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饥饿对幼年斑马鱼下丘脑摄食相关性神经肽表达的影响: 2016年; 脊椎动物下丘脑中的神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)、GALANIN和GMAP蛋白前体(GALANIN and GMAP prepropeptide,GAL)、Agouti相关蛋白(Agouti related neuropeptide,AGRP)和阿片促黑色素原(Proopiomelanocortin,POMC)与摄食密切相关,但在斑马鱼中对这些神经肽与摄食之间关系的研究较少。本文通过原位杂交技术和实时定量PCR方法,观察饥饿1 d、饥饿2 d和饥饿2 d喂食2 d后斑马鱼下丘脑中npy、galanin、agrp和pomca的表达情况。结果显示,饥饿处理之后,agrp和galanin在斑马鱼下丘脑中的表达量显著上升(P<0.05)。与对照组相比,饥饿2 d后斑马鱼下丘脑中pomca表达量显著下降(P<0.05)。饥饿2 d喂食2 d后斑马鱼下丘脑中pomca、agrp和galanin的表达量与对照组相比没有显著性差异。所有实验中npy在斑马鱼下丘脑中的表达没有显著性差异。这表明饥饿处理促使斑马鱼下丘脑中agrp和galanin表达上调,pomca表达下调;及时摄食可以恢复agrp、galanin和pomca在下丘脑中的表达水平。; 刘姗姗张翠珍彭刚; 关键词：斑马鱼 NPY GALANIN AGRP

荧光激活细胞分选转基因标记斑马鱼神经元被引量：1: 2013年; 对常规试验方法加以改进,使之适用于斑马鱼脑部荧光标记神经细胞的分选。以lhx5∶Kaede转基因株系为例,利用转基因斑马鱼脑部制备单细胞悬液进行荧光激活细胞分选(Fluorescence-activated cell sorting,FACS),获得lhx5荧光标记细胞。提取总RNA后进行基因芯片分析从而了解lhx5标记神经元的基因表达特性。结果显示,通过本流程可成功制备斑马鱼幼鱼脑部单细胞悬液,lhx5∶Kaede平均荧光阳性率为6%。提取RNA质量及总量均能满足基因芯片要求。基因芯片结果显示lhx5及其他标记分子的表达均得到了显著富集。有效地分离斑马鱼幼鱼中枢神经系统荧光标记细胞,可用于特定细胞群的基因表达谱分析。; 陈思杰张贺飞张翠珍彭刚; 关键词：斑马鱼转基因

斑马鱼颅骨骨组织发育特征的研究被引量：11: 2014年; 目的:采用两种骨组织双重染色方法研究斑马鱼颅骨骨组织的发育特征,找出适合于不同发育时期斑马鱼骨组织的染色方法。方法:将不同发育阶段的斑马鱼分为两组,分别用A、B两种方法进行染色,体视显微镜下观察染色结果并拍照。结果:不同发育阶段的斑马鱼分别经A、B染色法染色软骨都被染成蓝色,但两者在骨骼上的染色有差别,对于15d以内骨化不完全的斑马鱼适合用A染色法,15d以上的斑马鱼骨化程度加重更适合用B染色法突出骨骼特征。整体来看,斑马鱼颅骨的骨化过程存在特定的程序化特征,即不同的颅骨组织按照一定的时间顺序逐步完成骨化。结论:可利用颅骨的程序化骨化特征研究人类颅颌面畸形,积极开展口腔医学领域斑马鱼模式生物学的研究。; 张燕丽张翠珍彭刚段小红; 关键词：茜素红双重染色法斑马鱼

激光共聚焦同步双扫描技术在斑马鱼前脑神经发育研究中的应用被引量：3: 2013年; 随着标记蛋白光转换等实验技术在生物科研领域的开展,对激光共聚焦取图技术也提出了越来越高的要求。本文旨在以斑马鱼前脑神经发育为研究对象,建立应用激光共聚焦同步双扫描系统的实验模式。本实验将36～48h的转基因Tg(lhx5:kaede)斑马鱼胚胎麻醉固定后,以光诱导变色荧光蛋白kaede标记的前脑神经元作为实验观察目标,使用激光共聚焦同步双扫描系统的405nm紫外激光刺激扫描感兴趣区域的同时,进行488nm和559nm激光刺激取图,实时观察kaede蛋白光学信号的转换状态,并在光转换后记录紫外激光刺激区域神经元的投射形态图像。结果显示,激光刺激引起kaede蛋白从绿色转变为红色,其在感兴趣区域的分布变化指示出目标神经元的胞体位置及其轴突投射路径。由上述结果可见,激光共聚焦同步双扫描技术的应用满足了kaede蛋白光转换实验的刺激和扫描同步的要求,该技术在斑马鱼胚胎特定神经元形态发育研究中的应用,可作为神经发育研究的一种实验模式在很多实验设计中进行延伸,也为激光共聚焦双扫描技术的推广提供了一个很好的平台。; 石莹高景霞彭刚姜民; 关键词：斑马鱼光转换神经发育

斑马鱼模式动物在神经功能环路研究中的应用被引量：1: 2013年; 斑马鱼是发育、遗传以及药物发现研究中常用的模式动物。作为重要的脊椎动物模式系统之一,斑马鱼与人类基因有高度同源性,中枢神经系统也与哺乳动物相似。近来,斑马鱼在神经科学研究以及生理心理学相关问题的研究中的应用日益广泛。研究者们对斑马鱼幼鱼及成鱼的行为表现及行为发育开展了多方面的研究。基于斑马鱼模式动物的特点及优势,遗传突变和药物筛选在对动物行为表现的分子机制的研究中起到重要的推动作用。; 陈思杰彭刚; 关键词：斑马鱼行为发育遗传突变药物筛选

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彭刚