肠杆菌。进行PCR检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析。测序结果显示,该片段含904个核苷酸对;采用vectorNTI软件将本试验中克隆的序列与Genbank(AY427575)公布的日本晴球蛋白基因启动子序列比对,有9个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻球蛋白基因启动子;在重要功能区段上,两者核苷酸序列完全一致。本研究认为造成长期不在一个环境中种植的同一水稻品种球蛋白基因启动子序列差异的原因之一,可能是核苷酸中性突变。水稻球蛋白基因启动子的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础。
- 吕英海米东李建粤丁瑶
- 关键词：SATIVA克隆
- 重要谷类种子贮藏蛋白的特性及改良研究被引量：8
- 2004年
- 在成熟谷类种子中,总蛋白约为种子干重的7%～16%,其中大部分为贮藏蛋白.这些贮藏蛋白对于人类和牲畜所需要的营养质量以及在食品加工中都有重要的影响.本文对一些重要谷类种子贮藏蛋白的组成特性以及利用基因工程技术提高谷类种子蛋白质含量和质量进行了全面综述.此外,还简要介绍了在利用基因工程改良谷物种子品质中可能产生的食品安全性问题、如何增加外源基因的表达量和全面提高谷类种子蛋白质含量以及解决的办法.
- 阎其涛李建粤米东刘佳
- 关键词：贮藏蛋白基因工程营养品质谷类
