田新
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
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- 脐带静脉内皮下间充质干细胞分离扩增及向成骨与脂肪细胞的
- 目的探讨人脐带静脉内皮下间充质干细胞体外分离、扩增与成骨、成脂肪细胞分化的方法与条件。方法新鲜脐带4h内先用无菌生理盐水冲洗,去除脐静脉中的瘀血,再沿静脉血管灌入12～15ml含1mg/mlⅡ型胶原酶的磷酸盐缓冲生理盐水...
- 符仁义田新陈艳
- 关键词：脐带间充质干细胞
- 文献传递
- 脐血间充质干细胞的分离扩增及向成骨及脂肪细胞的分化被引量：13
- 2007年
- 目的探讨新生儿脐血间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）体外分离、纯化、扩增，以及向成骨及脂肪细胞定向诱导分化的方法与条件。方法无菌条件下收集新生儿脐血60～120ml，枸橼酸钠抗凝，以Ficoll—Hypaque淋巴细胞分离液密度梯度法、沉降红细胞后密度梯度法及CD34^＋免疫磁珠负选法分离单个核细胞（mononuclear cells，MNCs）。分离获得的MNCs采用L—DMEM培养基或Mesencult^TM培养基／10％胎牛血清进行MSCs培养传代，获得第3代集落生长细胞作流式细胞仪表面抗原测定，并向成骨及脂肪细胞定向诱导分化，成骨细胞钙沉积经茜素红染色鉴定，脂肪细胞胞浆油滴经油红染色鉴定。结果经沉降红细胞后分离的MNCs，使用Mesencult^TM培养基／10％胎牛血清培养成功率高，第3代可出现明显的集落生长，而另两种方法分离培养的细胞则难以形成集落；集落细胞表面抗原测定表达CD29、CD59、CD71而不表达CD34、CD45及HLA—DR等分子。成骨定向诱导分化的集落细胞经茜素红染色胞浆中出现有大量的钙沉积；成脂肪定向诱导分化的集落细胞油红染色示胞浆充满油滴空泡。结论新生儿脐血中可分离出MSCs，并可在体外进行培养扩增。以甲基纤维素沉降红细胞后密度梯度离心分离的MNCs培养较为有效，集落细胞表达基质细胞表面抗原，能够向成骨细胞及成脂肪细胞定向诱导分化。
- 田新符仁义邓力智伟周晨燕郭霞朱易萍雷明雨李世均
- 关键词：新生儿脐血间充质干细胞诱导分化
- TEL-AML1融合基因阳性及阴性儿童急性淋巴细胞白血病的临床特征比较被引量：1
- 2007年
- 目的探讨TEL-AMLl融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）中的发生率并比较儿童TEL-AMLl融合基因阳性及阴性ALL患儿的临床特点。方法对确诊的95例ALL患儿骨髓或外周血标本采用巢式逆转录．聚合酶链反应（reverse transeripdon—polymerase chain reaction，RT-PCR）方法行TEL-AMLl融合基因筛查，同时分析TEL-AMLl融合基因阳性及阴性ALL患儿临床、MIC分型及治疗反应特点。结果95例儿童ALL患儿中，TEL-AMLl融合基因阳性率21．05％（20／95）。TEL-AMLl融合基因阳性组ALL患儿初诊时肝脾肿大程度、外周血白细胞计数中位数（7．40×10^9／L，阴性组为18．70×10^9／L）及幼稚细胞绝对计数中位数（2．45×10^9／L，阴性组为11．66×10^9／L）、贫血程度[（61．45±13．46）g／L，阴性组为（75．89±23．11）g／L]、血清乳酸脱氢酶水平[（621．47±335．85）U／L，阴性组为（1566．64±1720．45）U／L]均显著低于TEL-AMLl融合基因阴性组AIJJ患儿（P分别为0．006，〈0．001，0．011，0．013，0．003和0．020），两组年龄、性别比例、血小板计数及初诊时骨髓幼稚淋巴细胞百分率的差异无统计学意义。TEL-AMLl融合基因阳性组ALL患儿免疫表型多为前体B细胞型，两组患儿CDl3、CD33和CD34的表达阳性率差异无统计学意义。参与治疗的12例TEL-AMLl阳性组患儿泼尼松敏感试验全部敏感（100％），而阴性组患儿泼尼松不敏感者为27．50％（11／40），两者敏感率差异差异有统计学意义（P=0．041），但两组患儿第15天骨髓完全缓解率差异无统计学意义。结论伴有TEL-AMLl融合基因表达的ALL患儿初诊时体内肿瘤负荷显著低于阴性组患儿，其泼尼松敏感试验敏感率显著高于阴性组患儿，这些临床特征是小儿TEL-AMLl融合基因阳性ALL治疗效果好、预后佳的重要因素。
- 郭霞李强朱易萍周晨燕高举李熙鸿潘玲丽李丰益田新刘海婷
- 关键词：急性淋巴细胞白血病
- 脐带组织间充质干细胞分离及向成骨与脂肪细胞的分化被引量：3
- 2008年
- 目的探讨人脐带组织间充质干细胞体外分离、扩增与成骨、成脂肪细胞诱导分化的方法与条件。方法取脐带沿血管长轴切开,去掉血管,再将脐带重新缝合形成环状,灌入胶原酶悬液,6～8h后灌洗离心,获取细胞培养、扩增,细胞呈集落生长后传代,取传代细胞进一步行免疫表型测定和成骨、成脂肪细胞诱导分化。结果去除血管后获取脐带组织细胞的方法,可获得贴壁生长的细胞,呈短棒状或梭形样细胞,易扩增和形成集落,有基质细胞免疫表型表达,成骨诱导分化的细胞茜素红染色胞浆中有大量的钙沉积,碱性磷酸酶钙钴法染色胞质呈灰黑色,阳性细胞百分率>85%;成脂肪分化的细胞油红染色示胞浆充满了油滴空泡。结论脐带组织存在具有间叶细胞分化能力的间充质干细胞,并可在体外进行培养扩增形成集落细胞传代,传代细胞表达基质细胞表面抗原,能够向成骨细胞、成脂肪细胞分化。
- 田新符仁义陈艳袁粒星
- 关键词：脐带间充质干细胞
