吴双
- 作品数：26 被引量：100H指数：6
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学轻工技术与工程生物学更多>>
- 塑化剂DEHP诱导HepG2细胞胰岛素抵抗作用的研究被引量：2
- 2016年
- 目的明确邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)染毒对Hep G2细胞胰岛素信号通路活性的影响,预测DEHP诱导人类代谢相关疾病(如2型糖尿病和肥胖)的风险。方法对Hep G2细胞进行持续24 h的DEHP染毒实验,然后回收细胞并分别提取其蛋白和核酸,最后分别通过Western Blot和荧光定量PCR检测胰岛素信号通路关键蛋白和基因的表达情况。结果 DEHP暴露后,Hep G2细胞胰岛素信号通路关键蛋白磷酸化胰岛素受体(p-IR)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达量在10、50、100、500、1 000μmol/L的DEHP作用下均显著减弱,仅5μmol/L组变化不显著。而IR,AKT和GSK3β的基因和总蛋白表达水平在各个染毒组和对照组并无显著差异。结论 DEHP可诱导Hep G2细胞产生剂量依赖式的胰岛素抵抗,这种效应可能是DEHP增加人类2型糖尿病和肥胖发病风险的潜在分子机制之一。DEHP诱导Hep G2细胞出现胰岛素抵抗的效应可能是发生在蛋白质翻译后修饰水平,而非转录或翻译水平。
- 吕子全黄素丽张艳炜张倩吴双邱杨燊柯跃斌
- 关键词：邻苯二甲酸酯HEPG2细胞胰岛素抵抗
- 产A型肠毒素金黄色葡萄球菌的筛选及其重组表达被引量：2
- 2008年
- 目的分离产A型肠毒素金黄色葡萄球菌标准株,克隆和表达金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA),研究其生物学特征。方法应用PCR扩增SEA基因片段,与克隆载体pGEMT-easy连接,亚克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经诱导表达和纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫小鼠获得抗血清,进行重组蛋白免疫原性分析。结果成功克隆SEA全长基因,经DNA序列分析证实与GenBank收录序列具有100%的同源性。表达蛋白相对分子质量为31000,以包涵体形式存在。纯化、复性后获得有活性的rSEA蛋白,rSEA蛋白能够识别天然的SEA。结论SEA基因成功克隆到表达质粒内并表达,rSEA具备抗原性,为制备单抗、诊断试剂及金黄色葡萄球菌致病机制研究奠定了基础。
- 吴双张仁利耿艺介高世同胡章立
- 关键词：蛋白纯化复性
- 金黄葡萄球菌肠毒素A诱导的免疫应答被引量：1
- 2009年
- 目的研究超抗原金黄葡萄球菌A型肠毒素（SEA）在体内诱导的体液免疫反应、T淋巴细胞增殖及免疫无应答的规律和作用。方法利用重组SEA蛋白免疫小鼠，酶联免疫吸咐试验（ELISA）检测特异性抗体及其亚类水平，观察两者的产生过程及变化规律。RT—PCR反应检测免疫后小鼠脾脏内细胞因子的mRNA表达水平，ELISPOT法检测rSEA对脾细胞分泌IFN-γ能力的影响，流式细胞术检测T淋巴细胞表面抑制性受体PD-1的表达。结果BALB／c小鼠在低剂量的rSEA初次免疫后2周，即产生了高水平的特异性抗体，此时体内以体液免疫应答为主，IgG2a／IgG1〈1；而在免疫早期，Th1型细胞因子的mRNA表达水平高于Th2型，以细胞免疫应答为主。短时期内进行再次免疫后脾细胞的IFN-1分泌频率显著下降；流式细胞仪在rSEA激活的T淋巴细胞表面检测到了PD-1（programmed death-1）分子的表达，其表达量随时间及免疫次数增加。结论超抗原SEA初次免疫即能引起强大的体液免疫应答与细胞免疫应答；再次免疫引起了免疫无应答，这与PD-1介导的抑制作用增强有关。
- 吴双张仁利胡章立耿艺介黄达娜
- 关键词：超抗原淋巴细胞增殖免疫无应答
- 深圳市家养猫和犬宠物弓形虫感染及相关因素调查被引量：10
- 2010年
- 目的了解深圳市家养猫、犬宠物的弓形虫感染状况,并探讨饲养相关因素对感染率的影响。方法选择家养宠物猫犬876只,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清弓形虫的循环抗原CAg及其IgG抗体;对宠物主人进行饲养相关行为的问卷调查,并分析影响猫、犬宠物弓形虫感染率的饲养相关因素。结果共调查宠物猫278只和宠物犬598只,弓形虫感染率分别为4.68%和3.34%,特区内外不同行政区域宠物的弓形虫感染率无显著性差异。在各饲养相关因素中,不同来源、年龄和饮食习惯的宠物的弓形虫感染率显著不同。本地购买或繁殖宠物的感染率低,收养的流浪宠物感染率高;随着年龄增大,宠物的弓形虫感染率逐渐增高;仅吃专用食品和熟食的宠物感染率低,有生食、半生食和外出觅食习惯的猫犬感染率高。结论深圳市家养猫犬宠物的弓形虫感染率处于较低水平,无明显城乡差异;不同来源、年龄和饮食习惯宠物的感染率存在着统计学差异。
- 谢桂萍耿艺介张仁利黄达娜高世同张倩吴双
- 关键词：宠物弓形虫
- 塑化剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)通过中枢与外周信号通路诱导C3H小鼠肥胖与甲状腺功能减退的分子机制研究
- [目的]既往研究表明塑化剂DEHP可诱导人类和啮齿动物出现肥胖和甲状腺功能减退，但其内在分子机制不明.本研究的主要目的是探明DEHP诱导肥胖症和甲状腺功能减退的内在分子机制，并尝试探索两种健康风险之间的内在关联.[材料和...
- 吕子全程锦泉黄素丽张艳炜吴双张倩柯跃斌
- 关键词：DEHP肥胖甲状腺功能减退瘦素抵抗
- 傅立叶变换红外光谱鉴别“地沟油”的有效性评估被引量：8
- 2014年
- 收集食用植物成品油、食用植物原油、餐厨废弃油脂和煎炸废弃油脂共137份，并制备精炼“地沟油”17份，采集各类油脂样品的傅立叶变换中红外吸收光谱，通过比较分析各类样品在1711cm-1附近吸收峰的形状差异及171lcm。和1745cm0两处吸收峰的峰高比值的差异，分析造成差异的原因，评估此处吸收峰对鉴别“地沟油”与食用植物油的有效性。结果表明，油脂FTIR在1711cm0的吸收峰，或者1711～1745cm-1处的双峰并非“地沟油”的特征吸收峰形状，而与油脂的酸价有着密切的关系，其强度大小主要取决于油脂样品酸价的高低。当通过“精炼”或“勾兑”的方法降低“地沟油”及其勾兑产品的酸价后，它们在171l～1745cm-1处的双峰形状也就随之消失。因此，基于FT-IR的上述吸4吏峰及其形状还不能有效鉴别“地沟油”与食用植物油。
- 杨永存李浩杨冬燕邓香香吴双邓平建
- 关键词：傅立叶变换红外光谱食用植物油有效性
- 甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷（8-oxo-dG）水平、DNA 5-甲基胞嘧啶（5-mC）含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系，探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法：用5～20μmol/L甲醛作用于A549细胞，用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平，用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果：甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平，但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点，A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后，DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高，而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间，DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5～20μmol/L甲醛染毒8周后，DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系，而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论：甲醛染毒可提高DNA氧化水平，降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中，细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。
- 柯跃斌黄娟朱舟吴双陶功华
- 关键词：甲醛DNA甲基化
- 水产品中无色孔雀石绿的悬液芯片检测方法研究被引量：3
- 2017年
- 目的建立水产品中无色孔雀石绿(LMG)的悬液芯片检测法。方法向聚苯乙烯微球中加入14μg/100μl的LMG抗原,利用碳二亚胺法使抗原与微球偶联构成捕获抗原。加入含LMG的样品,使用1∶800倍稀释的LMG单克隆抗体及藻红蛋白标记的二抗,37℃孵育1 h后在悬液芯片仪上检测平均荧光强度值并计算样品中LMG的含量。结果在10~100ng/ml的线性范围内,所得体系的回归方程为ΔF=2 035.6c+22.4,r=0.999 8。方法的检出限为0.125 ng/ml,加标回收率在88.7%~93.6%之间,RSD为3.2%~7.6%。结论该方法的灵敏度高,特异性好,可作为一种高通量检测的新技术用于水产品中无色孔雀石绿残留的分析。
- 吴双余淑苑吕子全柯跃斌
- 2013—2021年深圳市急性腹泻人群副溶血性弧菌基因组流行病学特征分析被引量：1
- 2023年
- 目的了解2013—2021年深圳市急性腹泻人群副溶血性弧菌的感染状况及基因组流行病学特征。方法对深圳市感染性腹泻监测系统主动监测的急性腹泻病例进行流行病学数据收集和统计,对分离到的副溶血性弧菌菌株进行全基因组测序,划分克隆群并分析血清型,毒力基因及多位点序列型别,采用单核苷酸多态性变异位点差异分析2019—2021年腹泻监测人群的暴发簇。结果2013—2021年深圳市15家哨点医院共监测急性腹泻病例48623例,分离到副溶血性弧菌1135株,阳性分离率为2.3%。全基因组测序共获得852株菌的基因组数据,序列分析获得29种血清型、21种已知ST型和5种新ST型,tdh+trh-菌株占比达93.2%;种群结构包含8个全基因组克隆群(CG),以CG3占绝对优势,其次为CG189。CG3以O3:K6血清型和ST3序列型为主;CG189以O4:KUT、O4:K8血清型和ST189a、ST189序列型为主。2019—2021年共发现13个基因簇,包含154个病例,以及发现30个暴发簇,其中29个暴发簇均由CG3菌株引起。结论副溶血性弧菌是深圳市急性感染性腹泻的主要病原菌,CG3和CG189长期流行并占主导地位,存在被忽略的散在暴发及持续的共同污染来源;针对流行克隆群进行溯源和采取精准防控措施,有望大幅减轻副溶血性弧菌感染引起的腹泻疾病负担。
- 谢丽杨超江敏邱亚群蔡锐胡璐璐姜伊祥王磊陈琼城吴双石晓路扈庆华扈庆华
- 关键词：副溶血性弧菌全基因组测序多位点序列分型毒力基因种群结构
- 潲水油聚合酶链式反应鉴定技术研究被引量：22
- 2011年
- 目的建立特异的潲水油聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法。方法以猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、哺乳动物等动物源性基因及大米物种特异性基因作为靶基因,采用PCR及荧光PCR方法鉴定潲水油。结果 6个自制的粗制潲水油样品全部被鉴定为潲水油,7个疑似潲水油样品中的5个被鉴定为潲水油,而4个正常食用植物油全部被鉴定为非潲水油。结论以潲水油中可能混杂的动物源性基因和大米基因作为靶标,采用普通PCR或荧光PCR方法可有效鉴定潲水油。
- 杨冬燕杨小柯杨永存吴丽明张慧敏张倩张艳炜耿艺介黄达娜吴双邓平建
- 关键词：潲水油聚合酶链式反应
