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方唯意: 作品数：64 被引量：195H指数：7; 供职机构：南方医科大学基础医学院肿瘤研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学社会学更多>>

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子宫内膜癌I型和II型全基因表达谱初步分析被引量：2: 2006年; 目的分析子宫内膜癌I型和II型全基因表达谱。方法利用6张Affymetrix全基因组基因芯片,分析两者之间在表达谱上的差异,结合生物信息分析。结果许多基因明显在雌激素依赖型子宫内膜癌中高表达,其中,一些基因涉及了雌激素依赖型中雌激素的代谢与转化,另外一些基因可能为雌激素调节基因。CYP2C9参与了雌激素酮硫酸盐转化为16-羟基硫酸盐代谢;DDC能与类固醇受体结合,增强类固醇受体的转录活性。结论某些基因在雌激素依赖型子宫内膜癌中高表达,为进一步研究此类基因在子宫内膜癌发病过程的作用及预后奠定了基础。; 郭遂群邢福祺庞占军方唯意刘国炳; 关键词：子宫内膜肿瘤基因芯片生物信息分析

siRNA靶向稳定干扰HDGF基因胃癌细胞株的建立: 2009年; 目的构建针对肝癌衍生生长因子(HDGF)基因的siRNA表达载体,建立稳定干扰HDGF表达的胃癌细胞株。方法常规聚合酶链反应(PCR)检测HDGF基因在胃癌SGC-7901细胞株的表达情况。构建重组靶向HDGF shRNA慢病毒表达质粒pLentiU6/HDGFshRNA,用脂质体转染的方法将载体导入胃癌细胞株。经杀稻瘟菌素筛选后,建立稳定表达siRNA的细胞株。荧光定量PCR检测干扰效率。结果在胃癌SGC-7901细胞株中,HDGF显示高表达。测序验证pLentiU6/HDGFshRNA重组质粒构建成功;在将干扰表达质粒稳定转染入胃癌细胞株后能明显抑制HDGF mRNA表达水平。结论成功构建了pLentiU6/HDGFshRNA慢病毒重组质粒,建立了稳定靶向干扰HDGF表达的siRNA胃癌细胞株。; 欧文胜方唯意王建; 关键词：SIRNA 胃癌细胞

血管基膜衍生多功能肽基因克隆、表达及空间构象分析被引量：11: 2003年; 目的 :构建血管基膜衍生多功能肽克隆和原核表达载体 ,并对血管基膜衍生多功能肽氨基酸序列进行空间结构分析预测。方法 :用人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的 2个功能区片段 ,即血管基膜衍生多功能肽 (VB MDMP) ,利用合成的 3条长引物片段 ,进行PCR扩增。克隆到 pUC19载体 ,酶切和测序鉴定。亚克隆构建原核表达载体pGEX 4T 1 VBMDMP ,IPTG诱导表达 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达产物。用GlutathioneSepharose 4B层析柱进行了亲和层析鉴定。将VBMDMP序列输入计算机 ,利用Antheprot软件分析。结果 :血管基膜衍生多功能肽 (VBMDMP)基因经限制性内切酶酶切和测序鉴定 ,其大小和核苷酸序列正确 ,与设计完全一致。获得了原核表达融合蛋白GST VBMDMP。Anthep rot分析显示 ,人IgG3上游铰链区连接后的Tumstatin的 2个功能区域能自由伸展。结论 :成功构建了血管基膜衍生多功能肽克隆和原核表达载体 ,并对其进行了空间结构分析。; 彭淑平方唯意戴文建邹小青刘红英石书红曹建国; 关键词：血管基底膜衍生肽 TUMSTATIN 原核表达空间构象

miR-494对肺癌细胞株A549及SPCA1生长及侵袭的抑制作用被引量：5: 2013年; 目的探讨miR-494对肺癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法利用化学合成的miR-494mimics转染A549及SPCA1肺癌细胞株,通过MTT、Transwell小室迁移实验、Boyden小室侵袭实验等观察过表达miR-494后细胞迁移、侵袭能力及生长的变化;利用Western blot检测细胞周期、上皮间叶转变(EMT)标志物相关蛋白。结果 MTT法显示,与对照组比较,过表达miR-494组细胞生长速度减慢,差异有统计学意义(P<0.001)。Transwell及Boyden实验显示过表达组细胞穿过聚碳酸酯膜的数量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。Western blot结果显示,与对照组比较,过表达miR-494的A549和SPCA1细胞中,CCND1、N-CA、VIMENTIN表达下调。结论miR-494可能通过下调CCND1、VIMENTIN、N-CA对肺癌细胞株A549及SPCA1的增殖、迁移及侵袭起到抑制作用。; 麦春平陈衍姚开泰刘真方唯意; 关键词：肺癌

佛波醇脂和溴脱氧尿嘧啶核苷促进鼻咽癌细胞中CD133的表达被引量：1: 2010年; 目的:了解促癌剂佛波醇酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)和非放射性标记物溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)对鼻咽癌细胞5-8F中CD133表达的影响。方法:BrdU、TPA单独作用和Brdu+TPA联合作用处理鼻咽癌细胞株5-8F,不同药物处理组细胞采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)及Western印迹法检测CD133基因mRNA和蛋白水平的表达,FCM法分离并观察CD133+细胞含量的变化,Boyden小室侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:与未处理组细胞相比,BrdU单独作用组和BrdU+TPA联合作用组细胞的CD133 mRNA表达量都有不同程度升高(P值分别为0.037和0.003),TPA单独作用组的CD133 mRNA表达量则降低;Western印迹法检测结果提示,3组药物处理组细胞CD133蛋白的表达量均增高;FCM法检测结果显示,CD133+细胞的含量增加;细胞侵袭能力增强,以BrdU+TPA联合作用组效果最显著。结论:在鼻咽癌细胞中,TPA和BrdU均能提高CD133蛋白的表达,并且有相互协同作用。; 江庆萍方唯意姚开泰; 关键词：鼻咽肿瘤佛波醇酯类溴脱氧尿苷 CD133

miR-340通过下调CCND1表达增加结直肠癌细胞对5-Fu的耐药被引量：6: 2017年; 目的:探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的编码基因CCND1 miR-340介导的逆转结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药的机制。方法:采用瞬时转染技术将结直肠癌细胞HCT116、SW480株分别转染si-CCND1和miR340-mimic。应用MTT法检测转染后的结直肠癌细胞对5-Fu敏感性的变化,应用双荧光素酶试验验证CCND1对miR340参与的影响结直肠癌细胞对5-Fu敏感性的影响。结果:瞬时转染si CCND1和过表达miR-340后,结直肠癌HCT116和SW480细胞的IC50值均显著低于对照组(10,10 vs 20μmol/L和20,20 vs 40μmol/L,均P<0.05)。共转染CCND1 3'UTR野生质粒和miR-340 inhibitor的结直肠癌HCT116和SW48细胞荧光素酶的活性显著高于共转染空载体和mimic细胞(P<0.01)。结论:CCND1作为不良因子通过抑制miR340的表达进而发挥增加结直肠癌细胞对5-Fu耐药的作用。; 姜靖雯陈学武方唯意罗荣城; 关键词：细胞周期蛋白D1 结直肠癌 5-氟尿嘧啶化疗耐药

全基因组微阵列筛选候选雌激素非依赖型子宫内膜癌恶性标志物: 2007年; 目的明确非雌激素依赖型(Ⅱ型)和雌激素依赖型(Ⅰ型)子宫内膜癌在基因表达上的差异,找寻非雌激素依赖型子宫内膜癌的恶性标志物。方法利用全基因组Affymetrix基因芯片技术对2003年10月至2005年10月南方医科大学南方医院妇产科收治的3例雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)阳性及3例ER和PR阴性子宫内膜癌患者的子宫内膜癌标本进行研究,检测FOSB、NTRK2、JUN等基因在非雌激素依赖型中的表达情况,结合生物信息学分析,并采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证结果。结果在非雌激素依赖型子宫内膜癌中FOSB、NTRK2和JUN基因明显高表达。结论FOSB、NTRK2和JUN基因或许可以作为非雌激素依赖型子宫内膜癌的恶性标志物。; 郭遂群方唯意庞战军刘国炳周宏珍邢福祺; 关键词：子宫内膜癌生物标志物

10种ABC转运蛋白在鼻咽癌顺铂耐药细胞系中的表达被引量：2: 2009年; 为研究鼻咽癌细胞CNE2中顺铂耐药与10种ABC转运蛋白的关系,分别用顺铂、顺铂+5-氟脲嘧啶来诱导CNE2耐药,在脱药培养2个月后通过MTT法测定细胞的生长曲线及其与顺铂的量效关系和耐药指数,同时,通过荧光定量PCR法检测耐药细胞与敏感细胞中10种ABC转运蛋白mRNA表达的差异,并通过免疫细胞化学法验证.MTT法结果提示,成功诱导出两株分别对顺铂、顺铂+5-氟脲嘧啶耐药的细胞株(分别命名为CNE2/DDP、CNE2/DDP+5Fu),耐药指数分别为2.58和5.31,ABCC2在两株耐药细胞株中表达均上调,分别为2.50和4.08倍,免疫细胞化学法结果表明,ABCC2在两株耐药细胞中表达均增强,同时ABCC2还可在CNE2/DDP+5Fu细胞核中表达.上述结果表明ABCC2在CNE2细胞对顺铂的耐药性中可能发挥着重要的作用.; 谢思明杜莎莎方唯意姚开泰; 关键词：鼻咽癌顺铂多药耐药 ABC转运蛋白

基因芯片筛选的CFTR基因作为雌激素依赖型子宫内膜癌预后标志物的研究被引量：1: 2007年; 目的探讨雌激素依赖型(Ⅰ型)及非雌激素依赖型(Ⅱ型)子宫内膜癌的治疗和预后判断的指导意义。方法为了进一步明确两型子宫内膜癌在基因表达上的水平差异,找到雌激素调节基因,6张Affymetrix全基因组基因芯片被利用分析两者之间在表达谱上的差异,结合生物信息分析。结果CFTR(ABCC7),一个ABC家族多药耐药(MDR)基因,明显在I型子宫内膜癌中高表达,而且,该基因是一个雌激素调节基因,其主要受雌激素诱导表达。结论CFTR基因可以作为该型的生物学标志物之一,区分Ⅱ型子宫内膜癌。另外,CFTR作为一个多药耐药基因,涉及了多药耐药。因此,CFTR表达的变化可以作为治疗预后的标志之一。; 郭遂群邢福祺庞战军方唯意刘国炳; 关键词：子宫内膜癌基因芯片生物信息 CFTR

高通量SNP基因分型技术研究进展被引量：12: 2003年; 在后基因组时代 ,单核苷酸多态性研究已迅速成为了生物医学许多领域的焦点。发展可靠、敏感、经济、稳定、高通量的SNP基因分型技术已迫在眉睫。本文主要着重于高通量SNP基因分型技术的原理。; 方唯意姚开泰; 关键词：高通量单核苷酸多态性基因分型耐受性

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