赵晓祥 作品数:35 被引量:452 H指数:9 供职机构: 黑龙江省科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 化学工程 医药卫生 更多>>
简单快速分离无RNA的大肠杆菌质粒DNA的方法 被引量:1 1994年 本文介绍一种简单快速分离质粒DNA方法。此方法有两个主要步骤。用这种方法分离的质粒DNA纯度高、无RNA,并可用于酶切、连接等操作。 赵晓祥 杨志兴关键词:DNA 质粒DNA 大肠杆菌 一株具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillus Subtilis)的研究——液体发酵条件的选择 被引量:46 1997年 本文主要报告了,以BacilusSubtilisHW-12为试验菌株,在液体发酵中,所确定的发酵条件为:碳源是木糖,氮源是大豆胰蛋白胨,发酵液pH7.0,培养温度37℃,培养时间96小时。在这样的发酵条件下。 傅俐 李荣萍 李晶 张淑梅 张云湖 赵晓祥 杨志兴关键词:枯草杆菌 尿激酶 发酵 鲤鱼生长激素基因的改造及其在大肠杆菌中的表达 被引量:6 1995年 用聚合酶链式反应(PCR)改造了鲤鱼生长激素基因,扩增出编码鲤鱼生长激素成熟肽的序列,并将此序列克隆到pBluescriptⅡKS质粒中,序列分析后,亚克隆到大肠杆菌表达载体PBV(220)中。经SDS—PAGE和薄层扫描,结果表明鲤鱼生长激素基因已在大肠杆菌中获得表达。鲤鱼生长激素成熟肽的分子量为22000道尔顿,表达率占细胞总蛋白的18%以上。 赵晓祥 张淑梅 杨学成 李晶 李荣萍 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 大肠杆菌 基因表达 液体发酵生产溶栓纳豆激酶技术 张云湖 李晶 李荣萍 赵晓祥 张淑梅 该成果从已获得的12株具有纤溶活性的枯草杆菌中筛选出2株产纳豆激酶、酶活性高的菌株,摸索出液体发酵罐产生纳豆激酶生长最适条件:pH值6.5,溶氧通气量1.5升/分钟,培养温度30℃,搅拌速度240转/分钟,生长时间在58...关键词:关键词:纳豆激酶 酶制剂 发酵 甲醇酵母基因表达系统的研究进展 被引量:73 1999年 在大肠杆菌这一传统表达系统被频繁用作研究各种基因表达时,一种新型且有效的基因表达系统——甲醇酵母正逐渐引起人们的注意。此系统不仅具有高表达、高稳定、高分泌的特点,而且其宿主甲醇酵母——巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)具有高密度生长的特性。因此近年来此表达系统的研究得到迅速发展,在其中表达了多种具有商业价值的外源蛋白。本文对甲醇酵母基因表达系统的特点及研究进展作一简要综述。 李晶 赵晓祥 沙长青 张淑梅 田洁萍关键词:甲醇酵母 基因表达系统 外源性 蛋白质 鲤鱼生长激素基因的PCR扩增、克隆及其序列比较 被引量:4 1996年 从鲤鱼(Cyprinus carpio)脑垂体中分离其总RNA,经反转录成为第一条链cDNA。以第一条链cDNA为模板,以合成的两段29个寡聚核苷酸为引物,再经过PCR扩增,合成了鲤鱼的生长激素基因,并把其克隆到大肠杆菌表达载体(p^(Blue-scriptⅡ KS+/-))上。序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,编码210个氨基酸,其中含有22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟GH序列。我们所克隆的鲤鱼GH基因与Koren发表的鲤鱼GHcDNA的序列在编码区完全一致,但是与Chao发表的鲤鱼GHcDNA比较,在编码区核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95.6%和96.7%。 赵晓祥 李晶 李荣萍 张淑梅 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 克隆 cGH Gene Transfer and PCR Detection in Crucian Carp 被引量:3 1996年 By inserting the CMV with HSV TK promoter into the plasmid pBlue-cGH which contained cGH gene, a chimeric expression vector was constructed for transgenic fish. After the vector was transferred into fertilized eggs of crucian carp by means of microinjection, the transgenic crucian carp was obtained. The result of PCR detection showed that the growth hormone gene of the exogenous carp was integrated into the genome of crucian carp, and the transgenic crucian carp displayed enhancement of its growth. 赵晓祥 张淑梅 李晶 李荣萍 杨志兴鲤鱼(Cyprinus carpio)生长激素基因的亚克隆及其序列分析 被引量:5 1995年 本文对PCR扩增的668bp的DNA片段进行了亚克隆,,然后以Sanger双脱氧中止法为原理,利用美国ABI公司370A自动核酸序列分析仪,确定了668hP的核苷酸序列。序列分析表明鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,并推测其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟多肽。鲤鱼生长激素基因的酶切图谱和序列分析的结果都证明我们已获得了全长的鲤鱼生长激素基因。 赵晓祥 杨学成 李晶 李莹 张淑梅 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 亚克隆 DNA 转美州拟鲽抗冻蛋白基因(AFP)番茄的叶片电导率测定 被引量:9 1997年 对转美州拟鲽抗冻蛋白基因(ADP)的第三代(D3)番茄及其对照,经低温处理后进行幼苗叶片组织电导率测定,发现转基因各组电导率均比对照明显降低,说明导入的AFP基因已经表达并使番茄获得抗寒性。 傅桂荣 张初 赵晓祥 汪清胤 黄永芬关键词:番茄 转基因番茄 抗冻蛋白基因 电导率 低温对转抗冻蛋白基因罗非鱼影响的初步研究 被引量:11 1996年 本文阐述了逐渐降低水温对转抗冻蛋白基因罗非鱼生存影响的初步观察结果。用30尾转抗冻蛋白基因罗非鱼,从22℃开始,以2℃/h下降至7℃,发现在9℃有6尾死亡,7℃又有10尾死亡,有14尾存活,但有不同表现,从存活14尾鱼和死亡的6尾鱼中提取总DNA,作原位杂交,有10尾为阳性,再从这10尾呈阳性鱼肝中分离总RNA,作RNA—DNA杂交并未发现阳性结果,表明有外源DNA的整合,但未发生转录或弱的转录,不过有部分转基因鱼表现出具有耐低温能力。 李晶 李荣萍 张淑梅 赵晓祥 张云湖 杨志兴关键词:罗非鱼 转基因鱼 全文增补中