淳于利娟
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 结核分支杆菌H_(37)Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质的研究被引量：3
- 2004年
- 以结核分支杆菌H3 7Rv基因组为模板 ,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE ,通过在大肠杆菌BL2 1(DE3) pLYS中表达 ,纯化出可溶性的重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶 (SD) .对其酶学性质测定分析表明 :在辅酶NADPH作用下该酶可催化还原 3 脱氢莽草酸生成莽草酸 ,最适pH值为 11,最适温度为 6 3℃ ,比活性 8.2 6× 10 4U/mg .Mg2 + ,Ni2 + ,Zn2 + 等金属离子及NP4 0、TritonX 10 0等变性剂对其酶活有一定的促进作用 ,而SDS则强烈抑制该酶活性 .应用圆二色仪初步测定了重组蛋白的二级结构 ,重组SD的二级结构中大约有 2 9.2 %的α螺旋 ,9.3% β折叠 ,32 .7% β转角 ,2 8.8%无规卷曲 .结核分支杆菌H3 7Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆 ,为该酶的晶体结构分析、免疫学研究及抗结核药物靶点的筛选奠定基础 .
- 于海东张雪莲王宝林雷建强曹健淳于利娟许云敏王洪海
- 结核分枝杆菌H37Rv组氨醇脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析被引量：2
- 2007年
- 以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增hisD基因,构建pET-28a-HDH重组质粒;转化重组质粒到E.coli BL21(DE3)并诱导表达,纯化可溶性的结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶(HDH),并对其性质进行研究,结果表明:重组结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶能以L-组氨醇和NAD+为底物催化L-组氨醇生成L-组氨酸;该酶的最适pH值为8.3,最适温度为45℃,比活力为1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+等对酶促反应有激活作用;底物NAD+和L-组氨醇的米氏常数分别为0.9765 mmol/L和2.755μmol/L;25℃时重组蛋白的二级结构中有20.5%的α-螺旋,40.9%β-折叠,4.2%β-转角,34.3%无规卷曲.
- 刘瑞卿金瑞良王虹军徐胜凤曹健淳于利娟许云敏王洪海
- 关键词：结核分枝杆菌NADH
- 结核分枝杆菌耐药机理的比较蛋白质组研究
- 结核病仍然是全球人类健康的威胁。全球人口的1/3约20亿人感染过结核分枝杆菌,每年300万人死于结核病,死于结核病的人数是其他传染病死亡人数的总和,因此,世界卫生组织在1993和1997年两度发出警告。今年3月,我国卫生...
- 谢建平乐军刘蓓张芹淳于利娟凡惠芝王洪海
- 文献传递
- 结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株间细胞壁蛋白质组双向电泳图谱比较被引量：6
- 2003年
- 利用双向电泳技术可以对体外培养的结核分枝杆菌非耐药型菌株和耐药型菌株进行细胞壁蛋白质组学比较,寻找与耐药相关的蛋白质.结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株在Middlebrook7H9Broth培养基中37℃摇床培养1个月后,从培养物中提取结核分枝杆菌细胞壁蛋白.以pH4～7的IPG预制胶条为第一向等电聚焦,以SDS PAGE为双向电泳第二向,经过银氨染色,图像扫描后,利用软件分析处理图像.在结核分枝杆菌H37Rv株和耐异烟肼菌株的细胞壁蛋白质凝胶图谱中分别检测出499和582个蛋白质斑点.它们的蛋白质分子质量分布基本相似,其中有102个斑点差异显著.这为研究耐异烟肼菌株的耐药机制提供了蛋白质组学方面的信息.
- 刘蓓乐军淳于利娟陈永青王洪海
- 关键词：结核杆菌双向电泳蛋白质组
