刘军
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
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- 中国候鸟携带气单胞菌的耐药性与毒力研究
- 引言气单胞菌是革兰氏阴性杆菌,为条件致病菌。主要存在于淡水湖泊和河口环境中,可以从水、鱼、土壤、食物以及无脊椎动物中分离出来[1],候鸟容易从其栖息环境获得并携带气单胞菌。致病性气单胞菌可严重威胁人类的健康,轻症如胃肠炎...
- 梁冰纪雪袁月祝令伟刘军郭学军孙洋
- 基于多组学解析布鲁氏菌BvfA对睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体的影响
- 2024年
- 【目的】明确布鲁氏菌BvfA对宿主睾丸支持细胞(TM4细胞)的损伤作用,以揭示布鲁氏菌对宿主的致病机制。【方法】利用RNA-Seq双端测序、Label-free蛋白组学技术和LC-MS非靶代谢组学技术分析感染布鲁氏菌S19△bvfA与S19菌株的TM4细胞的组学差异,采用KEGG数据库对差异表达蛋白及差异代谢物通路进行分析,并利用平行反应监测(PRM)对蛋白表达量进行验证。【结果】感染S19△bvfA和S19菌株的TM4细胞差异表达基因共400个,差异表达蛋白共422个,差异代谢产物共271种。多组学联合分析发现,S19△bvfA和S19菌株感染TM4细胞差异表达基因、差异表达蛋白和差异代谢产物共同富集的KEGG通路为内源性大麻素信号通路,在该通路中发现S19△bvfA菌株感染TM4细胞的线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体(ComplexⅠ)中有20个蛋白表达量下调。PRM验证结果显示,ComplexⅠ中Ndufb11、Ndufa9、Ndufv1、Ndufv2、Ndufs8和Ndufs2蛋白的表达趋势与Label-free蛋白组学技术测定结果一致。【结论】BvfA在布鲁氏菌感染TM4细胞时能引起转录、蛋白质和代谢水平的变化,布鲁氏菌BvfA使睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体蛋白表达下调。
- 宋青山杨江流刘军贾芳
- 关键词：布鲁氏菌睾丸支持细胞
- 农户种植业规模理论与约束条件的研究
- 朱希刚钱伟曾黄耀辉刘军
- 农户种植业规模问题是关系中国农业生产持续稳定发展和逐步实现农业现代化的重大现实问题。该研究首先对农户种植业规模的基本概念和规模效益运动规律进行了理论研究，提出用农户在从事种植业生产中所拥有或占用的固定投入的数量来定义农户...
- 关键词：
- 关键词：农户种植业规模化种植
- bvfA基因对布鲁氏菌S19株生物学特性及睾丸支持细胞影响的研究被引量：2
- 2022年
- 为研究布鲁氏菌毒力因子A(bvfA)对牛布鲁氏菌(B.abortus)S19菌株生物学特性及其感染睾丸支持细胞(TM4细胞)的影响,本研究利用振荡比浊法(D值法)测定S19(亲本株)、S19ΔbvfA(缺失株)及S19ΔbvfA/bvfA(回补株)3株菌的生长曲线;利用平板菌落计数法测定菌株对环境的应激水平、对TM4细胞的侵入能力及损伤性和对小鼠毒力的影响。结果显示:缺失株较亲本株和回补株生长速度显著降低(P<0.05);缺失株在热、高盐、高渗、强酸和多粘菌素B条件下生长均受到抑制,而在氧化应激条件下生长良好(P<0.05)。感染TM4细胞3 h时,缺失株未能侵入TM4细胞;12 h时,缺失株侵入TM4细胞的数量少于亲本株(P<0.01);24 h和48 h时,3株菌侵入TM4细胞的数量无显著性差异(P>0.05)。在感染12 h和24 h时,感染缺失株的TM4细胞死亡率高于感染亲本株的细胞死亡率(P<0.01);在48 h时,感染缺失株和感染亲本株的TM4细胞死亡率无显著性差异(P>0.05)。将各菌株腹腔注射感染小鼠,结果显示感染2周时缺失株感染小鼠的脾指数明显低于亲本株(P<0.01),且感染1周、2周和4周时,感染缺失株小鼠的脾分离菌量均小于亲本株(P<0.05)。本研究结果首次证实:bvfA基因参与调控布鲁氏菌S19菌株对环境的适应性,影响S19菌株对TM4细胞的侵入,抑制TM4细胞的死亡以维持细菌的生长增殖及其缺失能够降低S19菌株对小鼠的毒力。本研究结果为布鲁氏菌致病机制和bvfA基因的功能解析提供实验依据。
- 贾芳王鑫王玉炯刘军周学章
- 中国候鸟携带大肠埃希菌的耐药性及遗传背景分析
- 引言随着抗菌药物的广泛使用,抗生素耐药(AMR)成为威胁人类健康的重要因素之一[1]。候鸟在耐药菌的传播过程中起着重要的流行病学作用,是耐药菌的转运者和贮藏库,已有研究证实候鸟在迁徙过程中可携带并传播耐药基因[2,3]。...
- 袁月纪雪梁冰祝令伟刘军郭学军孙洋
- 布鲁氏菌临床分离菌株的耐药性分析
- 引言布鲁氏菌(Brucella)是一种革兰氏阴性胞内寄生菌,由于其流行范围广、致病性强且感染后治疗困难等特点对公共卫生健康以及畜牧业造成了严重威胁[1]。布鲁氏菌可引起布鲁氏菌病,临床表现为发热,能够造成不孕不育、关节损...
- 马涵睿纪雪王鑫孙洋祝令伟刘军
- 布鲁氏菌BP26蛋白细菌样颗粒疫苗的制备和免疫学评价
- 2024年
- 为了构建布鲁氏菌外膜蛋白BP26细菌样颗粒候选疫苗BLPs-BP26,并评价其免疫原性,本试验首先分别扩增羊种布鲁氏菌16M株编码BP26蛋白的整个基因序列和乳酸乳球菌MG1363株编码肽聚糖锚钩蛋白(PA)的整个基因序列,通过重叠延伸PCR技术将bp26基因与PA基因连接构建融合基因bp26-PA,将融合基因bp26-PA克隆至pET-28a原核表达载体并诱导表达融合蛋白BP26-PA。将表达正确的BP26-PA融合蛋白与细菌样颗粒(BLPs)结合构建BLPs-BP26,通过SDS-PAGE、Western blot、间接免疫荧光和冷冻超薄切片对BLPs-BP26进行鉴定。将BLPs-BP26免疫小鼠,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠特异性IgG抗体水平,实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)分析免疫小鼠脾脏组织中干扰素γ(IFN-γ)和白介素2(IL-2)的基因转录水平,ELISA方法检测免疫小鼠血清中IFN-γ和IL-2的蛋白表达水平。鉴定结果显示,BP26-PA蛋白成功展示在BLPs表面;免疫小鼠试验结果显示,小鼠血清特异性IgG抗体效价最高可达1∶1 024 000;与PBS组相比,BLPs-BP26组免疫小鼠脾脏组织中IFN-γ和IL-2基因的转录水平均极显著升高(P值分别为P<0.000 1和P<0.01),小鼠血清中IFN-γ的表达水平极显著升高(P<0.000 1)。结果表明,BLPs-BP26能刺激小鼠产生高水平的特异性IgG抗体,并可诱导小鼠产生细胞免疫应答。本试验为开发具有良好免疫原性且无安全隐患的布鲁氏菌新型疫苗提供了新的思路。
- 林海涂飞李楠孙洋姜博文纪雪刘军
- 关键词：布鲁氏菌
