宋竹青
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家科技基础性工作专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 奶牛流产衣原体OmpA抗原间接ELISA方法的建立
- 为建立间接ELISA方法以诊断奶牛衣原体病,本研究以表达纯化的奶牛流产衣原体外膜蛋白A(OmpA)为抗原,摸索出最佳反应条件,确定了阴阳性临界值,并通过特异性,敏感性,重复性,稳定性和对比试验,最终确定了奶牛衣原体病间接...
- 邱昌庆宋竹青
- 文献传递
- 一种用于检测牛流产鹦鹉热衣原体抗体的试剂盒及制备方法
- 本发明公开一种检测牛流产鹦鹉热原体抗体的ELISA试剂盒。本发明的用于检测牛流产鹦鹉热衣原体抗体的ELISA试剂盒中有横向包被的流产鹦鹉热衣原体、纵向包被有作为二抗的兔抗牛IgG-HRP的酶标板、洗涤液、封闭液、底物缓冲...
- 邱昌庆宋竹青周继章曹小安郑福英蔺国珍宫晓炜
- 文献传递
- 奶牛流产衣原体OmpA抗原间接ELISA检测方法的建立被引量:2
- 2010年
- 以奶牛流产衣原体外膜蛋白A(OmpA)作为抗原,筛选最佳反应条件,建立了奶牛衣原体病间接ELISA检测方法。结果显示,OmpA的最佳包被浓度为1∶320;血清最佳稀释度为1∶40;酶标二抗的最佳工作浓度为1∶2000;抗原的最适包被条件为37℃1h加4℃过夜;ELISA的阴性、阳性临界值为0.391。用本方法和衣原体间接血凝试验检测奶牛血清田间样品206份,两者的符合率为95.3%。本试验建立的OmpA-ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,可为牛衣原体病的诊断及流行病学调查提供有效工具。
- 宋竹青邱昌庆周继章郑福英蔺国珍曹小安王光华宫晓炜魏彦明
- 关键词:流产衣原体间接酶联免疫吸附试验
- 奶牛流产鹦鹉热衣原体ompA基因的克隆与原核表达被引量:6
- 2010年
- 目的表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性。方法采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组目的蛋白的表达结果。结果重组蛋白经奶牛衣原体阳性血清鉴定正确。结论ompA基因在原核表达系统中得到正确表达。
- 宋竹青邱昌庆周继章曹小安蔺国珍郑福英宫晓炜王光华魏彦明
- 关键词:鹦鹉热衣原体克隆原核表达奶牛
- 奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析被引量:1
- 2009年
- 以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1 170 bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9 ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1-22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompA序列的同源性均达到了98%以上.
- 宋竹青魏彦明周继章曹小安王光华邱昌庆
- 一种流产鹦鹉热衣原体疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种牛流产鹦鹉热衣原体的亚单位疫苗及这种疫苗的制备方法。本发明的疫苗是用流产嗜性衣原体外膜蛋白A(OmpA)构成的亚单位疫苗;其制备方法是以从流产嗜性衣原体提取细菌的总DNA为模板,设计两对特异性引物进行套式聚...
- 邱昌庆宋竹青周继章曹小安郑福英蔺国珍宫晓炜
- 文献传递