唐莹
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:潍坊市益都中心医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo—A蛋白表达的变化被引量:1
- 2013年
- 目的评价炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo—A蛋白表达的变化。方法健康成年雄性SD大鼠120只,体重250—300g,采用随机数字表法,将其随机分为两组(n=60):对照组(C组)和炎性痛组(F组)。F组大鼠左侧后肢趾部皮下注射3%福尔马林0.1ml,C组注射等容量的生理盐水。于注射后Ih、1、2、3和7d时采用vonFrey纤毛测定左侧后爪机械痛阈。于各时点随机取12只大鼠处死后取损伤侧LJ5背根神经节和L4,5脊髓背角,分别采用免疫荧光标记法和Westernblot法检测Nogo—A蛋白的表达。结果与C组比较,F组大鼠注射后1h、1、2、3和7d时机械痛阈降低,注射后1h、2、3和7d时背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P〈0.05)。结论背根神经节及脊髓背角Nogo—A蛋白表达上调可能在福尔马林致大鼠炎性痛形成过程中发挥重要作用。
- 许丹阳陈雪梅唐莹张励才
- SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/恢复模型中Sestrin2基因过表达对线粒体分裂的调控研究被引量:2
- 2021年
- 目的探讨人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/恢复(OGD/R)模型中应激诱导蛋白Sestrin2基因过表达对线粒体分裂的调控作用及其机制。方法(1)将SH-SY5Y细胞分为正常对照组、OGD/R组、Sestrin2过表达组及空载体组,后2组细胞预先采用慢病毒感染方法分别构建Sestrin2过表达及空载体稳转细胞株,除正常对照组细胞外均给予氧糖剥夺4 h/恢复18 h造模处理。造模完成后采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞的存活率,采用Western blotting实验检测各组细胞中Sestrin2、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胞浆Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)、胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)的蛋白水平,采用透射电镜观察各组细胞中线粒体的超微结构,采用免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的核移位情况。(2)将Sestrin2过表达稳转SH-SY5Y细胞株分为Sestrin2过表达组、鸦胆子苦醇+Sestrin2过表达组、二甲基亚砜(DMSO)+Sestrin2过表达组,后2组细胞在造模前分别给予Keap1/Nrf2通路抑制剂鸦胆子苦醇(终浓度100 nmol/L)或DMSO溶液(终体积分数0.1%)预处理4 h,然后各组细胞均给予氧糖剥夺4 h/恢复18 h造模处理。造模完成后采用Western blotting实验检测各组细胞中胞浆Keap1、胞核Nrf2、Drp1、Fis1的蛋白水平。结果(1)与OGD/R组相比,Sestrin2过表达组细胞的存活率明显升高(61.33%±1.15%vs.81.00%±3.00%),Bcl-2/Bax值明显升高(0.467±0.006 vs.0.880±0.010),Drp1、Fis1、胞浆Keap1蛋白水平明显降低(1.089±0.033 vs.0.865±0.014;0.829±0.009 vs.0.350±0.007;0.967±0.017 vs.0.881±0.024),胞核Nrf2蛋白水平明显升高(0.627±0.025 vs.0.957±0.015),差异均有统计学意义(P<0.05);并且,Sestrin2过表达组细胞的线粒体结构明显较OGD/R组更完整,Nrf2发生了明显的核移位。(2)与Sestrin2过表达组相比,鸦胆子苦醇+Sestrin2过表达组细胞胞核Nrf2的蛋白�
- 王秀芳赫建帅唐莹吴秀云于文刚王亚楠王士雷
- 右美托咪定神经保护作用的自噬机制研究被引量:5
- 2020年
- 目的:探讨右美托咪定发挥神经保护作用的细胞自噬和线粒体自噬机制。方法:通过对SH-SY5Y细胞进行氧糖剥夺再灌注模拟全脑的缺血再灌注损伤,将细胞随机分为7组:(1)C组:对照组;(2)OGD/R组:氧糖剥夺再灌注损伤组;(3)DEX组:右美托咪定组;(4)3MA组:3-甲基腺嘌呤组;(5)D+3MA组;(6)RAPA组:雷帕霉素组;(7)D+RAPA组。结果:与OGD/R组相比,DEX组、3MA组、D+3MA组的细胞活性、电镜下完整线粒体的数量、自噬体数量明显好于OGD/R组(P<0.05);RAPA组与OGD/R组相比上述指标无明显差异(P>0.05);而RAPA中加入右美托咪定以后,可以部分逆转RAPA的作用,细胞活性增加,完整线粒体数量增加,自噬体数量减少(P<0.05)。免疫印迹结果显示,与OGD/R组相比,DEX组、3MA组、D+3MA组LC3II/LC3I、Beclin 1表达减少,BCL-2、P62、TOM20的表达增加,RAPA组各种自噬蛋白的表达与OGD/R组相比没有统计学意义,当应用右美托咪定之后逆转了各种蛋白的表达(P<0.05)。结论:右美托咪定通过减少过度的细胞自噬和线粒体自噬发挥神经保护作用。
- 唐莹李新梅王雪张志杰陈华永王士雷
- 关键词:自噬缺血再灌注损伤