李少华
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 5-脱氧杂氮胞苷抑制小鼠附植前的胚胎发育(英文)被引量：4
- 2009年
- DNA甲基化在哺乳动物发育过程中有关键作用.在小鼠附植前胚胎发育过程中,DNA甲基化一直处于动态变化过程中.通过将体外受精胚在5-AZA-CdR中持续培养,研究5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育的影响,为附植前胚胎发育机理的研究及5-AZA-CdR的毒副作用研究提供试验基础.从原核期加入不同浓度的5-AZA-CdR时,胚胎不能发育到桑椹胚(0.2和1.0μmol/L)和4-细胞胚(5.0μmol/L);从2-细胞期加入时,胚胎阻滞于未致密化的8-细胞(0.2和1.0μmol/L)和3/4-细胞期(5.0μmol/L);而当从4-细胞加入时,虽然胚胎能够发育到早期桑椹胚,但发育比例同对照相比显著降低(P<0.05).进一步检测凋亡、基因组DNA甲基化和整体转录活性,结果显示,高浓度的5-AZA-CdR导致8-细胞和早期桑椹胚发生早期凋亡,而低浓度的5-AZA-CdR引起8-细胞和早期桑椹胚基因组DNA甲基化的降低和转录活性的降低,并且这种降低呈浓度依赖性.所以加入低浓度的5-AZA-CdR时,胚胎的DNA甲基化降低,引起转录活性的降低,进而导致胚胎发育的停滞.
- 于建宁李少华王丹秋王蒙林飞刘红林
- 关键词：DNA甲基化转录活性
- 排卵后老化卵母细胞的染色体形态变化被引量：3
- 2007年
- 小鼠排卵后的卵母细胞停滞在MⅡ期,如果此时的卵母细胞未能及时受精,随着在输卵管中停留时间的延长,卵母细胞会逐渐发生老化。这种卵母细胞的老化会导致包括人在内的哺乳动物的胚胎发育异常,所以很有必要研究排卵后卵母细胞的老化机理。本实验主要研究小鼠排卵后的卵母细胞在体内老化过程中的染色体形态变化,发现随着老化时间的延长,有更高比例(65%,hCG后34h)的卵母细胞的染色体呈不对称和松散的状态,进一步研究表明,这种染色体的变化可能与H3K14、H4K16的乙酰化升高,及H3K9的甲基化降低有关。
- 于建宁王蒙王丹秋李少华邵根宝吴彩凤刘红林
- 关键词：卵母细胞染色体组蛋白乙酰化甲基化
- 老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变被引量：1
- 2007年
- 分别取年轻C57/B6雌性小鼠(3-4周龄)与老龄C57/B6雌性小鼠(40-42周龄)不同发育时期的卵母细胞,利用免疫荧光技术观察其组蛋白不同赖氨酸位点乙酰化的变化,并用RT-PCR法检测年轻小鼠与老龄小鼠卵母细胞不同发育时期Hdac1与Hdac3(组蛋白去乙酰化酶)mRNA的相对表达量。结果显示:(1)年轻小鼠和老龄小鼠卵母细胞组蛋白H4/K12、H4/K16、H4/K5及H3/K14的乙酰化水平均随发育进程逐渐升高,在完全生长期乙酰化水平达到峰值,至MⅡ期,除H4/K12外,其它三个位点的乙酰化全部消失;与年轻小鼠相比,完全生长期时老龄小鼠卵母细胞组蛋白乙酰化水平较低;(2)在完全生长期之前,年轻小鼠和老龄小鼠卵中Hdac-1与Hdac-3 mRNA的表达量呈逐渐降低趋势,但老龄小鼠在MⅡ期有所升高。与年轻小鼠相比,老龄小鼠完全生长期前各时期卵母细胞中Hdac1 mRNA的表达量均极显著降低(P<0.01);而Hdac3 mRNA的表达量二者之间无显著差异。结果表明:老龄小鼠卵母细胞中组蛋白乙酰化和组蛋白去乙酰化酶表达出现了异常变化。
- 王丹秋于建宁李少华邵根宝刘红林
- 关键词：老龄小鼠组蛋白乙酰化HDAC1荧光实时定量PCR
- U2afbp-rs基因研究进展
- 2006年
- U2afbp-rs基因是一个印记基因,它在附植前胚胎中就表现出强烈的印记作用。因此,U2afbp-rs基因是研究体细胞核移植过程中卵细胞质对供体核DNA甲基化和印记基因表达调控的良好模型。本文对国内外有关U2afbp-rs基因的研究进展,特别是对U2afbp-rs基因的定位、结构、印记机制以及其在胚胎中的表达特征进行了综述。
- 李少华刘红林
- 关键词：印记
- 小鼠卵细胞质对供体核DNA甲基化和“印记”基因表达的调控
- 为了区分核移植重组胚中所表达的U2afbp-rs基因是来源于父源还是母源的，我利用单核苷酸单链构象多态性/(SSCP/)方法检测KM、B6、Balb／c、129S1、C3H、DBA和A／J品系中小鼠U2afbp-rs基因...
- 李少华
- 关键词：核移植DNA甲基化基因组印记基因表达调控
- 文献传递
- 小鼠卵细胞质对供体核DNA甲基化和U2afbp-rs基因表达的调控
- 2007年
- 利用细胞核移植技术将NIH3T3细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球,分别移植到去核MⅡ期受体卵母细胞中,通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附植前各时期胚胎DNA甲基化水平的变化,以探明克隆胚细胞核去分化与DNA甲基化的相互关系.利用Real-timePCR技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附植前各时期胚胎中,印记基因U2afbp-rs基因以及非印记基因eIF-4C基因表达量的变化,以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控.结果表明,克隆胚供体核基因组DNA在核移植后并没有发生主动去甲基化.孤雌桑椹胚核移植后重组胚中U2afbp-rs基因和eIF-4C基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚,但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同,说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用.
- 李少华于建宁王丹秋武玮林飞刘红林
- 关键词：核移植DNA甲基化基因组印记基因表达调控
