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三疣梭子蟹FAMeT基因克隆及其在蜕皮周期中的表达水平被引量：12: 2013年; 为了研究法尼酸甲基转移酶(FAMeT)在甲壳动物蜕皮调控中的作用,采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆得到了三疣梭子蟹FAMeT的全长cDNA序列(GenBank登录号:KC192659),它包括一个201 bp的5'非编码区、一个318 bp的3'非编码区和一个825 bp的开放阅读框(ORF),编码274个氨基酸;推导的氨基酸序列与已公布的其他甲壳动物FAMeT进行比对,发现一致性达75%～97%,其中与远海梭子蟹FAMeT的一致性最高;而且该氨基酸序列由两个CF(CPAMD8/FAMeT)区域组成,这两个CF区域是FAMeT的标志,在所有甲壳动物的FAMeT里均有发现,因此推导的氨基酸序列是三疣梭子蟹FAMeT基因。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法分析了其在不同组织中、不同蜕皮周期中的表达量变化,发现FAMeT在三疣梭子蟹的各个组织里均有表达,且在胸神经节里表达最强;在三疣梭子蟹蜕皮过程中,大颚器中FAMeT在D1期表达最强,然后逐渐下降至D4最低。该结果表明FAMeT在三疣梭子蟹蜕皮调控中起着重要的作用。; 谢熙朱冬发崔晓雨汤洁邱锡尔; 关键词：三疣梭子蟹克隆

三疣梭子蟹EcR与RXR基因克隆及在蜕皮过程中的表达分析: 为了研究蜕皮激素受体(EcR)和维甲酸X受体(RXR)在甲壳动物蜕皮过程中的作用,采用反转录PCR (RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆得到三疣梭子蟹Portunus trituberculatu...; 崔晓雨汤洁朱冬发; 关键词：三疣梭子蟹维甲酸X受体

三疣梭子蟹RXR基因在蜕皮和卵巢发育过程中的表达分析: 为了研究维甲酸类X受体/(RXR/)基因在甲壳动物蜕皮和卵巢发育中的作用，本研究首先通过反转录PCR /(RT-PCR/)和cDNA末端快速扩增/(RACE/)克隆获得三疣梭子蟹/(Portunus tritubercu...; 汤洁; 关键词：三疣梭子蟹 RXR 蜕皮卵巢发育; 文献传递

甲基法尼酯在甲壳动物中的生理作用及其机制的研究进展被引量：7: 2015年; 甲基法尼酯是一种类倍半萜烯激素,与昆虫的保幼激素在结构和功能上相似,是重要的内分泌调控因子。MF与甲壳动物的蜕皮、形态建成、渗透压调节、卵巢发育等生理活动的调控密切相关。主要就甲基法尼酯在甲壳动物中的生理功能、分子作用机制及其合成代谢等方面的研究进展进行综述,为进一步深入探讨甲基法尼酯的作用机制和解决虾蟹类养殖实践中的性早熟与亲本发育不良等难题奠定基础。; 邱锡尔朱冬发汤洁崔晓雨周彦琦柳志业; 关键词：生理功能甲壳动物

日本蟳高血糖激素基因的克隆与表达分析被引量：1: 2014年; 通过RACE技术克隆获得日本蟳Charybdis japonica高血糖激素基因（CjCHH）全长cDNA序列;运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析该基因的组织差异性表达;利用原核表达技术获得CjCHH重组蛋白。序列分析表明：CjCHH cDNA全长1754 bp,包含111bp的5’末端非编码区（UTR）,423 bp的开放阅读框（ORF）,以及1236 bp的3’UTR,该基因可编码140个氨基酸。序列比对结果显示：CjCHH的成熟肽序列与其它甲壳动物CHH的一致性为41%~88%。系统进化树显示：CjCHH与其它梭子蟹科的CHH聚在一起,这与日本蟳所处的分类地位一致。组织差异性表达研究显示：CjCHH在检测的10个组织中均有表达,其中眼柄中表达量最高,肠和Y-器次之,其余组织表达量较低。成功构建了CjCHH重组表达质粒pET-CHH,并在大肠杆菌（Escherichia coli）中获得了高效表达,重组蛋白的相对分子量约11 kDa,与预测的相对分子质量大小相一致,表达水平在5 h的IPTG诱导过程中呈现上升趋势。; 汤洁朱冬发崔晓雨谢熙邱锡尔; 关键词：日本蟳 CDNA克隆原核表达

三疣梭子蟹HMGR基因的克隆及其在蜕皮中的表达分析被引量：5: 2014年; 为了研究3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A reductase,HMGR)在甲壳动物蜕皮调控中的作用,采用RT-PCR和c DNA末端快速扩增技术(RACE),克隆得到三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)HMGR基因的c DNA序列(Gen Bank登录号:KF280756)。该序列全长2575bp,包括一个53bp的5′端非编码区,一个686bp的3′端非编码区和一个长度为1836bp的开放阅读框,编码611个氨基酸。该氨基酸序列与已公布的美洲海鳌虾HMGR氨基酸序列相比一致性达65%,具有Ⅰ型HMGR保守催化区域、两个HMG-Co A结合基序和两个NADP(H)结合基序。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,分析三疣梭子蟹HMGR基因的组织差异表达及在蜕皮周期中的表达水平变化,结果表明HMGR基因在三疣梭子蟹大颚器(MO)中的表达量最高,在其它组织中表达量均极低;在三疣梭子蟹蜕皮周期中,大颚器中HMGR基因的表达量自A期至D0亚期升至最高,然后下降,至D4亚期最低。验证了大颚器是三疣梭子蟹合成甲基法尼酯的唯一器官,表明HMGR在三疣梭子蟹蜕皮调控中起着重要作用。; 邱锡尔朱冬发崔晓雨汤洁谢熙; 关键词：三疣梭子蟹基因克隆

三疣梭子蟹EcR基因的克隆及表达分析被引量：9: 2013年; 为研究蜕皮激素受体（EcR）在甲壳动物生长和生殖过程中的作用，采用反转录PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术，克隆了三疣梭子蟹蜕皮激素受体（PtEcR）基因全长cDNA序列（GenBank登录号：KC354381），运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法，分析该基因在不同组织、蜕皮时期和二次卵巢发育阶段的表达特征。结果表明，PtEcRcDNA全长2231bp，包含1269bpORF，编码422个氨基酸；推导的PtEcR氨基酸序列与已公布的其他甲壳动物EcR进行比对，发现一致性达67％-97％；系统进化树分析PtEcR与其它甲壳动物EcR聚为一支，而昆虫EcR聚为另一支。PtEcR在检测的三疣梭子蟹10个组织中均有表达，其中在Y-器（YO）表达量最高。在蜕皮周期中，自蜕皮后期至蜕皮前期D2亚期PtEcR在YO中的表达量一直较低；至D3亚期和D4亚期，PtEcR表达量显著升高，这与血淋巴中20-羟基蜕皮酮（20E）浓度在D3／D4亚期显著升高相协同，表明PtEcR在三疣梭子蟹蜕皮过程中起着重要的作用。二次卵巢发育阶段，ptEcR在YO和肝胰腺（Hp）中的表达量自Ⅱ期逐渐升高至Ⅳ期达到最高；卵巢（Ov）中，则在Ⅰ、Ⅲ期较低，Ⅱ、Ⅳ期较高，表明PtEcR可能参与卵巢发育和卵黄发生。; 崔晓雨朱冬发汤洁谢熙邱锡尔; 关键词：三疣梭子蟹

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汤洁