李庆华
- 作品数：45 被引量：87H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学艺术更多>>
- 沉默SIRT2基因对急性粒细胞白血病细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 SIRT2是组蛋白去乙酰化酶家族成员之一,其参与多种肿瘤的发生和发展。本研究旨在探讨SIRT2基因在人急性粒细胞白血病细胞NB4和耐药细胞HL60/A增殖中的作用,分析SIRT2对于细胞周期的影响,寻找治疗急性粒细胞白血病的新靶点。方法 蛋白质印迹法检测SIRT2在急性粒细胞白血病细胞HL60/A和NB4中的表达,针对SIRT2mRNA不同的靶序列设计并合成shRNA,构建真核表达干扰载体,制备慢病毒并感染HL60/A和NB4细胞,用嘌呤霉素筛选出稳定表达shRNA的细胞,应用蛋白质印迹法验证干扰效率;采用改良MTT法检测沉默SIRT2基因前后HL60/A和NB4细胞增殖的改变;用流式细胞术检测沉默SIRT2基因前后细胞周期的变化。结果 在HL60/A和NB4细胞中SIRT2蛋白表达水平均增高,F=43.22,P=0.002。用慢病毒感染HL60/A（F=184.9,P〈0.001）和NB4（F=354.7,P〈0.001）后,SIRT2基因的蛋白表达水平显著降低。MTT结果显示,与对照组细胞比较,48h沉默SIRT2基因的HL60/A（F=208.4,P〈0.001）和NB4（F=27.58,P〈0.001）细胞的生长速度变慢;于72h这种抑制作用更加明显,其中HL60/A的增殖速度明显变慢,F=555.9,P〈0.001。流式细胞术检测细胞周期结果显示,G0～G1期百分比,与对照组HL60/A/con（27.62±1.01）%相比,干扰组HL60/A/sh1（37.14±0.03）%（F=7.61,P〈0.001）和HL60/sh2（37.51±3.63）%（F=3.89,P=0.009）比例显著增加;与对照组NB4/con（27.49±0.50）%相比,干扰组NB4/sh1（38.26±1.93）%（F=8.02,P=0.007）和NB4/sh2（35.23±1.11）%（F=3.50,P〈0.001）比例显著增加;S期细胞百分比,与对照组HL60/A/con（51.94±1.15）%相比,干扰组HL60/A/sh1（40.24±0.66）%（F=3.34,P〈0.001）和HL60/sh2（42.73±2.76）%（F=10.33,P=0.004）比例显著降低;与对照组NB4/con（50.65±0.23）%相比,干扰组NB4/sh1（39.58±1.11）%（F=3.02,P〈0.001）和NB4/sh2（43.82±1.33）%（F=10.42,P=0.011）比例显著降低;G2～M期细胞比例无明显变化。结论 干扰S
- 陈龙许华李元叶王齐程晶莹李庆华庞天翔
- 关键词：SHRNA干扰急性粒细胞白血病NB4细胞增殖
- NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究
- 目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC ...
- 许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔
- Cariporide对肿瘤细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨特异性抑制剂Cariporide通过抑制钠氢离子交换蛋白1(NHE1)功能而阻止肿瘤细胞增殖的机制。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Cariporide对细胞增殖的抑制率,共聚焦荧光显微镜测算双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)的荧光强度,检验其下调细胞内pH值,ELISA试剂盒测定其对体外培养细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,观测其对动物体内肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果:随着Cariporide的剂量增加或作用时间延长,HeLa细胞内pH值逐渐降低,肿瘤细胞表达VEGF减少。伴随着细胞内pH值降低,VEGF分泌水平逐渐下降,两者之间呈显著相关性(P<0.05)。另外,Cariporide能抑制动物体内的肿瘤增殖。结论:Cariporide能够减少肿瘤细胞表达和分泌VEGF,抑制动物体内肿瘤增殖。
- 李庆华庞天翔马丽李彬芦颖李洪强茹永新袁文肃
- 关键词：血管内皮生长因子类氢离子浓度肿瘤细胞增殖
- NGAL对K562细胞内Rh123累积的影响
- 通过下调中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)的表达,研究其对白血病细胞系K562细胞内荧光染料罗丹明(Rh123)累积的影响,探讨...
- 张洪菊马丽李庆华庞天翔王立洪李华文蔺亚妮金薇娜高伟常国强王建张玉娟
- 关键词：K562细胞多药耐药性中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白
- 文献传递
- 移植前白血病患者HLA区域杂合性缺失对HLA分型的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:研究移植前白血病患者初诊时期和缓解期HLA区域杂合性缺失(LOH)对HLA分型的影响。方法:用3种HLA基因分型常用的方法(SBT、SSO和SSP方法)分别对1例急性混合细胞白血病(MPAL)患者初诊静脉血样本1(骨髓原始细胞为81.7%)、样本2(骨髓原始细胞为93.07%)和缓解期静脉血样本3(骨髓原始细胞为<0.01%)进行HLA-A、B、C、DQB1、DRB1基因分型;通过2种DNA混合实验进一步确定SBT方法检测HLA杂合峰的检出阈值和检测HLA分型时对静脉血原始细胞比例的要求。结果:样本1和样本2的HLA-A、B、C、DQB1、DRB1均为纯合位点,其中样本1有些HLA位点的测序背景峰偏高,无法确定位点的具体结果;样本3的5个HLA座位除了C座位外均为杂合位点。DNA混合实验结果表明,用SBT方法检测HLA双等位基因杂合峰的最低检出限为20%;移植前白血病患者采用SBT方法检测HLA分型的要求是静脉血原始细胞<75%,若≥75%,则可能因为原始细胞HLA区域出现LOH,从而导致HLA位点漏检。结论:对于白血病初诊患者,特别是原始细胞≥75%,如果HLA某一位点分型结果为纯合位点,应该再次采集患者缓解期静脉血或者正常体细胞,如口腔黏膜细胞,重新对该位点进行复核,排除HLA区域发生LOH造成假性纯合的可能,以免HLA配型结果发生错误,影响移植供者的选择和最终的移植效果。
- 赵佳炜王继英张岩李庆华汝昆王晓静
- 关键词：HLA分型杂合性缺失白血病造血干细胞移植
- Cariporide影响肿瘤细胞增殖和表达血管内皮生长因子
- 目的：血管内皮生长因子(VEGF,Vascular Endothelial Growth Factor)是关键的促血管形成因子,在肿瘤增殖过程中起着重要的作用。Cari- poride 是新的 NHE1特异性抑制剂。钠氢...
- 马丽芦颖庞天翔李庆华李彬袁文肃
- 文献传递
- 在血清饥饿条件下CHP2调节NHE1活性减少细胞死亡被引量：4
- 2005年
- 钠氢离子交换蛋白(NHE)是维持细胞内pH值等内环境稳定的重要蛋白;钙调磷酸酶B同源蛋白(CHP)是NHE的一个活性调节亚单位。研究CHP2对NHE1的调节作用时发现,在血清饥饿的条件下,PS120细胞依赖于CHP2的表达来调节外源性NHE1的活性,使细胞维持必要的钠氢交换生理活性和较高水平的细胞内pH值(pHi7.4),明显减少细胞因自身的胞浆酸性化而死亡,延长细胞存活时间(70%以上的细胞存活时间超过7天)。实验结果提示,通过研究减少CHP2表达或抑制其活性,可望找到加速细胞死亡的新方法。
- 李庆华庞天翔袁文肃韩忠朝
- 关键词：血清蛋白活性细胞死亡
- 钠氢交换蛋白基本活性亚单位相关的癌基因诊断研究
- 庞天翔李庆华李克李妍涵刘斌张磊马丽李彬
- 证明钠氢交换蛋白影响癌细胞生长、分化、移动、凋亡，它的基本活性亚单位(CHP)是生理活性的必要部分，其中亚型2被特异性表达在一些癌细胞，表达量与爱的恶性程度呈正相关。
- 关键词：
- 关键词：基因诊断钠氢交换蛋白
- 沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖
- 目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体...
- 王齐王迟鹃李元叶许华李庆华庞天翔
- 含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA/1小鼠模型的治疗作用。方法将40只6周龄雄性DBA/1小鼠随机分为4组:未处理的空白对照组(Nor组)、诱导发病并注射甲氨蝶呤药物的甲氨蝶呤治疗组(MTX组)、诱导发病并注射含笑内酯的实验组(MCL组)和诱导发病并注射DMSO的模型对照组(Con组),用牛Ⅱ型胶原法诱导MTX、Con和MCL组小鼠发病建立类风湿关节炎模型;在二次免疫注射24 h后开始隔天腹腔注射给药并对小鼠体重和关节炎发病情况进行隔天观察,给药28次后停止用药,眼球取血、蛋白芯片测血清中细胞因子,处死小鼠取爪子及膝盖做组织病理学检查。结果成功构建了DBA/1小鼠类风湿关节炎模型;各组小鼠之间体重差异无统计学意义(P>0.05);关节炎评价显示MCL组低于Con组(P<0.01),高于MTX组(P<0.01);病理结果显示Nor组小鼠组织正常,Con组受累关节出现炎症细胞浸润、滑膜增生、炎性肉芽组织形成、坏死组织等症状,MCL组与MTX组受累关节仅出现轻于Con组的炎症细胞侵润、滑膜增生等症状;小鼠血清细胞因子检测结果共显示出6种细胞因子:C5/C5a、TIMP-1、M-CSF、sICAM-1、IFN-γ和BLC;Con组的类风湿关节炎小鼠中C5/C5a、TIMP-1和M-CSF表达量降低,经含笑内酯治疗的MCL组中这些因子均有不同程度的恢复(P<0.01),仅仅在MCL组中检测到BLC表达。结论含笑内酯对小鼠DBA/1类风湿关节炎具有治疗作用,C5/C5a、TIMP-1、M-CSF和BLC等因子在这一过程发挥不同的作用。
- 许华王建王迟鹃张丽媛常国强蔺亚妮张洪菊张玉娟张海瑞李庆华庞天翔
- 关键词：DBA
