魏晓静
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 盘基网柄菌尿囊酸酶基因表达产物的纯化及多克隆抗体制备
- 盘基网柄菌是一种“土壤阿米巴”，以吞食细菌为生。在营养丰富条件下，以单细胞形式存在;一旦食物匮乏，单个细胞聚集成多细胞体，细胞历经细胞丘、蛞蝓体、拔顶阶段完成发育和分化过程，最终形成由孢子细胞和柄细胞组成的子实体，在合适...
- 魏晓静
- 关键词：盘基网柄菌尿囊酸酶基因表达
- 文献传递
- AK127突变细胞亚显微结构观察
- 陈能星魏晓静刘伟侯连生
- 盘基网柄菌尿囊酸酶基因的克隆、表达及多克隆抗体制备
- 陈能星魏晓静刘伟侯连生
- 盘基网柄菌allC的克隆、表达和多克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 运用RT-PCR技术从盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)总mRNA中克隆到了尿囊酸酶基因(allC),该基因编码区开放读框长1 100bp,编码的蛋白约42kD.由于是在野生型和突变型细胞中差异表达的片段,表明该基因在盘基网柄菌多细胞发育中起到重要作用,因此将allC克隆入融合表达载体pET-32a(+),在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达带有6个组氨酸标签的尿囊酸酶(ALC)融合蛋白,经镍柱亲和层析,获得了电泳纯蛋白.用纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.ELISA测得制备的抗ALC蛋白的多克隆抗体的效价可达1∶64 000,Western Blotting检测证明该抗体有较强的针对ALC蛋白的专一性.这些数据表明重组质粒表达的ALC融合蛋白具有良好的抗原性,制备ALC的多克隆抗体有良好特异性和效价,能够满足针对ALC免疫印迹和细胞内定位检测等实验要求,为深入研究ALC蛋白在盘基网柄菌多细胞发育的功能作用提供了有力工具.
- 陈能星魏晓静刘伟侯连生
- 关键词：盘基网柄菌尿囊酸酶原核表达蛋白纯化多克隆抗体
