魏薇
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域:理学自动化与计算机技术生物学农业科学更多>>
- 苏云金芽孢杆菌伴孢晶体中20-kb DNAs上染色体基因的鉴定被引量:1
- 2007年
- 已有的研究表明苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株菱形晶体中含有与原毒素紧密结合的20-kb DNAs,利用PCR-RFLP分析发现在这些20-kb DNAs上含有cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa和cry2Ab基因.本研究利用特异引物从4.0718菌株中20-kb DNAs上分别扩增出带有自身调控序列的cry1Ac和cry2Aa基因,并将其分别电转至Bt无晶体菌株Cry-B中获得重组菌株Cry-B(pHC42)和Cry-B(pHC39).SDS-PAGE和透射电镜分析表明这两种重组菌株能够分别产生由130-kDa的Cry1Ac原毒素形成的菱形晶体以及由65-kDa的Cry2Aa原毒素形成的方形晶体.毒力生测的结果显示,这两种菌株的表达产物对棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫具有预期的杀虫效果.重组菌株分别形成的两种晶体经不同的缓冲液溶解后能释放出与20-kb DNAs紧密结合的原毒素,同时在20-kb DNAs上均可检测到源于Bt染色体的spo0A和nprA基因片段.
- 孙运军袁志明夏立秋魏薇付祖姣黄璠丁学知胡胜标
- 关键词:苏云金芽孢杆菌伴孢晶体染色体
- 营养因子对苏云金芽胞杆菌4.0718产杀虫蛋白Cry1和Cry2的影响
- 2008年
- 为了提高杀虫蛋白Cry1和Cry2产量,首先采用Plackett-Burman设计筛选出发酵培养基中影响苏云金芽胞杆菌4.0718表达毒蛋白Cry1的显著性因子为黄豆饼粉和MnSO4?H2O,Cry2的产量在该配方中无显著性影响因子。然后利用最速上升实验逼近Cry1最大产出区域,找到后续试验中心点。最后通过响应面优化得到黄豆饼粉和MnSO4?H2O的最佳浓度为11.5g/L和0.02g/L,使Cry1和Cry2产量分别达到0.32mg/mL和0.11mg/mL,比原优选配方产量提高了两倍多。该优化配方发酵液对棉铃虫的半致死浓度(LC50)为1.09μL/mL,杀虫活性比原优化配方显著提高。
- 刘飞夏立秋丁学知易勇莫湘涛魏薇
- 关键词:苏云金芽胞杆菌CRY1CRY2响应面优化
- 苏云金芽孢杆菌伴孢晶体中20-kb DNA来源的初步研究
- 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称 Bt)重组菌株HD73(pHC39)能同时产生双金字塔形和立方体形伴孢晶体,其晶体蛋白分别仅由rylAc和cry2Aa基因编码形成。本研究对双金字塔形和...
- 魏薇
- 关键词:苏云金芽孢杆菌离子交换层析
- 文献传递