许晨
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 肝脏特异性表达分泌型IgD转基因小鼠模型的构建
- 2012年
- 现有的遗传学研究认为高IgD综合征(HIDS)与甲羟戊酸激酶(MVK)基因发生突变有关,但具体的发病机制还不清楚,血清中IgD的升高与HIDS临床表征之间的关系还不知道.本研究运用融合PCR的方法构建肝脏特异性高表达嵌合分泌型IgD(csIgD)载体,并通过显微共注射,基因组PCR和Southern blotting鉴定出7只转基因F0代阳性小鼠.对F1代阳性小鼠在RNA和蛋白质水平分别进行了RT-PCR,Q-PCR和Western blotting,ELISA检测.结果显示,转基因csIgD能够在肝脏特异性表达,并具有遗传稳定性.对阳性小鼠骨髓和脾脏细胞进行的流式分析发现,转基因csIgD的表达并未影响到B细胞的发育.形态解剖学观察,发现一些小鼠出现了皮肤破损和肝脾肾肿大的现象;病理切片显示,肝脾肾组织出现大量的细胞坏死和纤维样蛋白沉淀.TAIL-PCR(thermal asymmetric in terlaced PCR)检测结果表明,目的基因片段没有破坏位于小鼠5号染色体的MVK基因.本转基因小鼠模型的构建,有利于进一步对HIDS发病机制进行探讨.
- 王萍位治国焉博文黄甜苟克勉戴蕴平郑敏王美丽程学谦王喜凤许晨孙亿
