王云鹏 作品数:62 被引量:76 H指数:4 供职机构: 吉林省农业科学院 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 国家科技重大专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
一种水稻叶绿体遗传转化过程中筛选条件的构建方法 本发明公开了一种水稻叶绿体遗传转化过程中筛选条件的构建方法,包括以下步骤:步骤(1)、检测筛选剂对水稻愈伤组织生长的影响;步骤(2)、抗性基因‑筛选剂组合的筛选。本发明通过筛选获得了适合于进行叶绿体转化的水稻材料,该改良... 邢少辰 王云鹏 韦正乙文献传递 玉米淀粉分支酶基因SBEⅡ b高效沉默表达载体的构建及转化表达 被引量:2 2015年 淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)是淀粉合成的限速酶。为了进一步研究SBEⅡb沉默对玉米生长及直链淀粉合成的影响,克隆了玉米(Zea mays)淀粉分支酶SBEⅡb基因片段,构建了SBEⅡb的发卡结构表达载体p TFU-SBEⅡb hairpin,用农杆菌介导法将其导入玉米HiⅡ幼胚中,经除草剂筛选获得了194株转化再生植株,其中4株结实,获得转基因种子35粒。T1代植株经PCR及试纸条检测获得3株阳性材料,半定量RT-PCR结果得出SBEⅡb的表达量降低,推断出基因表达水平降低对直链淀粉的合成具有正效应。 李楠 赵吉元 尹悦佳 柳青 郭嘉 王云鹏 刘相国 郝东云 贺红霞关键词:玉米 直链淀粉 二氧化硅纳米基因载体的制备与性能研究 被引量:1 2010年 通过溶胶—凝胶化学方法成功地制备了一种约为500nm的SiO2纳米粒子,并以多聚赖氨酸(PLL)对其进行表面修饰,修饰后的纳米粒子能够有效地与DNA结合,同时可以控制DNA的结合数量,而且能够保护DNA免受DNaseⅠ的降解作用。此二氧化硅纳米基因载体有望代替金粒子通过基因枪转化法实现外源基因在植物细胞中的遗传转化。 付玉芹 李鲁华 王丕武 吕长利 付永平 王云鹏关键词:基因载体 基因枪 植物遗传转化 抗菌肽MSI-99在烟草叶绿体中的表达及鉴定表达后的抗性方法 本发明公开了抗菌肽MSI‑99在烟草叶绿体中的表达及鉴定表达后的抗性方法,表达方法包括以下步骤:步骤(1)、载体构建;步骤(2)、烟草叶绿体转化和同质化筛选;步骤(3)、分子检测。在烟草叶绿体中表达抗菌肽MSI‑99基因... 王云鹏 李海云 刘新凤 邢少辰 韦正乙 范杰英文献传递 草甘膦耐受型5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶及编码序列 本发明公开一种草甘膦耐受型5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶多肽及编码序列,其宿主细胞可以为原核细胞、植物细胞、植物组织等,其中大肠杆菌的宿主细胞可因携带该基因而耐受浓度为1200mg/L的草甘膦。携带该酶编码序列的烟草... 邢少辰 王云鹏 林春晶 韦正乙 马建 蔡玉红 刘艳芝 孙卉转GbNPR1基因提高烟草抗病性 被引量:1 2015年 病害是造成烟草减产和品质降低的主要因素,而利用生物技术提高烟草抗病性是解决此问题的有效途径,其中包括利用与植物抗病性密切相关的关键因子如病程相关基因非表达子(non-expressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)。本研究利用源于海岛棉的Gb NPR1基因,表皮特异性启动子CUT1和组成型启动子35S构建两个植物表达载体35S-Gb NPR1和CUT1-Gb NPR1,经农杆菌介导法分别转化烟草。T0代及T1代转化植株PCR检测证明,目的基因已整合到核基因组中。T1代植株RT-PCR分析表明,Gb NPR1基因在转录水平得以表达。bar试纸条检测为阳性,证明和Gb NPR1连锁的草甘膦基因能够正常转录和翻译表达。将阳性植株进行烟草病菌赤星病、炭疽病和低头黑病等三种病害的病原菌离体接菌实验,研究结果表明:转CUT1-Gb NPR1载体的转基因烟草虽然较转35S-Gb NPR1载体的烟草对三种病菌的抗性稍低,但较野生型烟草相比具有较高抗性。转Gb NPR1基因的烟草能提高对低头黑病和炭疽病的抗性为首次报道。 王月琳 林春晶 韦正乙 王云鹏 仲晓芳 邢少辰关键词:烟草 病程相关基因 GB NPR1基因 烟草病害 农杆菌转化 抗病性 一种亚洲玉米螟田间人工接虫的介质及其制备方法和应用 本发明提供了一种亚洲玉米螟田间人工接虫的介质及其制备方法和应用,属于昆虫饲养和抗虫性鉴定技术领域。本发明提供的亚洲玉米螟田间人工接虫的介质,包括按重量份数计的如下组分:玉米粉200‑400份、多维葡萄糖100‑150份、... 武奉慈 尹俊琦 宋新元 王云鹏 王大铭 王柏凤 姜志磊文献传递 生长因子FGF10转基因本氏烟草植株的获得及其表达分析 2021年 成纤维细胞生长因子10(FGF10)具有非常重要的科研和医疗价值,但其目前有限产量难以满足市场需要,而植物生物反应器能为解决这一问题提供切实可行的途径。本研究构建了由组成型强启动子CaMV 35S驱动且人工修饰的FGF10基因植物表达载体,通过农杆菌介导法将其导入本氏烟草基因组中,利用筛选标记基因Bar进行草铵膦抗性筛选,获得413个抗性株。经PCR检测鉴定,其中398株为转基因阳性,阳性率为96.4%。通过RT-PCR和ELISA检测分析,最终筛选得到5株高表达转基因后代,其目的蛋白表达量占可溶性总蛋白的0.1%以上,表达量最高的达到0.24%,意味着利用植物生物反应器表达平台生产FGF10蛋白的可行性。这些结果表明,通过该高通量遗传转化平台可以获得具有市场应用潜力的烟草转基因种质资源,并为后续FGF10蛋白相关产品的开发提供了支撑。 张雪 张雪 王云鹏 王萌 郑大浩 郑大浩关键词:转基因植株 宏基因组中新角蛋白酶基因KerA的克隆与鉴定 2017年 皮革鞣制过程中产生大量有害物质,对环境造成了严重污染。角蛋白酶是一类水解角蛋白的酶,是皮革鞣制中理想的鞣制剂替代品。为了发掘角蛋白酶重要的基因资源,试验从土壤中克隆KerA基因,构建了原核表达载体p ET-22b-KerA,通过热激法转入BL21(DE3)中进行表达并在表达时间上进行了优化,对表达的产物进行Western-blot鉴定,通过Ni2+Sepharose Fast Flow分离纯化了KerA,并通过水解角蛋白验证其活性。结果表明:克隆的KerA基因可以在原核中表达,并具有水解角蛋白的活性。说明基因工程重组手段生产KerA具有可行性。 马建 许诺 王英哲 王云鹏 刘艳芝关键词:宏基因组 皮革鞣制 角蛋白酶 基因工程重组 一种免浸种水稻种子催芽器 本实用新型涉及农业催芽技术领域,尤其涉及一种免浸种水稻种子催芽器,包括:稻种架、电加热管、喷淋装置和装置本体;所述稻种架设置在装置本体的内部,且稻种架与装置本体通过套合方式相连接;所述水箱设置在装置本体的内部下侧,且水箱... 王云鹏 马建 邢少辰 历艳志 魏益凡 张雪 乔钰文献传递