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杨克俭
作品数:
7
被引量:9
H指数:2
供职机构:
中国预防医学科学院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
朱既明
中国预防医学科学院
阮力
中国预防医学科学院
朱诚
中国预防医学科学院
徐水婵
中国预防医学科学院
陆柔剑
中国预防医学科学院
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作者
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2篇
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1篇
1997
2篇
1996
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7
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麻疹病毒L4株血凝素基因
麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因,发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同,并导...
阮力
朱既明
杨克俭
徐水婵
朱诚
文献传递
麻疹病毒L4株血凝素基因
麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因,发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同,并导...
阮力
朱既明
杨克俭
徐水婵
朱诚
文献传递
麻疹病毒血凝素基因助融合(Fusion helper)活性区的定位
1997年
在利用PCR方法克隆麻疹病毒L4株血凝素(HA)基因的过程中,获得了一个助融合活性丢失的B号克隆。其氨基酸序列与具有助融合活性的A号克隆相比,有4个位点不同,分别位于96、117、148及543位。通过基因间部分序列的交换及定点回复突变,获得了相应位点的突变体。对这些突变体的助融合活性研究发现,117、148及543位氨基酸的改变不影响助融合活性,而当96位脯氨酸定点回复突变为亮氨酸后,B克隆血凝素蛋白获得了助融合活性。提示HA蛋白96位氨基酸是影响助融合活性的一个重要氨基酸。
杨克俭
阮力
孙朝辉
陆柔剑
朱既明
关键词:
麻疹病毒
血凝素
基因
麻疹病毒L4株融合蛋白基因
麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血溶活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了融合蛋白F基因,发现该基因的DNA序列中有七个碱基与文献报道的Edmonston株融合蛋白F基因的DNA序列不同,并导致这两种毒株的融合...
阮力
朱既明
杨克俭
徐水婵
朱诚
文献传递
麻疹病毒L4株融合蛋白基因
麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血溶活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了融合蛋白F基因,发现该基因的DNA序列中有七个碱基与文献报道的Edmonston株融合蛋白F基因的DNA序列不同,并导致这两种毒株的融合...
阮力
朱既明
杨克俭
徐水婵
朱诚
文献传递
同时表达麻疹病毒L4株HA和F蛋白及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株的构建
被引量:8
1996年
构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。HA分子有糖化的79kD和非糖化的田kD两种形式;F分子以60kD的前体F0、43kD的F1和18kD的F2三种形式存在。表达产物的血凝效价为1:8,血溶活性OD540的测定结果是O37。该重组病毒免疫新西兰白兔及C57小鼠,可以产生抗麻诊病毒HA和F蛋白的特异性ELISA(1:644~1600)、血凝抑制(1:256~512)、血溶抑制(1:80~160)和NT(1:640)抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应,明显低于只表达IL2的重组痘苗病毒疫苗株RVJ123,表现为兔皮肤红肿范围小,持续时间短,皮肤无坏死;裸鼠毒力的结果,表现出RVJMLHAFKIL2病毒只存留于接种局部,而且滴度大大降低,未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。
杨克俭
阮力
朱诚
孙朝辉
陆柔剑
徐水婵
朱既明
关键词:
麻疹病毒
白细胞介素
重组痘苗病毒
麻疹病毒L4株血凝素基因的克隆与表达及免疫原性
被引量:2
1996年
从部分减毒的麻疹病毒L4株感染的Vero细胞中提取mRNA、进行逆转录及PCR扩增。克隆到了长1.9kb的4个血凝素基因克隆。DNA序列分析发现,L4株的血凝素基因有4个碱基与Edmonston株不一致,造成3个氨基酸差异。这4个克隆在重组痘苗中表达后,3个克隆的表达产物均表现出良好的血凝活性、助融合活性(Fusionhelper)和较强的免疫原性。表达血凝素分子量分别为未糖化的68kD以及糖化的79kD分子,免疫的兔血清显示出较高的ELISA(1:800)~1:3200)、HI(1:160-:1:1280)、HLI(1:160~1:640)及NT(1:100~1:486)滴度。麻疹病毒LA株的血凝素基因的克隆为麻疹重组疫苗的研究提供了重要材料。
杨克俭
阮力
陆柔剑
孙朝晖
朱诚
朱既明
关键词:
麻疹病毒
基因表达
免疫原性
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