杨爽
- 作品数:35 被引量:52H指数:4
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生理学更多>>
- 表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析被引量:2
- 2008年
- 骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中比较了添加和去除压力筛选中使用的MTX对细胞生长,rhBMP2基因拷贝数及rhBMP2分泌蛋白表达的影响;检测了该细胞株在无血清培养基中可以连续表达rhBMP2的时间以及培养基中rhBMP2的温度敏感性等等。该研究为进一步采用动物细胞规模化培养技术生产rhBMP2奠定了基础。
- 翟春利闫继东杨爽杜君袁伟王兆奇朱天慧
- 关键词:BMP2稳定性
- 一种吡咯并嘧啶化合物及其制备方法、药物组合物和应用
- 本发明公开了一种如式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐,其中,R<Sub>1</Sub>选自H、烷基、芳基、取代芳基、烷基酰胺、芳基酰胺结构中的任意一种;R<Sub>2</Sub>选自H、烷基、卤素、芳基、取代芳基结...
- 杨爽欧洋李建军杨光张坤王璇
- 高效表达rhBMP2的CHO细胞株及其建立方法
- 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr<Sup>-</Sup>)作为宿主细胞,稳定转染外源的hBMP2质粒,经药物抗性筛选和基因扩增...
- 朱天慧张道永闫继东杨爽
- 文献传递
- 一种用于分选型流式细胞仪的高通量收集装置
- 本实用新型公开了一种用于分选型流式细胞仪的高通量收集装置,包括一体式挂架、多个流式细胞引流管、多根连接管;一体式挂架上设置有多个盲孔,与每个盲孔的侧壁连通开设有缺口;多个流式细胞引流管对应放置在多个盲孔内;多根连接管的第...
- 王航杨爽
- 利用同源蛋白的信号肽和前肽序列在CHO细胞中表达重组人BMP6被引量:1
- 2007年
- BMP6属于TGF-β超家族,具有较强的骨诱导作用。主要利用BMP6自身的信号肽、前肽与成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP6;同时利用BMP2的信号肽、前肽与BMP6的成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP2/6。将两种质粒分别瞬时转染Cos7细胞,发现质粒pcDNA-BMP2/6表达rhBMP6的效率高于质粒pcDNA-BMP6。然后将质粒pcDNA-BMP2/6与含二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的表达质粒共转染dhfr缺陷型的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,经G418筛选、氨甲蝶呤(MTX)介导目的基因扩增、亚克隆后得到表达rhBMP6成熟肽的单克隆细胞株。将表达产物rhBMP6初步纯化后,能诱导前成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化,显示其具有骨诱导作用。
- 闫继东杨爽吕树军雷荣悦朱天慧
- 关键词:骨诱导作用
- 原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析
- 2008年
- 目的研究原癌基因LMO2短剪切模式(LMO2-C)的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白(MBP)沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达;半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白,利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合;哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合,而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合,抑制率达(81.13±0.68)%;半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中,GPA基因相对表达水平下调(51.00±1.58)%。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白,并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。
- 袁伟杨爽孙伟杜君翟春利王兆琦朱天慧
- 关键词:基因双杂交系统技术
- 重组人骨形态发生蛋白2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析被引量:9
- 2006年
- 构建真核表达载体pCDNA3.1(+)-hBMP-2,与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞,以含有700μg/mLG418的IMDM进行选择性培养,筛选抗性克隆,并用MTX扩增,提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2蛋白进行Westernblot检测,还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带,非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带,提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的,且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rCHO(hBMP-2)单克隆细胞株,ELISA法检测rhBMP-2表达水平,最高可达7.83μg/24h/106cells。活性分析结果表明,表达的rhBMP-2具有很强的生物学活性。
- 张道永杨爽吕树军闫继东朱天慧
- 关键词:人骨形态发生蛋白2CHO共转染C2C12
- miR-451a抑制肝癌细胞的增殖和转移
- 肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,全世界及全国发病率及死亡率居高。肝癌的早期筛查对于诊断治疗非常重要,而血清中外泌体包含的miRNA筛查是一个近期研究较多的简便易行的办法。我们收取了肝癌病人和正常人的血清并提取外泌体筛选...
- 赵少荣杨爽
- 关键词:细胞增殖肿瘤转移血管新生
- 两种聚丙烯酰胺凝胶银染方法的分析:背景形成的机制(英文)
- 2010年
- 应用两种属于同一分类的硝酸银(或酸式)银染方法检测聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的不同的蛋白质,发现成份相同的凝胶产生了深浅不同的背景,从而揭示了凝胶背景产生的另一个原因是与所使用的银染方法中的化学条件有关.这两种方法的监测灵敏度相同,都可检测纳克级的微量蛋白质.同时,对银染方法使用中出现的异常情况进行了分析.
- 乔玉欢米东杨爽朱天慧
- 关键词:蛋白质银染
- 肝癌动物模型研究进展被引量:5
- 2016年
- 在世界范围内肝癌位居恶性肿瘤发病率的第五位,是导致癌症相关死亡的第二大疾病[1]。肝癌易复发和转移,预后效果差,研究表明,肝癌患者肝切除术后5年存活率仅为30%~40%[2]。肝癌的发生是一个多阶段逐步演变恶化的过程。与肝癌发生相关的危险因素包括病毒感染~[3]、化学致癌物接触~[4]、酗酒~[5]等,因此,研究如何提高肝癌诊断,加强预防和改进治疗措施至关重要。
- 王冠文杨爽张全胜
- 关键词:肝癌动物模型化学致癌物肝癌发生基因表达系统肝癌模型原位移植瘤