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北京油鸡β-防御素-7基因原核表达质粒的构建及表达: 2010年; 为了研究β-防御素-7基因在大肠杆菌中的原核表达,试验以pGEM-T-GAL-7为模板,经PCR扩增GAL-7基因的编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转化E.coliDH5α并在E.coliBL21(DE3)中诱导表达,并对目的蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定。结果表明:重组质粒pGEX-4T-1-GAL-7经PCR及酶切测序鉴定,证明质粒构建正确;重组质粒经诱导表达后,可表达出分子质量约为33ku的GAL-7蛋白;表达产物以融合蛋白形式存在,在37℃条件下诱导4h表达量最高,最佳的诱导浓度为0.1mmol/L。; 朱超冯宝刚陈献伟张明关伟军; 关键词：Β-防御素克隆原核表达

基因组文库的构建和池化筛选被引量：3: 2010年; 作为物种保护策略的重要部分,建立濒危畜禽的基因组文库,可有效保存濒危畜禽种质资源。BAC(bacterialartificial chromosome)文库具有高容量、遗传特性稳定和嵌合体少等优点,因而被用于畜禽基因组文库的构建。对BAC文库的构建方法和文库池化筛选系统作一综述。; 陈献伟娜日苏朱超王会雷娜高剑峰关伟军马月辉; 关键词：基因组文库

小尾寒羊耳缘组织的cDNA文库及其构建方法: 本发明涉及小尾寒羊耳缘组织cDNA文库以及其构建方法，其中利用小尾寒羊耳缘组织作为材料，通过提取总RNA、合成双链cDNA、蛋白酶K消化、Sfi 1酶切并连接入载体、λ噬菌体的包装，最终获得高滴度、高重组率、插入片段范围...; 关伟军马月辉朱超侯玲玲何晓红浦亚斌赵倩君陈献伟雷娜; 文献传递

基因打靶技术在乳腺生物反应器中的应用被引量：2: 2009年; 利用转基因动物的乳腺生产人类重组蛋白,可以获得安全而有效的药用蛋白。目前采用的转基因技术由于其固有的局限性,未能使乳腺生物反应器的研究取得长足的进步。基因打靶克服了随机整合的盲目性和危险性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。简述了制备乳腺生物反应器过程中靶细胞、基因打靶的策略、打靶位点及问题,并对其发展方向进行了小结及展望。; 朱超冯宝刚张明关伟军马月辉; 关键词：基因打靶乳腺生物反应器

中国斗鸡DJ-1基因克隆与原核、真核表达研究被引量：4: 2010年; 本研究以中国斗鸡λ噬菌体cDNA文库为模板,克隆了DJ-1基因,并构建了pGEX-4T-1-DJ-1原核表达载体和pEGFP-N3-DJ-1真核表达载体,前者用来研究DJ-1蛋白在大肠杆菌表达系统中的优化表达;后者用来转染成纤维细胞系,研究DJ-1蛋白的亚细胞定位和建立转DJ-1基因的细胞模型。试验成功克隆了DJ-1基因的CDS区,并将其定向插入到pGEX-4T-1原核表达载体和pEGFP-N3真核表达载体中。IPTG浓度梯度诱导原核表达结果显示,在0.8mmol/L时DJ-1蛋白表达量最高;时间梯度结果显示,在8h时DJ-1蛋白表达量最高;真核表达载体转染脂尾羊成纤维细胞后48h阳性率最高,DJ-1蛋白在细胞核和胞质中均有表达,但胞质中居多。上述结果表明,本试验已经建立了稳定的DJ-1蛋白的真核、原核优化的表达系统,为进一步研究DJ-1基因的功能奠定了基础。; 冯宝刚朱超王会武珅娜日苏卢晟盛关伟军; 关键词：中国斗鸡 DJ-1 真核表达原核表达

转基因猪异种器官移植应用前景被引量：1: 2009年; 转基因猪能为人类提供可移植的异种器官,解决移植器官短缺的问题。但是,异种移植后产生的免疫排斥反应,主要包括超急性排斥反应和迟发性排斥反应,它们最终将导致移植物的致命损伤,是限制异种器官广泛应用的最大障碍。最近的一些研究,在克服免疫排斥方面已经取得了可喜的成果。作为异种器官供体,猪携带的内源性逆转录病毒也可能对人体产生潜在的威胁。迄今,还没有研究证明其不会感染人类机体。本文针对异种器官移植后的免疫排斥发生的机理,克服免疫排斥的方法以及逆转录病毒的潜在感染等方面进行了综述和讨论。; 冯宝刚朱超卢晟盛关伟军马月辉; 关键词：转基因异种移植内源性逆转录病毒

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朱超