赵艳景
- 作品数:39 被引量:217H指数:6
- 供职机构:淮海工学院海洋学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室更多>>
- 发文基金:江苏省海洋生物技术重点建设实验室基金江苏省自然科学基金江苏省基础研究计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 暴露于异丙隆中文蛤差异表达基因的研究被引量:1
- 2009年
- 为了研究文蛤经异丙隆处理后引起的细胞基因表达变化,探索文蛤暴露于农药后分子水平上基因的开放、关闭或表达量的改变,以寻找和发现有价值的指示农药污染的生物标记物基因。在恒定温度(25℃)条件下驯化文蛤7d,将驯化后的文蛤分为2组(每组20个),给药组文蛤暴露于添加除草剂异丙隆的海水中处理30d,对照组文蛤暴露于天然海水中处理30d,用酸性酚-硫酸氰胍-氯仿提取法纯化文蛤鳃总RNA,用4种锚定引物,以总RNA为模板在反转录酶的作用下合成cDNA第一链,以cDNA第一链为模板,在锚定引物和随机引物的作用下连续进行2轮PCR反应,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,银染法显色。对聚丙烯酰胺凝胶电泳显示的差异条带进行回收,并对差异基因片段进行第2次扩增,经琼脂糖电泳后回收基因片段。结果共得到cDNA扩增片段约400条,其中有60余种基因片段的表达发生了明显的差异。在文蛤适应除草剂污染过程中有12个基因表达上调,有11个基因表达下调,有22个基因片段只在试验组表达,有23个基因片段只在对照组表达。基因差异片段可能与指示农药污染的生物标记基因的表达有关。
- 赵艳景胡虹王颖
- 关键词:文蛤异丙隆DDRT-PCR聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
- 抗肿瘤活性海洋放线菌的筛选及菌株HGF26的初步鉴定被引量:4
- 2009年
- 对采自连云港海域的海泥样品进行放线菌选择性分离,用其发酵液进行抗肿瘤活性筛选,并对活性较好的菌株HGF26进行了初步鉴定。从海泥样品中共分离得到放线菌78株,以人肝癌细胞HepG2为靶标,活性筛选得到细胞毒活性达60%以上的阳性菌株3株,以其他5株肿瘤细胞为靶标的复筛表明,菌株HGF、26的发酵液对多种肿瘤细胞具有显著的细胞毒活性,其中对胃癌细胞BGC823的细胞毒活性为79%,活性产物具有较好的酸碱和热稳定性。通过对菌株的培养特征、形态特征、生理生化特征和细胞壁成分分析,将菌株HGF26初步鉴定为微白黄链霉菌的海洋变种。
- 郭雷王淑军阎斌伦张宜涛吕明生赵艳景
- 关键词:海洋放线菌抗肿瘤活性菌种鉴定
- 一种简单快速的cDNA文库构建方法被引量:3
- 2005年
- 目的:建立一种以LDPCR(longdistancePCR)为基础的cDNA文库的快速构建方法。方法:以鲨鱼再生肝组织为材料获得总RNA,用偶联有Oligo(dT)的磁珠纯化mRNA后,利用含BamHⅠ酶切位点的Oligo(dT)16引物在逆转录酶MMLV的作用下合成cDNA第一链,进而利用末端转移酶在合成的cDNA第一链的3′末端引入polydC尾;以含BamHⅠ酶切位点的Oligo(dT)16和含HindⅢ酶切位点的Oligo(dG)10为引物,利用LDPCR合成双链cDNA,双链cDNA经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,通过T4DNA连接酶连接到经相同双酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库,对文库的容量、重组率以及多样性进行分析。结果:通过本方法构建的cDNA文库容量约为5.84×105个/μgdscDNA,重组率为96.7%;对随机提取的30个克隆质粒的插入序列进行分析,共获得25个不同的cDNA序列,且未见重复序列。结论:本法构建的cDNA质粒文库具有快速、简单的特点,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析。
- 赵艳景胡亚楠王颖刘睿叶波平王旻吴梧桐
- 关键词:CDNA文库文库构建
- 鲨鱼再生肝组织cDNA文库的构建与差异表达基因的筛选
- 鲨鱼是海洋中较为常见的数量庞大的鱼种之一,长期的研究发现:鲨鱼对肿瘤细胞具有极强的免疫力,即使鲨鱼长期生活在具有强烈致癌物质的环境中,也不会致癌.由于肝脏是动物体内的一种重要的杀菌、解毒器官,而鲨鱼肝脏重量占其体重的25...
- 赵艳景边杉胡亚楠叶波平王旻奚涛吴梧桐
- 关键词:鲨鱼CDNA文库肝组织差异表达基因
- 文献传递
- 条纹斑竹鲨鱼肝再生差异表达新基因NT7.1的原核表达及产物活性分析
- 2009年
- 目的NT7.1是一种鲨鱼肝脏再生过程中表达下调的功能基因片断,编码一个由134个氨基酸残基组成的假设蛋白。本研究的目的在于获得其重组蛋白,并检测该重组蛋白对肿瘤细胞增殖的作用。方法利用T4DNA连接酶将该编码序列连接到pET-28a载体中,通过CaCl2法转化到E.coli BL21中获得表达该基因的工程菌;工程菌经IPTG诱导表达,获得的包涵体蛋白经金属螯合亲和层析方法纯化和复性;进一步通过MTT法检测纯化后的重组蛋白对人胃腺癌细胞株BGC-823、急性粒细胞白血病细胞株HL-60、人肺腺癌细胞株A549和肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响。结果构建的基因工程菌株经1mmol·L-1的IPTG诱导6h后,可表达一大小约为18kDa的蛋白,表达量约占菌体总可溶性蛋白的40%。纯化后的重组NT7.1体外对4种肿瘤细胞的增殖均具有明显的抑制作用,其对BGC-823、HL-60、A549和SMMC-7721的IC50分别为2.66、0.44、2.96和4.99 nmol·L-1。结论NT7.1的原核重组表达产物对肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用。
- 刘丽加赵艳景袁瑞英王颖边杉吴梧桐叶波平
- 关键词:抗肿瘤活性
- 褶皱臂尾轮虫微核制备技术
- 本发明是一种褶皱臂尾轮虫微核的制备技术,其特征在于,水体中环境污染物(如重金属镉离子)可以对水体中大量生存的浮游生物--轮虫产生毒性,在细胞水平上表现为轮虫卵母细胞的核分裂受到影响,可以产生小的细胞核,即微核,统计这种微...
- 高焕陈建华徐静李晓英赵艳景阎斌伦
- 文献传递
- 一种来自于鲨鱼再生肝脏的新功能基因及其重组产物对肝损伤的保护作用
- 叶波平林克江王诚王颖金国虔吴梧桐赵艳景边杉余江河李谦胡亚楠
- 该研究利用现代生物技术手段从鲨鱼肝脏中鉴定并获得一新功能茵在,在对其结构与功能的分析基础上,推测其表达产物具有降酶保肝和促进肝细胞增殖的作用,并进一步利用动物模型对该基因重组产物的药效活性进行了验证,目前尚未见有关该基因...
- 关键词:
- 关键词:鲨鱼新基因肝保护作用
- 鲨鱼再生肝组织中差异表达基因及其产物的活性研究
- 鲨鱼是我国沿海较为常见的数量庞大的鱼种之一,长期的观察发现:鲨鱼很少患有肿瘤或其它各类疾病。调查数据显示:鲨鱼肝脏占其体重的1/5,占内脏器官总重量的70%以上,由于肝脏是生物体重要的排毒解毒器官,我们推测其中含有大量的...
- 叶波平边杉赵艳景王颖奚涛王吴梧桐
- 关键词:基因表达活性物质
- 文献传递
- 缢蛏YC-2蛋白的提取及抗氧化作用研究被引量:3
- 2010年
- 以新鲜缢蛏(Sinonovacula constricta)为材料,经水萃取、(NH4)2SO4盐析、DEAE离子交换层析、Sepharose CL-6B凝胶层析、冻干浓缩。结合SDS-PAGE电泳技术,硫代巴比妥酸(TBA)法初步鉴定各个组分的抗氧化活性,并用Bradford法进行蛋白的定量。结果表明,80%饱和度(NH4)2SO4盐析得到的组分经离子交换层析以及凝胶层析得到一个蛋白纯品YC-2,具有2个亚基,大亚基的分子质量为61.23 ku,小亚基的分子质量为45.39 ku,YC-2蛋白的分子质量为106.62 ku,而且其具有较高的抗氧化活性,在0.627 g/L时对.OH清除率达99.7%。
- 赵艳景裴波胡虹王颖
- 关键词:分离纯化抗氧化活性
- 高校省级生物技术重点实验室对本科生开放的研究与实践被引量:3
- 2009年
- 对高校省级生物技术重点实验室向本科生开放的必要性、具体实施办法、开放的程序以及开放的管理进行论述。
- 赵艳景阎斌论