林健文
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
- 供职机构：西南大学生物技术中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用GFP表达系统检测球孢白僵菌侵染昆虫过程被引量：10
- 2008年
- 绿色荧光蛋白(GFP)作为一种重要的报告基因,在病原菌和寄主之间的互作研究中具有良好的应用前景。利用草丁膦抗性基因bar为筛选标记,构建了组成性表达绿色荧光蛋白基因egfp的载体pBG,并转入球孢白僵菌获得成功表达。将转化子接种菜青虫进行生物测定表明,组成性表达egfp不影响球孢白僵菌的毒力。进一步利用冰冻切片和荧光显微观察技术监测球孢白僵菌侵染寄主行为,结果显示,通过荧光观察可清楚的检测到病原菌在昆虫体表的附着、菌丝穿透体壁以及菌丝从寄主体内长出等侵染过程。由此表明,GFP可有效用于球孢白僵菌的遗传标记,进行病原菌的鉴别、侵染致病机理及相关功能基因的表达模式研究。
- 金凯张永军罗志兵林健文裴炎
- 关键词：昆虫病原真菌冰冻切片荧光检测
- 变温干燥固体发酵产物对球孢白僵菌分生孢子性能的影响被引量：6
- 2008年
- 【目的】评价球孢白僵菌固体发酵产物的干燥温度对产后分生孢子性能的影响。【方法】采用28℃和35℃组合的7种恒温或变温处理干燥发酵产物,分析收获的分生孢子质量。【结果】变温干燥可显著降低产后孢子粉的杂菌污染。干燥温度对活孢率和孢子萌发速度影响不一致。35℃恒温干燥5h后活孢率与新鲜孢子无明显差异,但萌发中时缩短了9.3%。干燥处理提高了孢子对高温和紫外辐射的耐受性。适当的变温干燥比恒温干燥有利于增强孢子抗逆性。干燥温度影响分生孢子胞内海藻糖积累,但其含量与抗逆性无直接相关性。优化干燥温度可提高产后分生孢子毒力。在370～450孢子/mm2剂量下,经28℃24h后升至35℃干燥2h或35℃恒温干燥5h的分生孢子对桃蚜的致死中时分别比新鲜孢子缩短了10.6h和7.5h。【结论】球孢白僵菌固体发酵产物的干燥温度是影响产后孢子粉杂菌污染、孢子活力、抗逆性和毒力的重要因素。
- 李尊华林健文马金成吴迪张永军
- 关键词：球孢白僵菌固体发酵干燥温度毒力
- 莱氏野村菌固体发酵培养基筛选与发酵条件优化被引量：8
- 2009年
- 为探索适宜生产莱氏野村菌分生孢子的培养基及培养条件,利用单因素试验对大豆、小麦、燕麦、大米等材料进行筛选,并优化发酵条件。结果表明,不同基质对莱氏野村菌分生孢子产生、孢子活力、抗逆性和毒力有明显影响。莱氏野村菌在大豆上的产孢量和孢子活力明显高于其它三种基质,但小麦上培养的孢子抗逆性和毒力明显高于其它处理。小麦预浸泡12h后进行发酵,产孢量比对照提高25.9%;小麦浸泡后粉碎成颗粒,可显著提高产孢量;在粉碎的麦粒中添加2/5～3/5(w/w)的谷壳增加其透气性,有利于分生孢子产生,产孢量比对照提高34.7%～42.0%。固体基质接种后的初始含水量和培养温度是影响产孢的重要因素,含水量为65%、培养温度为24～26℃适宜菌体生长和分生孢子产生。光照是分生孢子产生的必需条件,连续光照有利于分生孢子产生。
- 林健文罗志兵骆星丹张素红裴炎张永军
- 关键词：莱氏野村菌固体发酵培养基配方发酵条件优化
