张徐
- 作品数:34 被引量:98H指数:6
- 供职机构:江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 间质干细胞培养上清对日本血吸虫SEA诱导活化的巨噬细胞株RAW264.7的抑制作用被引量:2
- 2011年
- 目的观察大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)培养上清对日本血吸虫可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导活化的巨噬细胞的抑制作用。方法用5、10、20和40μg/ml SEA分别诱导巨噬细胞株RAW264.7 12 h,或用20μg/ml SEA分别诱导小鼠巨噬细胞株(RAW264.7)4、8、12和24 h后,用实时荧光定量PCR检测α肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA水平,选择SEA的最佳作用浓度和作用时间。将巨噬细胞分成5组,分别为阴性对照组、SEA组、SEA+MSC上清组(MSC组)、SEA+大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)上清组(NRK-52E组)和SEA+DMEM细胞培养基组(DMEM组)。除阴性对照组外,其他各组给予20μg/ml SEA诱导巨噬细胞活化12 h后,MSC组、NRK-52E组和DMEM组换液撤SEA,分别给予MSC培养上清、NRK-52E细胞培养上清和DMEM培养液,继续培养。显微镜观察细胞上清培养12 h后各组细胞形态。实时荧光定量PCR检测细胞上清培养12 h和24 h后TNF-αmRNA水平。蛋白质印迹(Western blotting)分析检测细胞上清培养12 h后转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达水平。噻唑蓝比色法(MTT法)测定细胞上清培养24 h和48 h后巨噬细胞增殖情况。结果 SEA活化巨噬细胞的最佳浓度和时间分别为20μg/ml和12 h。镜下观察显示,MSC上清培养12 h后,MSC组与SEA组、NRK-52E组和DMEM组相比,细胞变圆,体积明显较小,伪足较少。MSC上清作用12 h和24 h后,MSC组TNF-αmRNA水平分别为阴性对照组的(1.0±0.4)和(1.0±0.5)倍,显著低于NRK-52E组[分别为(10.4±3.9)和(16.5±5.0)倍(12 h:P<0.05;24 h:P<0.01)]和DMEM组[分别为(6.0±2.1)和(2.4±0.7)倍(均P<0.05)]。MSC上清作用12 h后,MSC组蛋白TGF-β1/GAPDH为0.31±0.10,显著低于NRK-52E组(0.88±0.10,P<0.01)和DMEM组(0.58±0.06,P<0.05)。MSC上清作用48 h后,MSC组吸光度(A490值)为0.22±0.05,与NRK-52E组(0.53±0.02)和DMEM组(0.31±0.03)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 MSC培养上清能抑制SEA诱导的巨噬细胞株RAW264.7
- 徐会娟钱晖朱伟张徐严永敏张蕾蕾毛飞许文荣
- 关键词:间质干细胞日本血吸虫可溶性虫卵抗原
- miR-381靶向MAP3K2抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭被引量:7
- 2019年
- 目的:探讨微小RNA-381(miR-381)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并研究miR-381的靶基因及其功能。方法:采用qRT-PCR检测miR-381在人前列腺癌细胞系中的表达水平。采用基因转染方法过表达或敲减miR-381在前列腺癌细胞中的表达,采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕损伤实验、Transwell迁移实验和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用生物信息学方法预测miR-381靶点,并采用荧光素酶报告基因分析进行验证。结果:miR-381在前列腺癌细胞中低表达。与空白对照组相比,miR-381 mimics组前列腺癌细胞增殖能力明显降低,克隆数显著减少,凋亡明显增加,迁移和侵袭的细胞数减少;miR-381 inhibitor组结果则相反。荧光素酶报告基因分析证实MAP3K2是miR-381中的靶基因。miR-381 mimics下调而miR-381 inhibitor上调前列腺癌细胞中MAP3K2基因和蛋白表达。结论:miR-381通过靶向MAP3K2抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,发挥抑癌基因作用。
- 王晖徐雪莹张徐
- 关键词:前列腺癌增殖迁移
- 临床分子生物学检验实验教学实践和探讨被引量:4
- 2014年
- 临床分子生物学检验是运用分子生物学技术在临床辅助诊断、治疗和预后评估的学科。本文提出通过优化实验教学模式和内容,完善师资队伍和实验室建设,建立多样化考核方式等实验教学改革,提高了学生学习兴趣,促进了学生实践技能掌握,培养了学生创新和应用能力。
- 张徐周丽萍孙梓暄严永敏钱晖
- 关键词:分子生物学实验教学
- 长链非编码RNA在乳腺癌中的研究进展被引量:6
- 2015年
- 研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)表达异常与乳腺癌发生、发展和转移密切相关。深入研究LncRNA在乳腺癌中的作用及机制有望为乳腺癌诊断和治疗提供新的分子靶点。本文就LncRNA在乳腺癌中的作用、机制和潜在临床应用价值作一综述。
- 张徐王梦瑶徐捡王勇钱晖许文荣
- 关键词:长链非编码RNA乳腺癌分子标志物
- 环状RNA在胃癌研究中的意义被引量:1
- 2021年
- 环状RNA(circRNA)是一类无5′帽子结构或3′末端poly(A)尾巴的单链共价闭合的非编码RNA,其丰富多样,还具有保守性、稳定性和特异性。胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,发病率及病死率均较高。目前大量研究发现环状RNA通过作为微小RNA(microRNA,miRNA)的分子海绵,发挥与RNA结合蛋白(RBP)相互作用或翻译蛋白等功能,从而参与多种疾病的发生发展,其中就包括胃癌。环状RNA在胃癌中的特异表达展现了其成为新的生物标志物的潜力,对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移侵袭均有影响,这为胃癌的治疗提供了新思路。本文将从环状RNA的生物特性、功能及其与胃癌的关系,存在的临床意义等方面进行综述。
- 曹萱张徐蒋鹏程
- 关键词:胃癌生物标志物
- hsa-miR-126的靶基因预测及其生物信息学分析被引量:1
- 2018年
- 目的:采用生物信息学的方法预测hsa-miR-126的靶基因及相关功能,为后续研究提供理论基础。方法:采用PubMed搜索hsa-miR-126相关文章,总结目前研究进展,使用mi RBase获得hsa-miR-126的基本信息,并用NCBI BLAST分析其序列保守性,以Targetscan、mi Randa及PicTar预测结果的两两交集为预测靶基因,并结合mi RTarBase上已证实的靶基因作为基因集合做GO分析和Pathway分析。结果:搜索PubMed获得相关文献24篇,多数研究集中于hsa-miR-126与肿瘤的关系,hsa-miR-126在多种物种间具有高度保守性,其5个预测靶基因和46个已证实靶基因于白细胞迁移、对糖皮质激素反应、促进内皮细胞增殖、蛋白信号转导等有功能富集(P<0.01),于多种肿瘤如肾细胞癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌有信号通路富集(P<0.01)。结论:hsa-miR-126可能参与多种肿瘤的发生发展过程。
- 陈妍珂张徐吴近珠王婷婷崔玉宝
- 关键词:MICRORNA靶基因生物信息学肿瘤
- 肿瘤相关中性粒细胞研究进展被引量:2
- 2013年
- 近年来,中性粒细胞在肿瘤中的作用和意义逐渐为人们所认识。不同类型肿瘤患者肿瘤组织中浸润的中性粒细胞数量增加,与预后不良明显有关。但是对于中性粒细胞在肿瘤发生、发展中的作用机制尚不清楚。研究证实,中性粒细胞具有促肿瘤生长、转移、血管生成和抑制免疫的作用。本文主要综述了肿瘤相关中性粒细胞的研究进展。
- 张徐许文荣
- 关键词:中性粒细胞肿瘤极化
- 胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义被引量:8
- 2017年
- 目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P<0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均<0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P>0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。
- 李阳潘磊梁炜张鹏钱晖许文荣张志坚蒋鹏程张徐
- 关键词:胃癌外泌体血清
- LncRNA UFC1在肺癌中的表达和作用研究
- 目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,也是位居死亡率首位的癌症。研究表明lncRNA可能成为肿瘤诊断和治疗的特异性标志物和治疗靶点。本研究就lncRNA UFC1在肺癌中的临床价值和作用机制进行了探讨,为肺癌的诊断治疗开发新...
- 臧雪燕钱晖许文荣张徐
- 关键词:肺癌生物标志物
- 慢病毒转染人骨髓间质干细胞研究被引量:3
- 2008年
- 目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs。利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs。结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs。结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础。
- 张徐钱晖朱伟曹慧玲徐学静司煜安王梅许文荣
- 关键词:间质干细胞慢病毒转染