郑新民
- 作品数：271 被引量：434H指数：10
- 供职机构：湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 猪导入人类促衰变因子(hDAF)的整合与表达被引量：11
- 2000年
- 将人类促衰变因子 ( human decay accelerating factor,h DAF)基因显微注入 51 7枚猪的受精卵 ,移植到2 6头受体母猪的输卵管内。 2 1头怀孕 ,产仔 93头。产仔后 ,取仔猪的耳或尾组织 ,提取总 DNA。以 5′-TGGCGAGAAGGACTCAGTGATCT-3′和 5′-TGAACTGTTGGTGGGACCTTGGA-3′为引物 ,进行 PCR扩增 ,有 1 8头显示阳性。转基因效率为 3 .5%( 1 8/ 51 7)。对存活的 1 4头转基因猪用免疫荧光法进行检测 ,并采用 MPIAS-50 0多媒体彩色病理图文分析系统进行图像分析 ,其中有 7头的动脉肌肉层中显现有荧光 ,其平均灰度在 1 2 7.3～ 1 70 .
- 魏庆信樊俊华郑新民陈付学熊忠良华文君曹军平李文化孙方臻
- 关键词：转基因猪基因导入异种器官移植
- 利用渗透压研究猪卵母细胞发育过程中核迁移规律
- 2016年
- 本研究采用高渗操作液（氯化钠）处理体外成熟卵母细胞。结果表明,发现培养42 h的卵母细胞,中期核与第一极体刚开始分离。培养44 h的卵母细胞,中期核与第一极体已经分离,达到15°。培养46 h的卵母细胞,中期核与第一极体之间的角度达45°。培养48 h的卵母细胞,中期核与第一极体之间的角度达到近90°,中期核开始向卵母细胞中迁移。经过高渗处理的卵母细胞经过后续操作后可以得到克隆个体。结果表明,利用体外成熟培养42-44 h的卵母细胞进行去核操作,可以达到近100%的去核效率,而不会影响胚胎的正常发育。
- 肖红卫华再东张立苹李莉刘西梅任红艳华文君毕延震郑新民
- 关键词：猪卵母细胞体外成熟核移植克隆胚胎
- 猪分级卵母细胞体外成熟时间规律的研究被引量：2
- 2011年
- 试验根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数,把COCs分成A、B、C和D级,A、B级用于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,C级用于体外分别培养24、32、38、44、48、54和60 h,观察它们不同时间排出极体数,然后将排出极体的卵母细胞孤雌激活。结果发现,A和B级COCs培养48 h时成熟率最高（83.2%和78.0%）,明显高于同级水平培养24、32和38 h的成熟率;不同级别COCs体外培养相同时间,A与B级成熟率差异不显著（P〉0.05）,但二者与C级的成熟率差异显著（P〈0.05）;体外培养48 h COCs卵裂率最高（81.7%）,与培养38 h前的卵裂率差异显著（P〈0.05）。结果表明,A、B级卵母细胞更适于体外培养,能获得高的成熟率和卵裂率,COCs周围颗粒细胞对卵母细胞的成熟有显著影响;COCs培养38 h之前,部分虽能看到极体,但激活后卵裂率极低,说明卵母细胞并未真正成熟,通常通过排出极体判断卵母细胞成熟是不够准确的,COCs体外培养44~48 h是成熟的最佳时期,能为体细胞核移植提供大量优质的MⅡ期卵母细胞。
- 华再东郑新民魏庆信许厚强乔宪凤刘西梅李莉肖红卫王亚刚
- 关键词：体外成熟极体孤雌激活
- 母猪生殖对策的初探被引量：1
- 2018年
- 为了研究哺乳动物生殖对策,以母猪生殖记录为研究对象,对母猪不同胎次间产仔数的变化等进行研究。研究发现,在母猪的不同胎次间存在一定规律。通过优化每次繁殖过程所产生后代的数量,结果将身为发现哺乳动物对外界环境的感知和自适应机制奠定基础。
- 肖红卫华文君华再东刘西梅毕延震任红艳李莉张立苹郑新民
- 关键词：生殖对策母猪不同胎次产仔数
- 提高转HSA基因小鼠效率的研究
- 2005年
- 将无基因的序列CIT987SK-384D8(30号)和结构特异的内切酶基因hFEN1穴36号雪与HSA的cDNA(26号)进行混合注射来制备转HSA小鼠动物模型,旨在提高转HSA基因效率。结果表明:无基因的序列CIT987SK-384D8对HSA的整合基本无影响穴P>0.05雪,结构特异的内切酶基因hFEN1可以显著提高转HSA基因效率穴P<0.01雪。
- 李莉郑新民褚晓红周荆荣
- 关键词：小鼠
- 人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达
- 2006年
- 目的研究人bcl-xL基因在显微注射所产生的子代小鼠中的整合、转录和表达情况。方法采用PCR和Southern blot方法检测人bcl-xL基因在小鼠体内的整合;RT-PCR方法检测它们的bcl-xL mRNA水平;用Western blot及免疫组化法检测目的蛋白的表达情况。结果在显微注射所产生的转基因小鼠中,有4只为Southern blot检测阳性,并且在这4只小鼠及其子代中均检测到人bcl-xL的mRNA和过表达的目的蛋白。结论由于在这些小鼠中既有外源基因的整合,又有其mRNA和蛋白质的表达,所以,它们是真正的转基因动物。
- 王芙蓉姜永生肖文伍张苏明袁慧赵浩斌郑新民魏庆信
- 关键词：转基因小鼠基因整合基因表达
- 动物基因组编辑及其应用研究进展
- 2019年
- 基因组编辑技术已成为研究人员进行生物和生物医学研究的强大武器。为了进一步改善和拓展其功能,科学家们在多种生物个体上进行了测试,优化了多种基因编辑工具递送策略,并且已经研发出了多种方案来确保基因组编辑的准确性。本研究回顾了基因组编辑技术的历史里程碑,讨论了出现的相关技术应用,最后,本研究还预测了未来基因组编辑技术的发展方向,为基因组编辑技术的未来发展提供了一个崭新的视角。
- 任红艳华再东毕延震郑新民
- 影响小鼠超数排卵的若干因素被引量：28
- 2004年
- 分析了激素剂量、激素注射间隔时间、发情周期、季节和温度等因素对小鼠超排效果的影响。结果表明:PMSG与HCG剂量为10IU时,见栓小鼠平均获卵数(39.6枚),显著高于5IU(27.2枚)和15IU(25.5枚)激素剂量;PMSG与HCG注射间隔时间46h与48h见栓小鼠平均获卵数(分别为35.7枚和38.0枚)差异不显著;当激素注射时间间隔为50h时,见栓小鼠平均获卵数(20.3枚)显著下降;发情周期不同阶段开始超排效果不同,发情前期开始超排,其见栓率(82％)、见栓小鼠平均获卵数(37.9枚)均显著高于其他情期;当环境温度维持在(20±5)℃时,不同季节小鼠超排效果无显著差异;冬季鼠房温度在(20±2)℃时,小鼠超排见栓率(77％)和见栓小鼠平均获卵数(33.2枚)均极显著高于环境温度为(10±2)℃的超排效果。
- 李聚学魏雁魏庆信郑新民曹斌云
- 关键词：小鼠超数排卵发情周期环境温度
- 杜洛克猪品系氟烷基因型的测定
- 1998年
- 猪应激综合症由氟烷基因型决定,有三种基因型:阳性(nn)、阴性(NN)和杂合子(Nn),nn型产生应激综合症.采用聚合酶链反应(PCR)扩增一段含有突变位点的氟烷基因片段,用限制性内切酶酶切分析,测定杜洛克猪品系37头,有3头为杂合子,34头为阴性.
- 华文君梅书棋徐子清郑新民
- 关键词：应激综合症氟烷基因型PCR扩增酶切
- 转绿色荧光蛋白标记基因猪整合检测的研究
- 2008年
- [目的]为转基因猪生产的整合效率、外源目的基因表达水平、目的基因在猪体内组织特异性表达分布等相关领域的进一步研究奠定基础。[方法]用显微注射法将GFP标记的转基因猪表达载体PM1导入湖北白猪和通湖猪1-细胞、2-细胞胚胎中,胚胎移植妊娠后生产仔猪,取耳或尾组织样提取基因组总DNA,用PCR法检测PM1在猪基因组中的整合情况。[结果]在所有生产的78头仔猪中,有6头猪用PCR检测为转PM1基因阳性猪,这6头猪在3次PCR扩增反应中都得到650 bp目的扩增片段。其他样品没有得到目的扩增片段的为阴性猪。[结论]载体PM1可以用于携带外源基因进行转基因猪生产。
- 华文君乔宪凤郑新民王亚刚李莉肖红卫
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因猪
