周凌云
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：广西科技厅资助项目广西高校百名中青年学科带头人计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PCR-反向杂交膜片技术检测石蜡包埋组织中的结核杆菌被引量：4
- 2008年
- [目的]探讨PCR-膜片RDB(recersedotblot)技术检测石蜡包埋组织中的结核杆菌的方法。[方法]合成检测结核杆菌的寡核苷酸探针并制作膜芯片,扩增结核分支杆菌插入序列IS6110基因片段,利用PCR-膜片RDB技术,检测12株结核分支杆菌临床分离株、2株大肠杆菌,120例结核病人及38例非结核病人石蜡包埋组织中结核杆菌。石蜡组织的膜片检测结果与抗酸染色法和PCR检测结果比较。[结果]12株扩增阳性的结核分支杆菌,膜片检测11株杂交阳性,2株大肠杆菌和阴性对照结果均为阴性。120例结核病人石蜡组织标本,抗酸染色,PCR和PCR-膜片RDB技术检测灵敏度分别为43.3%(52/120),76.7%(92/120)和87.5%(105/120),三者比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。38例非结核病人石蜡组织标本,抗酸染色,PCR和PCR-膜片RDB技术检测特异度分别为100%(38/38),94.7%(36/38)和100%(38/38),三者比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]PCR-膜片RDB技术有助于提高石蜡包埋组织中结核杆菌检出率。
- 何晓周凌云何敏刘斐韦世录罗殿中
- 关键词：石蜡包埋组织结核杆菌
- 反义寡核苷酸作用后肝癌细胞端粒酶活性的变化及差异蛋白的表达被引量：3
- 2005年
- 目的利用针对端粒酶RNA的反义寡核苷酸(ASODN)和正义寡核苷酸(NODN)作用于人肝癌细胞SMMC-7721,比较ASODN和NODN作用后癌细胞端粒酶活性及相关蛋白的变化。方法利用实时荧光定量端粒重复序列扩增法(FQ-TRAP法),检测ASODN和NODN作用后肿瘤细胞端粒酶活性变化;蛋白质芯片-飞行时间质谱仪,检测ASODN和NODN作用后特异蛋白质的变化。对照组为未加任何处理因素的SMMC-7721细胞。结果FQ-TRAP法检测CT值,A-SODN组为35.2±2.3,NODN组为26.1±3.5,对照组为18.2±0.7。蛋白质芯片-飞行时间质谱仪检测发现,ASODN组有19个差异蛋白分子高表达,13个差异蛋白分子低表达。NODN组有20个差异蛋白分子高表达,12个差异蛋白分子低表达。所有差异蛋白的分子量分布在3 000 D^10 000 D之间。结论ASODN和NODN均能抑制肝癌细胞端粒酶活性,两者作用SMMC-7721细胞后所表达的差异蛋白十分相似。
- 何敏韦霄覃健朱淼周凌云黄立新张志勇
- 结核杆菌基因的检测方法
- 一种结核杆菌基因的检测方法，使用一对特异引物P1和P2对结核杆菌特有的插入序列IS6110中的一段245bp区域进行PCR扩增，其中P1的5’端带有生物素；将PCR产物与膜芯片上的探针进行特异性杂交，再进行酶联反应，最后...
- 何敏周凌云何晓
- 文献传递
- 用于检测结核杆菌基因的特异引物
- 一种结核杆菌基因的检测方法，使用一对特异引物P1和P2对结核杆菌特有的插入序列IS6110中的一段245bp区域进行PCR扩增，其中P1的5’端带有生物素；将PCR产物与膜芯片上的探针进行特异性杂交，再进行酶联反应，最后...
- 何敏周凌云何晓
- 文献传递
- 反向杂交膜片检测结核菌耐利福平基因突变被引量：6
- 2005年
- 目的利用一种新型的反向点杂交膜片,快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变。方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计寡核苷酸探针并固定于尼龙膜上,用生物素标记的引物增扩结核分枝杆菌rpoB基因片断,与膜片上探针杂交,膜片检测结果与常规药敏试验结果和测序结果进行对照。结果对63株临床分离株进行检测,10株利福平敏感株未检测到突变,53株耐利福平株,其中48株检测到突变。灵敏度为90.6%,特异度为100%,阳性预测值100%,阴性预测值66.7%。用反向点杂交膜片检测27份肺结核患者的痰标本,17份非结核的痰液标本。12份耐利福平的痰标本中,11份检测到突变,膜片检测与药敏结果的符合率为92.3%;15份利福平敏感的痰标本中,膜片检测结果有6份出现突变信号;17份非结核病的其他患者的痰液标本中有1份检测到突变。检测痰标本的灵敏度为91.7%,特异度为78.1%,阳性预测值61.1%,阴性预测值96.1%。结论反向点杂交膜片可简便、快速、较准确地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变。
- 何敏万逢洁周凌云张旭朱江华许丁空汤卓何晓张志勇
- 关键词：结核杆菌利福平基因药物耐受性DNA探针
- 利用PCR结合膜芯片技术检测结核分支杆菌的实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨聚合酶链反应(PCR)结合膜芯片技术用于检测结核分支杆菌的方法。方法:标记生物素的特异性引物,扩增17株菌标本IS6110插入序列的245bp目的基因,结合膜芯片杂交检测结核分支杆菌基因。结果:15株结核分支杆菌标本中有12株扩增出245bp目的基因,2株大肠杆菌及阴性对照标本PCR扩增结果为阴性。经膜芯片杂交,12株结核分支杆菌标本中有11株显色结果为阳性,其余显色结果为阴性。PCR结合膜芯片检测结核分支杆菌的灵敏度为73.3%,特异度为100%。结论:PCR结合膜芯片技术是一种具有发展潜力的检测结核分支杆菌的方法。
- 刘斐周凌云何晓何敏
- 关键词：结核分支杆菌聚合酶链反应
