王艳君 作品数:30 被引量:152 H指数:5 供职机构: 福建师范大学福清分校 更多>> 发文基金: 福建省教育厅科技项目 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 环境科学与工程 更多>>
纳米SiO_2改性壳聚糖载体的制备及固定化壳聚糖酶的研究 被引量:6 2012年 利用壳聚糖与硅酸乙酯(TEOS)形成的溶胶-凝胶制备杂化载体,经戊二醛交联后固定化壳聚糖酶,结合扫描电镜观察、X射线衍射及红外光谱分析对杂化载体进行了表征,初步比较了固定化酶与游离酶的酶学特性。结果表明,以5%的戊二醛浓度交联载体时,固定化酶的活性最高;最大结合酶量为2mL(U=2.5);固定化酶的最适pH7.0,酶活曲线向碱性偏移;固定化酶的最适酶促反应温度比游离酶升高5℃,在更宽的温度范围内具有活性。通过Lineweaver-Burk作图得出固定化酶的K'm为10.64g/L,较游离酶1.29g/L有所升高。该固定化酶具有较强的热稳定性,重复使用10次后,酶活力损失小于30%;在4℃低温条件下,稳定性较好,半衰期约为28d。 王艳君 卓少玲 陈盛关键词:壳聚糖酶 固定化 一种快速获得基因密码子偏爱性改造的方法——SOE-PCR 被引量:6 2008年 SOE-PCR采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成重叠链,在不需要内切酶消化和连接酶处理的条件下实现DNA片段的拼接,能够高效、快速地实现基因的定点突变。应用SOE-PCR原理成功地实现了对几丁质酶基因chi58的5个位点的突变,构建了几丁质酶基因密码子偏爱性改造突变体—chi58A。实验证明,SOE-PCR具有简捷、快速、高效的优点。扩增过程中未引入其他突变,获得的chi58A突变体基因片段可以用于后续的分子克隆。 王艳君 杨谦关键词:多点突变 产壳聚糖酶菌株的单因素及复合条件诱变育种 被引量:3 2012年 以产壳聚糖酶菌株M2为出发菌株,分别采用紫外线诱变、亚硝酸钠诱变及两者的复合诱变方式对其孢子悬液进行诱变处理,以获得高产壳聚糖酶的突变菌株为目的。结果表明,突变株的酶活力高达8.135 U/mL,比原始出发菌株提高了1.381倍。经比较分析验证,复合诱变的方法是寻找高活力突变菌株的较好方法,而单因素的紫外诱变方法也具有简单快捷的优势,复合诱变比紫外线诱变后的产壳聚糖酶菌株酶活力提高了25.15%,比亚硝酸钠诱变后的菌株酶活力提高了32.82%。 王艳君 廖春林关键词:壳聚糖酶 紫外诱变 复合诱变 氨基化菌丝体的制备及其对甲基橙的吸附特性 2017年 以环氧氯丙烷为交联剂,将多乙烯多胺嫁接于青霉菌丝体表面,探讨氨基化菌丝体制备过程中的影响因素以及经氨基化改造后的菌丝体对甲基橙的吸附效果.结果表明,环氧氯丙烷的最优反应时间为4 h,环氧氯丙烷投加量为1 m L;多乙烯多胺反应时间为4 h,多乙烯多胺投加量为1 m L,最佳反应温度为34℃.经红外光谱检测,氨基化菌丝体构建成功,氨基化改造后的菌丝体对甲基橙的最大吸附量为460 mg·g^(-1). 王艳君 郭燕萍 陈盛关键词:环氧氯丙烷 多乙烯多胺 甲基橙 产壳聚糖酶菌株的分离、鉴定及发酵条件优化 被引量:4 2012年 从废弃食用菌培养基周围土壤中分离得到一株产壳聚糖酶的菌株,结合形态学特征与26SrDNA序列进行了分类学鉴定,结果表明,该菌株与高山被孢霉(Mortierella alpina)的同源性较高,达99%,初步鉴定为被孢霉属的一种,命名为KB-1001。并对该菌株的产酶特性进行了研究,结果表明,该菌株液体发酵培养产酶高峰出现在第84h,最适碳源为1%的水溶性壳聚糖,最适氮源为1.87%的(NH4)2SO4,摇瓶培养的最适初始pH值为6.0,最适温度为28℃~30℃,接种量为4%,最佳装瓶量为70 mL/250 mL,150 r/min摇瓶培养,经优化培养后,该菌株发酵液中壳聚糖酶活力最高达到8.130 U/mL。比原始的未经发酵条件优化的产酶活性提高了12.78%。 王艳君 陈盛 杨谦 谢建忠关键词:壳聚糖酶 菌株筛选 反硝化抑制硫酸盐还原菌活性机理及应用 被引量:20 2009年 根据目前油田杀灭硫酸盐还原菌的状况,提出反硝化抑制硫酸盐还原菌活性的设想.综述了反硝化抑制硫酸盐还原菌活性的机理,及其在国外油田污水处理中工程应用的效果、影响因素和存在的不足.提出在机理研究中,加强蛋白组学和环境基因组学方面的研究,特别是投加抑制物质如硝酸盐、反硝化细菌等对硫酸盐还原菌本身的基因和蛋白表达的影响,代谢途径的抑制研究,加强微生物分子生态学方法在理论研究和工程实践中的应用.同时对该机理在我国大庆油田的应用提出一些研究思路. 魏利 王艳君 马放 张建祺关键词:硫酸盐还原菌 角毛壳菌木聚糖酶基因xyn24在毕赤酵母中的高效表达及产酶的固定化研究 被引量:2 2012年 以生防真菌角毛壳菌(Chaetomium cupreum)菌丝体时期的基因文库为基础,筛选得到编码木聚糖酶基因的片段,经拼接及RT-PCR扩增得到全长690bp的编码β-1,4-木聚糖酶基因序列,利用基因重组的方法构建可在毕赤酵母分泌表达系统中表达的木聚糖酶重组载体,并转化毕赤酵母得到重组子。在毕赤酵母醇氧化酶AOX1基因启动子的作用下,重组蛋白得到高效表达,表达蛋白分泌到培养基中,分子质量约为19.4 ku;以水溶性壳聚糖为底物测得酶活为2.72 U/mL。SDS及金属离子Mn2+对酶活性具有较强的激活作用;转化子经10代传代培养后酶活性稳定。通过制备的壳聚糖微球对木聚糖酶进行了固定化研究,并与游离酶的性质进行了比较。结果表明:固定化酶的最适pH范围与游离酶相比向酸性方向偏移;固定化酶的最适反应温度、酸碱稳定性及热稳定性均有所提高。 王艳君 杨谦关键词:角毛壳菌 木聚糖酶 毕赤酵母 固定化 一种种子包衣剂及其制备方法、玉米种子包衣制备方法 本发明涉及一种种子包衣剂及其制备方法、玉米种子包衣剂制备方法。种子包衣剂包括以下组分,牡蛎壳、炭化稻壳、褐煤、过氧化氢和粘合剂,其制备方法为S1:褐煤经过氧化氢提取得到褐煤提取物,牡蛎壳经粉碎筛选加热得到牡蛎壳粉,炭化稻... 曹智 王昌伟 姚忠亮 邹文桐 林秀珠 刘华 王艳君文献传递 角毛壳菌几丁质酶基因chi58多点突变及在毕赤酵母中的高效表达 被引量:3 2008年 应用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,gene SOEing),简称SOE-PCR对角毛壳菌(Chaetomium cupreum)的几丁质酶基因chi58进行多点突变。依据毕赤酵母密码子偏爱性,将毕赤酵母中编码Arg使用频率几乎为0的密码子CGC突变为使用频率高的AGA,构建了含有正确突变的酵母表达载体pPIC9K-chi58A,电转化毕赤酵母GS115,获得的重组酵母株在诱导120h酶活力最高,平均可达101.71U/mL±3.33U/mL;其活力比未优化重组酵母株(31.83U/mL±4.85U/mL)提高了约3倍,且经10代传代培养后遗传稳定性良好。表达产物的SDS-PAGE分析表明,酶蛋白分子大小为58kD。 王艳君 杨谦关键词:角毛壳菌 几丁质酶 多点突变 毕赤酵母 一种炭上培养苔藓的方法 本发明涉及一种炭上培养苔藓的方法,其步骤包括:将苔藓、红壤与营养基质,加入水混合后,涂抹在炭上,进行培养直至生长完成。本发明解决了苔藓及其所需营养物质在炭上附着性问题,可成功在的炭上培养苔藓,并可根据需要设计成景观苔藓培... 曹智 刘华 林秀珠 王艳君 王昌伟 姚忠亮 邹文桐文献传递