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3D-SIM结构照明超分辨率显微镜实现蛋白质在植物亚细胞器内的定位被引量：3: 2015年; 基因表达产物蛋白质的亚细胞定位是解析基因生物学功能的重要证据之一。近年来出现的超分辨率光学成像技术已成功应用于人类和动物细胞中,预示着显微成像技术继激光共聚焦技术后的又一重要进步。由于植物细胞的特殊性和成像技术的研发取向,超分辨率光学成像技术在植物细胞蛋白质亚细胞定位的应用尚未见报道。该研究利用Delta Vision OMX显微镜技术,克服了叶绿体基粒中叶绿素自发荧光与融合蛋白荧光不易区分的缺陷,解决了受分辨率局限无法将植物细胞中蛋白质在亚细胞器内可视化精确定位的技术难题,成功地将植物蔗糖合成酶Zm SUS-SH1定位在烟草表皮细胞叶绿体基粒周围。该研究同时建立了一套基于撕片制片法的简便OMX显微镜制片方法,并针对OMX显微成像技术在植物细胞中蛋白质亚细胞定位的应用进行了讨论。; 刘玥尹悦佳梁重阳黄殿帅王阳刘艳芝窦瑶冯树丹郝东云; 关键词：荧光蛋白

NaCl和Na2CO3胁迫下的高粱MAPKs基因家族表达模式: 促有丝分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是编码丝氨酸/苏氨酸特异的蛋白激酶,在植物生长发育、细胞周期调控和各种逆境胁迫信号转导过程中发挥重要的作用。碱性盐...; 窦瑶刘相国于莹陈宏宇曲昕宁王虎义张晓瑛郝东云; 关键词：高粱; 文献传递

蔗糖合成酶SH1在多酶复合物在调控淀粉生物合成过程中的生物学功能解析: 玉米蔗糖合成酶(sucrose synthase,SUS) SH1是淀粉合成代谢的关键酶之一。在植物的生长发育过程中,蔗糖合成酶既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,但人们普遍认为SUS的主要功能是在蔗糖的降解方向为多糖的合...; 窦瑶刘相国曲昕宁王虎义张晓瑛郝东云; 关键词：亚细胞定位蛋白质相互作用

14-3-3蛋白在玉米籽粒发育过程中的功能机制研究: 玉米籽粒的发育起始于双受精过程，种皮，胚和胚乳是籽粒发育过程中最活跃的三个组织，它们之间彼此交换中间产物，产生连续的相互作用。在籽粒发育的后期，伴随着胚乳的消耗，蛋白质和淀粉等物质达到积累的高潮，而胚则逐步获得适应脱水干...; 窦瑶; 关键词：玉米籽粒发育

蔗糖合成酶SH1在多酶复合物在调控淀粉生物合成过程中的生物学功能解析: 玉米蔗糖合成酶(sucrose synthase,SUS)SHl是淀粉合成代谢的关键酶之一。在植物的生长发育过程中,蔗糖合成酶既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,但人们普遍认为SUS的主要功能是在蔗糖的降解方向为多糖的合成...; 窦瑶刘相国曲昕宁王虎义张晓瑛郝东云; 关键词：亚细胞定位蛋白质相互作用; 文献传递

玉米AGPasebt2与GPN1蛋白互作的双分子荧光互补技术研究被引量：1: 2015年; 【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-AGPasebt2、326-CYNEE-GPN1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;携带有共转化基因的烟草叶肉细胞在激光共聚焦显微镜下观察到明显的黄色荧光现象,且黄色荧光与叶绿体自发的红色荧光位置重合。【结论】AGPase-bt2与GPN1在植物细胞中真实地存在蛋白互作。; 崔喜艳赵吉元胡广宇窦瑶刘相国韩四平

NaCl和Na2C03胁迫下的高梁MAPKs基因家族表达模式: 促有丝分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是编码丝氨酸/苏氨酸特异的蛋白激酶,在植物生长发育、细胞周期调控和各种逆境胁迫信号转导过程中发挥重要的作用.碱性盐...; 窦瑶刘相国于莹陈宏宇曲昕宁王虎义张晓瑛郝东云

双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作被引量：5: 2013年; 【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生的黄色荧光信号。【结论】证实SSⅠ和PPDK1能够在植物活体细胞内发生真实的蛋白互作。; 崔喜艳张继晓窦瑶孙小杰尹悦佳刘相国

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窦瑶