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王君玮: 作品数：248 被引量：1,102H指数：15; 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>; 发文基金：青岛市科技发展计划项目公益性行业(农业)科研专项引进国际先进农业科技计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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小反刍兽疫病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：11: 2010年; 利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)建立了小反刍兽疫病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果表明,根据小反刍兽疫病毒N基因保守区域设计的LAMP引物能够在63℃恒温下,1小时内实现目的核酸的大量扩增,由于在检测前加入荧光指示试剂,检测结果可以直接用肉眼判断,避免了由于开盖检验带来的扩增产物污染导致的假阳性。该检测体系具有较高的特异性,只能特异性地检测目的病毒,与其他同属的病毒或类似病毒等无交叉反应;具有较高的检测灵敏度,比普通RT-PCR灵敏性高10倍,与荧光RT-PCR的灵敏度相当。; 李林吴晓东包静月李金明王君玮王志亮; 关键词：小反刍兽疫病毒

过氧化物酶法现场快速鉴定病死鸡肉的有效性: 2020年; 目前对病死鸡肉的检验检疫主要依赖于感官性状和病理变化的肉眼判断,有一定的主观性,亟需现场快速鉴定病死鸡肉的技术,以有效支撑基层动物卫生监督执法。本研究针对具有现场快速鉴定潜质的过氧化物酶法,验证了室温、冷藏和冷冻3种温度下,存放不同时间健康鸡肉(120份)和病死鸡肉(60份)样品中过氧化物酶的活性。结果显示:发生积血的病死鸡肉比正常屠宰的健康鸡肉显色更明显,病死鸡肉室温和冷藏状态下,不同时间节点显色时间多集中在4~8 s,而健康鸡肉显色时间多超过35 s或不显色;冷冻条件下,过氧化物酶会发生失活,但病死鸡肉过氧化物酶显色时间总体还是在30 s以内,且3种温度下,存放不同时间的健康鸡肉与病死鸡肉样品的显色时间差异显著(P <0.01)。以显色时间等于或低于30 s作为判定病死鸡肉阳性的时间节点,发现过氧化物酶法对室温和冷藏状态鸡肉鉴定的敏感性均高于95%,特异性也在95%左右,对冷冻状态鸡肉的有效鉴定率也高于80%。可见过氧化物酶法可以用于不同温度、不同存放时间的病死鸡肉样品的现场快速有效鉴定。; 刘娜高玉斌陈姿颐赵建梅马冬王娟曲志娜王君玮赵格

猪繁殖与呼吸综合征的诊断被引量：1: 2003年; 王君玮徐天刚许立华张新云吴延功王志亮赵建梅宋芳; 关键词：繁殖与呼吸综合征发病特点临床症状剖检病变

市售猪肉中沙门氏菌耐药基因与毒力基因筛查及PFGE分型研究被引量：11: 2018年; 为了解市售猪肉中沙门氏菌耐药基因和毒力基因携带状况,以及PFGE分子分型情况,用PCR方法对分离的22株沙门氏菌携带的耐药基因和毒力基因进行检测,并运用XbaⅠ酶进行酶切后完成PFGE分析,再利用BioNumerics软件对分离菌株的指纹图谱进行聚类分析。结果显示:分离菌株对氨苄西林的耐药性最严重,耐药率为72.73%,其次是对氟苯尼考,耐药率为68.18%;在10种耐药基因检测中,共检出9种;除喹诺酮类药物外,分离菌株耐药基因与耐药表型的符合率为95%,其中88%的分离菌株携带酰胺醇类耐药基因(catI)和β-内酰胺类耐药基因(blatem-1/blapsE-1/blaCMY-1/blaoxA-1)。在14种毒力基因检测中,共检出13种;所有分离菌株均携带mgt C和bcfA毒力基因,其次是mogA、araB、stn、fimA毒力基因,携带率均为95.45%;22株沙门氏菌共分为10个群,包括8个带型,菌株相似度为60%～100%。结果表明:市售猪肉中的沙门氏菌携带多种耐药基因和毒力基因,须采取措施防止沙门氏菌污染猪肉产品。; 黄秀梅盖文燕曲志娜赵思俊李月华王玉东王君玮王娟; 关键词：沙门氏菌耐药基因毒力基因 PFGE分型

羊屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检的初步定量风险评估被引量：2: 2017年; [目的 ]评估屠宰环节布鲁氏菌病漏检对屠宰从业人员和消费环节羊肉消费者的潜在健康风险及其干预措施。[方法 ]利用屠宰环节肉品风险评估专项监测中的定量监测数据,以及文献检索数据、专家咨询和调研结果,采用@RISK软件,分析估计屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检情况下的感染人数和消费者因烹调不当发生布鲁氏菌感染的风险。[结果 ]构建了屠宰环节布鲁氏菌病漏检感染风险模型。假设接触漏检羊感染布鲁氏菌病的概率为20%,那么0.001%、0.08%、1.5%三种漏检概率可能导致的感染人数分别为0~4人、0~114人和7~1 829人(90%置信区间);不同接触感染概率的感染人数有较大差异:5%概率时每年有0~541人可能感染布鲁氏菌病;60%概率时,多数情况下有155人感染布鲁氏菌病,最多可达到6 473人。应用该模型对某省居民消费漏检布鲁氏菌病羊肉后新增布鲁氏菌病感染人数的估算结果表明:按照0.1%概率计算,该省2016年度屠宰313.25万只羊可能新增布鲁氏菌病感染病例111~148例(90%置信区间)。如果因厨房生熟不分、烹调不当等因素而使感染概率提高至1%,则可能出现1 234~1 352个新增病例。[结论 ]羊屠宰环节存在布鲁氏菌病检疫漏检现象,从业人员受布鲁氏菌病感染风险较高;消费环节存在因烹调不当而导致的布鲁氏菌病感染风险;应加强养殖环节羊群布鲁氏菌病的控制和宰前检疫,提升从业人员和消费者对布鲁氏菌病危害的认知水平。; 王君玮赵格雷宇平熊仲良盖文燕谢建华王治维李岩王玉东王娟; 关键词：布鲁氏菌病风险评估

猪肉产品中沙门菌的风险评估被引量：5: 2015年; 随着食品中毒事件的频发,人们对猪肉产品质量安全问题越来越关注。生猪屠宰由于环节较多,容易造成污染,是造成猪肉产品污染的源头。为解决这一问题,目前国外多采用风险评估(即危害识别、危害描述、暴露评估及风险特征描述)对屠宰环节中沙门菌污染的风险大小进行预测,并采取有效措施降低沙门菌污染风险。我国由于风险评估起步较晚,关于沙门菌的风险评估很少,目前也在积极开展风险评估工作。论文对生猪屠宰环节沙门菌的风险评估研究进行综述,以期为我国生猪屠宰污染严重的环节提供降低污染的有效措施,并为猪肉产品质量安全标准的制定提供科学依据。; 刘鲜鲜黄秀梅周波万思敬孙璐邹明王君玮王娟; 关键词：猪肉沙门菌风险评估

鸡腺胃型传染性支气管炎病毒山东分离株S基因的克隆及序列分析被引量：3: 2015年; 为研究3株鸡腺胃型传染性支气管炎病毒(IBV)山东分离株(青岛腺胃株QX株、东营腺胃株DY株、肥城腺胃株FC株)病毒纤突蛋白基因(S基因)的核苷酸特征,与呼吸型M41标准株及肾型IBV进行S基因核苷酸进行同源性比较。采用RT-PCR技术方法,对IBV分离株(QX、DY、FC)及标准毒株M41株S基因进行克隆和序列测定,对其中QX和DY株S基因核苷酸分别用3种方法(Clustal V method、Jotun Hein method和Clustal W method)对获得的基因核苷酸序列进行分析。结果显示,QX株和DY株的S基因核苷酸与标准毒株M41株S基因核苷酸的同源性最高为79.3%和79.2%,最小差异性为24.5%和22.3%。QX株和DY株与肾型IB分离株HD同源性最高为78.4%和78.9%,最小差异性均为22.7%。HD株与M41株的同源性最高达到80.8%。通过对S基因进化关系分析,说明腺胃型IBV山东分离株(QX、DY株)与呼吸型和肾型IBV是引起不同组织嗜性的IBV变异株,与呼吸型IBV和肾型IBV有明显的差异,是在IBV遗传变异进化过程中具有重要地位的进化阶段。; 王玉东刘俊辉郑增忍王君玮王永玲王晓燕王树双牛钟相; 关键词：传染性支气管炎病毒腺胃型 S基因

生鲜牛奶中不同类型金黄色葡萄球菌污染差异性分析被引量：2: 2015年; [目的 ]了解我国部分地区生鲜牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素的污染状况,分析产不同类型肠毒素的金黄色葡萄球菌在不同地区的流行状况。[方法 ]采集三个省共6个奶牛场及挤奶站的新鲜牛奶进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,并对分离菌肠毒素分型。[结果 ]从360份生鲜牛奶中共分离到102株金黄色葡萄球菌,分离率为28.33%;92.3%的菌株产SEA—SEJ;不同地区产各种类型肠毒素的菌株存在明显差异,湖南和内蒙分离到的产各型肠毒素菌株占比例较高。; 王娟黄秀梅崔晓娜盖文燕曲志娜王玉东赵思俊王君玮; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素毒素污染

预制小酥肉生产加工过程中沙门菌污染状况及溯源分析: 2024年; 目的对某大型食品加工厂预制小酥肉生产加工环节沙门菌的污染状况进行分析,从而提出针对性的防控措施,进而提高产品质量,保障食品安全。方法采集预制小酥肉生产加工过程肉样品103份,加工前环境样品165份,对样品中沙门菌进行定性和定量分析,并对分离的沙门菌进行血清分型与多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果肉样中沙门菌的分离率为47.6%(49/103),环境样品中沙门菌的分离率为1.2%(2/165)。51株沙门菌共分为9种血清型和9个ST型,其中,肠炎沙门菌ST11是预制小酥肉生产加工环节的优势型,并在环境中也有检出。22株肠炎沙门菌分为7个PFGE带型,相似度在92.9%以上。结论肉样中沙门菌总体污染率较高,控制原料肉中沙门菌的污染是提高产品质量的关键,产品经油炸后沙门菌污染量得到有效控制。同时要严格划分禽类与畜类产品加工仓储区域,防止食品与食品中微生物的交叉污染。; 程慧敏赵格白莉张铭洋赵建梅赵建梅张喜悦张喜悦徐莹黄秀梅刘俊辉刘俊辉; 关键词：沙门菌污染分子分型

山东省肉鸡屠宰生产链中沙门菌耐药性分析及毒力基因检测被引量：5: 2016年; 通过调查山东省不同市肉鸡屠宰生产链中沙门菌分离株血清型、耐药性及毒力相关基因,为肉鸡的健康安全生产提供数据支撑。对前期获得的233株沙门菌通过血清型快速分型试剂盒鉴定其血清型,采用最小抑菌浓度(MIC)进行13种抗菌药物的药敏试验;应用PCR技术检测位于菌株毒力岛(SPI)和毒力质粒(spv)上共15种毒力基因的携带情况。结果显示,233株沙门菌共分属25种不同的血清型,其中肠炎沙门菌、印第安纳沙门菌、汤普逊沙门菌和德尔卑沙门菌为优势血清型。233株肉鸡屠宰生产链中沙门茵对庆大霉素的耐药率最高(100%);对多西环素、氨苄西林、大观霉素、四环素、氟苯尼考和磺胺异恶唑耐药率分别为84.94%、75.73%、67.78%、56%、52%和50%。72%的菌株表现为多重耐药(≥3),产生了57种耐药谱型。沙门菌的毒力岛基因sptP、sseL、mgtC、siiE、sopB的携带率是100%,毒力基因spvA、spvB、spvC、spvD、spvR、iacP、avrA、prgK、fima和stn的检出率分别是60%、34%、49%、51%、63%、99%、38%、99%、99%和99%。结果表明,在4种优势血清型中并非均出现高耐药性,出现高耐药性的血清型主要以汤普逊沙门菌为主,汤普逊沙门菌相对于其他血清型毒力基因的携带率较高,沙门菌耐药性和毒力基因的携带间并没有明显的关联性。; 孙璐王娟黄秀梅王君玮杨瑞梅郑增忍; 关键词：沙门菌血清型耐药性毒力基因

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