贺兵
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：西北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一株小麦内生真菌的鉴定及其发酵产物对兔软骨细胞的影响被引量：2
- 2015年
- 本研究对分离自青海大骨节病区小麦籽粒中优势内生真菌6-5-1菌株进行菌种鉴定并探讨其发酵产物对兔膝软骨细胞的影响。通过形态学观察及ITS序列分析进行菌种鉴定;其发酵产物经75%乙醇提取,并将乙醇总提物用3种不同有机溶剂(石油醚,乙酸乙酯和乙醚)进行萃取,分别作用于兔软骨细胞;四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliumbromide,MTT)显色法检测细胞存活率,甲苯胺蓝(toluidine blue,TB)染色法和免疫组化法分别检测蛋白聚糖和胶原蛋白的表达;RT-PCR检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原m RNA的表达。经鉴定6-5-1菌株为三线镰孢霉(Fusarium tricinctum)。其发酵产物乙醇总提物对细胞存活率有较强的抑制作用,对蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的合成与m RNA的表达均有抑制作用;其他萃取分部对软骨细胞损伤程度各不相同,石油醚分部作用最强,且各分部的影响作用均弱于乙醇总提物。可见6-5-1菌株代谢产物中应该有多种对软骨细胞产生损伤的物质,且这些物质可能存在协同作用。石油醚分部中可能存在已知损伤软骨细胞毒素以外的其他物质。
- 胡锦涛贺兵赵玉濛成博伦张枫张燕殷红
- 关键词：内生真菌发酵产物软骨细胞蛋白聚糖细胞存活率细胞损伤
- 一株小麦内生链格孢霉代谢产物对兔膝软骨细胞的影响被引量：1
- 2016年
- 本研究选择分离自青海大骨节病区小麦麦穗中的一株优势内生链格孢霉,探究其代谢产物对兔软骨细胞的影响。通过显微形态学观察和ITS序列分析鉴定菌种;其代谢产物采用75%乙醇提取,然后依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醚萃取;methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliumbromide(MTT)法检测兔软骨细胞存活率;反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription and polymerase chain reaction)检测软骨细胞蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达量;甲苯胺蓝染色法(toluidine blue,TB)和免疫组化染色法(immunological histological chemistry,IHC)分别检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达。经鉴定实验菌株(编号13-8-A)为互隔链孢霉(Alternaria alternate)。与对照组相比,实验组中的乙醇粗提物能抑制软骨细胞生长,对蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达及其mRNA的表达量均有抑制作用;其他萃取分部提取物都能不同程度地损伤软骨细胞,但它们对这两种蛋白的表达及其mRNA表达量的抑制均弱于相同浓度下乙醇粗提物的处理。互隔链孢霉13-8-A代谢产物中应该存在多种可以损伤软骨细胞且可能具有协同作用的物质。
- 赵玉濛谢晓燕贺兵胡锦涛成博伦张枫张燕殷红
- 关键词：大骨节病内生真菌代谢产物软骨细胞蛋白聚糖
- 不同浓度二甲基亚砜对兔软骨细胞生长的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：探讨作为一些水相难溶性化合物助溶剂的二甲基亚砜（DMSO）在不同浓度下对体外培养兔软骨细胞的存活率及生长的影响。方法分别以含0.1%、0.5%、1.0%、2.0%（v/v） DMSO的培养基体外培养兔软骨细胞，每天定时取样，用MTT法检测不同浓度DMSO存在下的细胞存活率，并用血球计数板计量细胞数。结果不同浓度DMSO对体外培养的兔软骨细胞生长有一定的影响，使用浓度为2.0%（v/v）时对软骨细胞显现较强的抑制作用，但在0.1%～1.0%浓度范围内影响很小。结论在0.1%～1.0%低浓度范围内，DMSO 促溶剂的使用对培养软骨细胞实验的干扰不大，可以忽略。
- 贺兵谢晓燕张枫张燕殷红
- 关键词：软骨细胞细胞培养技术二甲亚砜
- 一株镰孢霉发酵产物不同极性提取物对兔膝软骨细胞的影响被引量：1
- 2018年
- 通过研究一株内生梨孢镰孢霉（Fusarium poae）发酵产物中不同极性提取物对兔膝软骨细胞的影响,初步了解其中毒性物质的基本性质,为进一步探讨真菌毒素在大骨节病发病中的可能作用以及分离新的潜在致病物质打下良好基础。本研究以预实验中筛选出的对软骨细胞有较强毒损作用的F.poae菌株进行摇瓶培养;发酵产物先用75%乙醇进行提取,再将乙醇总提取物用不同极性的溶剂进行萃取;将所得各种次级提取物分别作用于体外培养的兔膝软骨细胞,检测与软骨细胞损伤相关的指标,其中细胞存活率采用噻唑蓝（MTT）显色法,Ⅱ型胶原蛋白及蛋白聚糖的含量分别采用免疫组化法和甲苯胺蓝染色法,二者相应的mRNA表达量用半定量RT-PCR进行检测。结果发现,不同极性溶剂提取所得的石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水提取物,都能在不同程度上造成培养兔软骨细胞的存活率、Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖的含量以及相应mRNA的表达量降低;毒性强弱有随溶剂极性增强而减弱的趋势,以石油醚分部的综合毒损作用最强,其后依次为乙醚、乙酸乙酯和水提取物。镰孢霉发酵产物的各种不同极性提取物中,都存在对软骨细胞相关指标造成程度不等毒损作用的物质。这些结果支持我们关于大骨节病的发病可能和多种真菌毒素的综合作用相关的观点。
- 贺兵谢晓燕谢晓燕
- 关键词：镰孢霉发酵产物软骨细胞大骨节病
- 青海大骨节病区小麦内生镰刀菌和硒对兔膝软骨细胞的影响被引量：4
- 2015年
- 小麦内生镰刀菌5-5-1菌株是从青海大骨节病区穗期小麦籽粒中分离的一株优势内生镰刀菌,本试验通过采用干重法测定菌丝体生长量;MTT(methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliumbromide)法检测软骨细胞存活率;甲苯胺蓝染色法和免疫组化染色法分别检测兔膝软骨细胞内蛋白聚糖(aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白(collagenⅡ)的表达;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测软骨细胞内蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白m RNA的表达水平,探讨了硒对5-5-1菌株生长的影响及不同硒水平下培养该菌株获得的发酵产物对兔膝软骨细胞有关指标的影响。结果表明,硒浓度在0.05~0.5 mg/L的范围内,对5-5-1菌株生长有促进作用,且呈浓度效应;低浓度硒条件下培养的该菌株发酵产物对软骨细胞蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白的合成及其m RNA表达的抑制作用相对较小。由此推断适宜浓度硒具有促进镰刀菌生长的作用,但同时能够减轻其发酵产物对软骨细胞的损伤。
- 张燕张枫谢晓燕贺兵赵玉濛胡锦涛殷红
- 关键词：硒镰刀菌大骨节病蛋白聚糖软骨细胞
- 青海省大骨节病区小麦内生镰刀菌对兔膝软骨细胞的影响
- 大骨节病是一种慢性地方性疾病,严重影响儿童生长发育,目前主要的致病学说主要集中在低硒、粮食真菌污染、水腐殖质等,但其根本的致病原因尚不明确。 本实验采用从青海大骨节病区穗期小麦中分离纯化的优势内生镰刀菌菌株,进行液体发酵...
- 贺兵
- 关键词：大骨节病小麦内生真菌镰刀菌
