王大伟
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪α干扰素和白细胞介素-2在真核细胞中表达及其表达产物活性分析
- 目的：α干扰素（interferon-α）是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤及免疫激活功能的细胞因子，白细胞介素2在抗肿瘤、免疫调节及感染性疾病的治疗中也具有重要作用，同时它还能激活B淋巴细胞，参与机体的体液免疫应答，促进抗体...
- 王大伟
- 关键词：猪白细胞介素2
- 猪白细胞介素-2在BHK-21细胞中表达及其活性分析被引量：1
- 2011年
- 为鉴定BHK-21细胞中稳定表达猪白细胞介素-2(PoIL-2)的活性,本研究利用RT-PCR技术从猪的淋巴细胞中克隆PoIL-2基因,将其连接于pcDNA3.1载体中,并转染BHK-21细胞。经过G418筛选及RT-PCR鉴定,获得稳定表达PoIL-2基因的BHK-21细胞系。采用实时定量PCR及ELISA测定PoIL-2在BHK-21细胞内的表达,同时以淋巴细胞增殖试验(MTT)检测PoIL-2蛋白活性。试验结果表明稳定整合PoIL-2基因的BHK-21细胞系其PoIL-2mRNA的转录效率是阴性对照组1.43倍,蛋白表达量是阴性对照组1.29倍。MTT试验表明真核表达的PoIL-2促淋巴细胞增殖活性与阴性对照组相比差异极显著(p<0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIL-2具有良好的生物学活性。本研究为开发新型基因工程疫苗佐剂和抗病毒制剂奠定了基础。
- 王大伟乔军张辉胡圣伟丁波陈创夫
- 关键词：猪白细胞介素2真核表达实时定量PCR
- 天山冻土产低温脂肪酶菌株的筛选及其多样性分析被引量：12
- 2011年
- 【目的】通过天山冻土细菌的分离和产低温脂肪酶菌株的筛选,了解天山冻土微生物的物种多样性和产脂肪酶菌株的系统发育多样性,为高效低温脂肪酶生物技术奠定基础。【方法】采用稀浓度的R2A、TSB平板涂布分离天山冻土中可培养细菌,通过选择性培养基筛选产低温脂肪酶的菌株。采用细菌常规生理生化实验、最适生长温度、耐盐性、产酶性能对分离菌株的生理学进行研究,通过16S rRNA基因序列分析确定产脂肪酶菌种的系统进化地位,通过BOX-PCR指纹技术对16S rRNA基因高度同源性的菌株进一步区分。【结果】分离筛选到78株可培养低温菌,选择培养基显示有17株可产低温脂肪酶,其中8株在两种选择培养基中均可产脂肪酶和酯酶。17株产酶菌分别隶属于5个系统发育类群、6个属,其中假单胞菌属(Pseudomonas)占大多数(58.9%)。【结论】天山冻土中产低温脂肪酶的细菌具有较丰富的系统发育多样性,依据生长温度,均属于耐冷菌。
- 徐宇丽王大伟史学伟郑晓吉周红刘娅倪永清
- 关键词：低温脂肪酶多样性
- 猪α干扰素在BHK-21细胞中的表达与生物活性分析被引量：2
- 2013年
- 为了构建猪α-干扰素(PoIFN-α)的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1(+)载体,并转染BHK-21细胞。通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用real-time PCR及ELISA测定PoIFN-α基因在BHK-21细胞内的表达,利用淋巴细胞增值试验(MTT)检测表达蛋白的生物学活性。结果表明:稳定整合PoIFN-α基因的BHK-21细胞系其PoIFN-αmRNA的转录效率比阴性对照组提高1.52倍,蛋白表达量显著提高1.35倍。MTT试验表明真核表达PoIFN-α淋巴细胞增值活性与阴性对照组相比差异显著(P<0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIFN-α具有良好的生物学活性,为开发新型抗病毒制剂奠定基础。
- 肖红冉王大伟贺志锐王鹏雁倪伟胡圣伟陈创夫
- 关键词：猪Α干扰素BHK-21细胞生物活性分析
