文坤明 作品数:53 被引量:206 H指数:8 供职机构: 遵义医学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科技厅科学技术基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
结直肠癌患者淋巴结微转移与其免疫功能的关系 被引量:5 2009年 目的以细胞角蛋白20(CK20)mRNA为标志物检测结直肠癌患者淋巴结微转移情况,并探讨其与患者免疫功能的关系。方法对21例结直肠癌患者的281枚淋巴结,分别采用病理切片常规HE染色检测转移癌灶及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测淋巴结CK20mRNA表达;采用流式细胞仪检测患者外周血CD4+、CD8+及NK细胞活性,ELISA法检测外周血IL-2、sIL-2R及IL-12水平。结果21例患者281枚淋巴结中,HE染色法检出有淋巴结转移者为2例16枚(5.7%,16/281),RT-PCR法检出有淋巴结转移(CK20mRNA表达阳性)者10例140枚(49.8%,140/281),2种方法在淋巴结转移检出率及检出阳性病例数方面差异均有统计学意义(P<0.01)。11例淋巴结CK20mRNA表达阴性患者术前CD4+及NK细胞活性、CD4+/CD8+比值、IL-2及IL-12水平高于8例HE染色无法检出而CK20mRNA表达阳性(即存在微转移)患者(P<0.05),而前者术前CD8+细胞活性及sIL-2R水平低于后者(P<0.05);且CK20mRNA的表达与CD4+(r=-0.769)及NK(r=-0.532)细胞活性、CD4+/CD8+比值(r=-0.755)、IL-2(r=-0.834)及IL-12(r=-0.819)水平间均呈负相关(P<0.05,P<0.01),与CD8+细胞活性(r=0.562)及sIL-2R水平(r=0.751)之间呈正相关(P<0.01)。结论结直肠癌淋巴结微转移的发生与患者免疫功能低下关系密切。 文坤明 曾庆良 冯国丽 宋璇关键词:结直肠癌 淋巴结 微转移 细胞角蛋白20 免疫功能 老年人大肠癌并急性肠梗阻手术治疗体会 本文旨在探讨老年人大肠癌并发急性肠梗阻的外科处理,回顾性分析了78例年龄在60岁以上的老年人大肠癌并发急性梗阻的外科诊断和治疗资料,研究结果发现,老年人大肠癌并发急性肠梗阻,非手术治疗缓解者,限期手术疗效较好;需急诊手术... 文坤明关键词:大肠癌 急性肠梗阻 并发症 外科治疗 文献传递 Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及意义 被引量:3 2016年 目的:探讨胚胎干细胞转录因子Oct4的亚型Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其可能的作用。方法:以结直肠癌细胞株SW480细胞采用悬浮培养法培养出的3D微球体及其亲本细胞SW480为研究对象,采用细胞分化实验、细胞软琼脂克隆实验、流式细胞技术检测干细胞标记物CD133、CD44的表达以验证3D微球体是否富集肿瘤干细胞(CSCs),实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测两种细胞Oct4B1 mRNA表达水平。结果:3D微球体具有分化为普通肿瘤细胞的能力,相对于亲本细胞,3D微球体体外克隆形成能力明显增强(P<0.01),干细胞标记物CD133、CD44明显高表达(P<0.01),Oct4B1 mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。结论:干细胞调控因子Oct4的亚型Oct4B1在富集结直肠癌CSCs的3D微球体中表达明显增高,其可能参与结直肠癌CSCs的调控。 程家平 黎江 苏弦 陈奕霖 曾庆良 文坤明关键词:结直肠癌 肿瘤干细胞 OCT4 哇巴因抑制结直肠癌多药耐药细胞增殖及侵袭力的研究 被引量:2 2012年 目的:探讨结直肠癌耐药细胞增殖及侵袭力与Na^+,K^+-ATP酶活性及其β1亚单位和P糖蛋白(P-gp)表达的关系,及哇巴因增加化疗敏感性的可能机制。方法:以人结直肠癌亲本细胞(SW480)和耐奥沙利铂细胞(SW480/OxR)为研究对象,采用MTS法、Transwell小室、生化酶学、实时定量PCR(Real time quantitative,RT-PCR)及流式细胞技术等方法比较SW480细胞与SW480/OxR细胞的增殖及侵袭力、Na^+,K^+-ATP酶活性及其β_1亚单位和P-gp表达的差异,观察哇巴因对SW480/OxR细胞上述指标的影响。结果:与SW480细胞比较,SW480/OxR细胞增殖活力无明显变化(P>0.05),而细胞侵袭力却显著增加,Na^+,K^+-ATP酶活性下降,β_1亚单位表达下调,P-gp表达上调(P均<0.01);哇巴因能显著抑制SW480/OxR细胞增殖活力,减弱其侵袭力,下调SW480/OxR细胞P-gp蛋白表达,上调SW480/OxR细胞β_1亚单位蛋白表达,增加SW480/OxR细胞Na^+,K^+-ATP酶活性(P均<0.01)。结论:Na^+,K^+-ATP酶活性下降可能源于β_1亚单位表达下调,并参与结直肠癌的耐药;哇巴因能部分逆转结直肠癌耐药细胞MDR,可能与增加Na^+,K^+-ATP酶活性及下调P-gp表达有关。 张贵海 张先平 文坤明 胡敏 王轶 藏春宝 李少林关键词:结直肠癌 腺苷三磷酸酶 P-糖蛋白 化疗抵抗 哇巴因 腹腔镜经胃切除术与腹腔镜近端胃切除术治疗贲门胃肠道间质瘤疗效对比 被引量:8 2016年 内镜下黏膜切除或黏膜下剥离术是治疗胃间质瘤的重要的方法。但是上述治疗方法对于贲门的间质瘤的手术切除操作很困难。近端胃切除治疗贲门间质瘤由于切除了贲门结构和切断迷走神经而导致严重消化系统功能紊乱。 李建国 陈晓娇 文坤明 郑兴斌关键词:胃切除术治疗 胃肠道间质瘤 近端胃切除 腹腔镜 内镜下黏膜切除 姜黄素下调P-糖蛋白表达逆转结直肠癌耐药的研究 被引量:1 2015年 目的 探讨姜黄素(Cur)对具有多药耐药特性的人结直肠癌耐奥沙利铂(Oxa)细胞株耐药的逆转作用及其是否与下调耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)有关.方法 采用WST-1试剂检测Cur对两种人结直肠癌耐Oxa细胞株(SW480/OxR及SW620/OxR)的半数抑制浓度(IC50),选择比IC50低一浓度梯度的Cur+2μmol/L Oxa作用于两种耐药细胞48h(称为实验组),与仅加入2μmol/L的Oxa对照组比较,采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测编码P-gp的多药耐药基因-1(MDR-1) mRNA表达;采用流式间接法检测P-gp阳性细胞百分率.结果 实验组与对照组比较:(1) SW480/OxR细胞凋亡率由(4.23±1.65)%上升到(32.15±3.98)%,SW620/OxR细胞凋亡率由(5.08±1.82)%上升到(30.69±2.94)%,两种耐药细胞实验组细胞凋亡率均明显高于其对照组(P<0.05);(2)两种耐药细胞MDR-1 mRNA表达抑制率均超过50%(P<0.05);(3)两种耐药细胞P-gp蛋白阳性细胞百分率明显下降(P<0.05).结论 Cur具有逆转结直肠癌耐药细胞株耐药的作用,可能与下调耐药蛋白P-gp表达有关. 文坤明 黄妍 黎江 苏弦 陈正权 曾庆良关键词:结直肠癌 多药耐药 姜黄素 P-糖蛋白 虎杖膏辅助治疗阑尾周围脓肿的疗效观察 被引量:9 2018年 阑尾周围脓肿为急性阑尾炎化脓、穿孔,大网膜移至右下腹包裹阑尾并粘连形成。阑尾周围脓肿的治疗主要采用非手术治疗,以静脉滴注抗生素为主。卢蔚起等[3]发现在常规抗炎治疗基础上加用中药外敷治疗阑尾周围脓肿可提高临床疗效。虎杖膏是以虎杖为主要原料,具有消肿镇痛,清热解毒功能,其在阑尾周围脓肿治疗中的应用鲜有报道. 陈正权 何金艳 周昕 王麦建 文坤明关键词:阑尾周围脓肿 虎杖膏 疗效观察 中药外敷治疗 急性阑尾炎 非手术治疗 Slug基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 被引量:4 2012年 目的构建Slug基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体。方法针对人Slug基因的序列,设计出RNA干扰的靶序列,合成靶序列Oligo DNA,退火形成双链DNA,通过Age I和EcoR I酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆并用插入鉴定引物进行PCR鉴定阳性克隆并测序,同时应用Real-time PCR和Western blot方法检测HCT116结肠癌细胞中Slug基因mRNA和蛋白的表达情况。结果 PCR鉴定与DNA测序证实合成的含Slug shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。Western blot证实Slug RNAi慢病毒载体能够抑制Slug的表达。结论成功构建Slug基因RNAi慢病毒表达载体,为后续感染结肠癌细胞,为探索在结直肠癌发生和发展中的作用奠定基础。 钱江 傅仲学 文坤明 陈旺盛关键词:RNA干扰 SLUG 慢病毒载体 病变主要位于大网膜的腹膜恶性间皮细胞瘤1例 2016年 患者男,58岁,因"腹胀、乏力并伴有咳嗽1月"入院。1月前,患者无明显诱因出现腹胀,腹胀呈进行性加重,伴有乏力及咳嗽,咳嗽为刺激性干咳,夜间偶感发热、盗汗,无反酸、嗳气、恶性及呕吐等。患者发病以来精神、饮食差,体质量3个月减轻约10 kg。既往否认肝炎、结核及肿瘤等病史。入院查体:T 36.7℃、P 110次/min、R 20次/min、BP107/85mmHg。 程家平 文坤明 陈奕霖关键词:大网膜肿瘤 腹膜恶性间皮瘤 刺激性干咳 腹腔热灌注化疗 顺氯氨铂 结直肠癌耐药细胞株诱导上皮间质转化的研究 被引量:6 2012年 目的建立结直肠癌耐奥沙利铂细胞株,观察该细胞株上皮间质转化(EMT)标记物的变化。方法以耐药SW620/OxR细胞及亲本SW620细胞为研究对象,采用流式细胞技术检测P-糖蛋白^+(P—gp^+)及Survivin^+细胞比例,Western blot法检测EMT标记物[E-钙黏素(E-eadherin)、N—cadherin、波形蛋白(Vimentin)]的变化。结果与SW620细胞株比较,SW620/OxR细胞中P—gp^+细胞数[(63.78±6.82)%比(10.35±2.59)%,P〈0.01]、Survivin^+细胞数[(43.59±9.26)%比(7.82%±3.48)%,P〈0.01]及间质标记物N—cadherin(0.33±0.06比0,19±0.05,P〈0.05)、Vimentin(0.38±0.07比0.09±0.02,P〈0.01)明显增高,而上皮标记物E-cadherin(0.45±0.07比0.86±0.18,P〈0.01)表达则明显下降。结论SW620/OxR细胞株高表达P—gp和Survivin基因及蛋白,并诱导EMT发生。 文坤明 傅仲学 张贵海 陈旺盛 钱江 冯继红关键词:结直肠肿瘤 化疗 上皮间质转化