陈雪玉
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
- 供职机构:西安交通大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 混合5'-核苷酸的分离与检测
- :通过建立的RP-HPLC检测方法鉴定单核苷酸分离效果。 方法:以核酸酶P1酶解RNA产物为材料,对离子交换树脂分离混合5’-核苷酸的工艺条件进行研究。 结果:阳离子交换树脂NH-1可使4种单核苷酸有效分离,...
- 李黎莫晓燕陈雪玉
- 关键词:阳离子交换树脂反相高效液相色谱梯度洗脱
- 混合5’-核苷酸的分离与检测被引量:2
- 2010年
- 以核酸酶P1酶解RNA产物为材料,对离子交换树脂分离混合5’-核苷酸的工艺条件进行研究,并通过建立的RP-HPLC检测方法鉴定单核苷酸分离效果。结果表明,阳离子交换树脂NH-1可使4种单核苷酸有效分离,洗脱顺序依次为UMP→GMP→CMP→AMP;最佳分离条件为:色谱柱径高比=1∶20,RNA酶解液上样浓度20g/L,吸附时间8h,洗脱流速0.5mL/min。确定RP-HPLC C18反相柱的色谱条件为:流动相KH2PO4-甲醇,在30mmol/L KH2PO4(pH 5.5)以及0.5mL/min流速条件下,按照KH2PO4∶甲醇=100∶0→97∶3,15min,97∶3→95∶5,1min进行梯度洗脱。通过外标法对混合单核苷酸的分离效果进行检测,证明增加吸附时间是改善分离效果的重要因素。
- 李黎莫晓燕陈雪玉
- 关键词:阳离子交换树脂反相高效液相色谱
- 核酸酶P1酶解RNA工艺条件的优化被引量:2
- 2010年
- 采用桔青霉发酵生产核酸酶P1,分别探讨底物浓度、酶浓度、pH、酶解温度、酶解时间,以及二价金属离子等因素对核酸酶P1酶解酵母RNA生产5'-核苷酸效果的影响;在此基础上通过正交设计实验优化酶解工艺条件。实验结果显示,六种金属离子中仅有Zn2+对核酸酶P1催化活性有明显促进作用;核酸酶P1酶解RNA的优化条件为:底物浓度35 g/L,反应初始pH 5.6,酶浓度8%,反应温度75℃,根据此条件酶解反应8 h,酶解效率与优化前比较提高155.6%。
- 陈雪玉莫晓燕李黎
- 关键词:核酸酶P1RNA酶解条件